外用制剂 中。它是1984年从含有细菌链霉菌（Streptomyces tsukubaensis)的日本土壤样品的发酵 液中发现的23-元大环内酯物。药物以商品名Prograf? (每天给定两次）、Advagraf?:(缓 释制剂，允许每天给药一次)和Protopic? (外用制剂）出售。在特定实施方式中，低剂量的 他克莫司与干细胞动员剂，例如，普乐沙福组合使用。显然，在某些实施方式中，低剂量的他 克莫司可充当干细胞动员剂和免疫抑制剂。因此，在此类实施方式中，低剂量的他克莫司可 用于改善创伤愈合。
[0068] IV、药物组合物和施用
[0069] 因此，本发明的药物组合物可以包含有效量的干细胞动员剂和/或免疫抑制剂。本 发明还预期使用具有干细胞动员剂和免疫抑制剂特征的药剂。例如，他克莫司可以用作干 细胞动员剂和免疫抑制剂。此外，本发明预期使用有效量的至少一种干细胞动员剂和/或至 少一种免疫抑制剂。如本文所用，术语"有效的"意指足以实现期望的、预料的或预期的结 果。更具体地，"有效量"或"治疗有效量"可互换使用并且指提供期望的"治疗"（本文定义 的）或治疗效果所必需的干细胞动员剂和/或免疫抑制剂的量，例如，有效防止、减轻、治疗 或改善疾病的症状或延长正治疗的对象的存活的量，所述干细胞动员剂和/或免疫抑制剂 可能与另一治疗剂进一步组合。在特定实施方式中，本发明的药物组合物以治疗有效量施 用以改善患者的创伤愈合。如本领域普通技术人员所理解，所需的精确量随对象而不同，这 取决于对象的年龄、一般状况、正治疗的病况的严重性、施用的特定化合物和/或组合物等。 在任何单独病例中适当的"治疗有效量"可由本领域普通技术人员通过参考相关的文章和 文献和/或通过使用常规实验来确定。
[0070] 在某些实施方式中，免疫抑制剂(例如，他克莫司）以低剂量施用。在本发明的上下 文中，短语他克莫司（与干细胞动员剂组合或单独的）的"低剂量（10 W d 〇 s e) "或"低剂量 (low dose amount)"指使用低于通常用于免疫抑制的免疫抑制剂(例如，他克莫司）的特定 量。在某些实施方式中，低剂量为用于免疫抑制的量的约1/10。在其它实施方式中，他克莫 司的低剂量为用于免疫抑制的量的约1/2、约1/3、约1/4、约1/5、约1/6、约1/7、约1/8或约1/ 9。在进一步实施方式中，他克莫司的低剂量比通常用于特定情形的量少约0.9倍、约0.8倍、 约0.7倍、约0.6倍、约0.5倍、约0.4倍、约0.3倍、约0.2倍、约0.1倍、约0.09倍、约0.08倍、约 0.07倍、约0.06倍、约0.05倍、约0.04倍、约0.03倍、约0.02倍、约0.01倍、约0.009倍、约0.08 倍或约0.07倍(即，通常的免疫抑制量可以不同）。在【具体实施方式】中，低剂量的免疫抑制剂 (例如，他克莫司）为约0 · 〇lmg/kg至约0 · 5mg/kg，更具体地，约0 · 01mg/kg至0 · 5mg/kg、约 0 · 01mg/kg至约0 · 45mg/kg、约0 · 01mg/kg至约0 · 4mg/kg、约0 · 01mg/kg至约0 · 35mg/kg、约 0 · 06mg/kg至约0 · 45mg/kg、约0 · 07mg/kg至约0 · 4mg/kg、约0 · 08mg/kg至约0 · 35mg/kg、约 0 · 09mg/kg至约0 · 3mg/kg、约0 · lmg/kg至约0 · 25mg/kg等。在【具体实施方式】中，低剂量的他克 莫司为约 0 · Olmg/kg至0 · 074mg/kg。
[0071 ]用于免疫抑制的他克莫司的正常剂量为约0. lmg/kg/天-0.3mg/kg/天（口服）以及 约0.01 mg/kg/天-0.05mg/kg/天（IV)。在某些实施方式中，他克莫司的低剂量为正常剂量的 约 1/10，例如，约0 · 〇lmg/kg/天-0 · 03mg/kg/天（口服）以及约0 · 001mg/kg/天-0 · 005mg/kg/ 天（IV)。在其它实施方式中，他克莫司的低剂量为用于免疫抑制的正常剂量的约1/5、1/6、 1/7、1/8、1/9、1/10、1/11、1/12、1/13、1/14 或至少 1/15。
[0072]在其它实施方式中，低剂量的他克莫司包括低于用于口服施用的约0.075mg/kg/ 天的任何量。低剂量可包括低于约 0.07、0.065、0.06、0.055、0.05、0.045、0.04、0.035、 0·03、0·029、0·028、0·027、0·026、0·025、0·024、0·023、0·022、0·021、0·020、0·019、0·018、 0·017、0·016、0·05、0·014、0·013、0·012、0·011、0·010、0·009、0·008、0·007、0·006、0·005、 0 · 004、0 · 003、0 · 002或 0 · 001mg/kg/天的任何量。
[0073]对于静脉内施用，他克莫司的低剂量包括低于约0.0 lmg/kg/天的任何量。低剂量 可包括低于约 0.01、0.009、0.008、0.007、0.006、0.005、0.004、0.003、0.002S0.001mg/kg/ 天的任何量。
[0074]在进一步实施方式中，低剂量的他克莫司导致约0 . lng/ml至约10ng/ml的血液浓 度范围。浓度可低于约 l〇ng/ml、9ng/ml、8ng/ml、7ng/ml、6ng/ml、5ng/ml、4ng/ml、3ng/ml、 2ng/ml、lng/ml、0·9ng/ml、0·8ng/ml、0·7ng/ml、0·6ng/ml、0·5ng/ml、0.4ng/ml、0·3ng/ml、 0.2ng/ml或0. lng/ml。在更具体的实施方式中，对于口服和IV而言，血液中他克莫司浓度低 于约 5ng/ml 〇
[0075] 本发明的药物组合物为适于体内施用于对象的生物上相容的形式。药物组合物还 可包括药学上可接受的载体。术语"药学上可接受的"意指由美国联邦或州政府的管理机构 批准的、或在美国药典或其它公知的药典中列出的，以用于动物，且更具体地用于人。术语 "载体"是指与干细胞动员剂和/或免疫抑制剂一起施用的稀释剂、佐剂、赋形剂或媒介物。 此类药物载体可为无菌液体，如水和油，包括石油来源、动物来源、植物来源或合成来源的 油，包括但不限于花生油、大豆油、矿物油、芝麻油等。当口服施用药物组合物时，水可以为 载体。当静脉内施用药物组合物时，盐水和水性右旋糖可以为载体。盐溶液和水性右旋糖以 及甘油溶液可以用作可注射溶液的液体载体。合适的药物赋形剂包括淀粉、葡萄糖、乳糖、 蔗糖、明胶、麦芽、米、面粉、白垩、硅胶、硬脂酸钠、单硬脂酸甘油酯、滑石、氯化钠、脱脂奶 粉、丙三醇、丙烯、乙二醇、水、乙醇等。药物组合物还可以含有微量的润湿剂或乳化剂或PH 缓冲剂。
[0076] 本发明的药物组合物可采用溶液、悬浮液、乳液、片剂、丸剂、胶囊、粉剂、缓释制剂 的形式等。可将组合物配制成含有常规的粘合剂和载体如甘油三酯的栓剂。口服制剂可以 包括标准载体，如药物级的甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、纤维素、碳酸镁等。在具 体实施方式中，药物组合物包含有效量的干细胞动员剂和/或免疫抑制剂以及合适量的药 学上可接受的载体以便向患者提供适当的施用形式。剂型应适合施用方式。
[0077] 本发明的药物组合物可以通过任何特定的施用途径施用，所述施用途径包括但不 限于口服方式、肠胃外方式、皮下方式、肌内方式、静脉内方式、关节内（intrarticular)、支 气管内方式、腹内方式、囊内方式、软骨内方式、腔内方式、体腔内方式、小脑内 (intracelebellar)方式、脑室内方式、结肠内方式、颈管内方式、胃内方式、肝内方式、心肌 内方式、骨豁内（intraosteal)方式、骨内（intraosseous)方式、骨盆内方式、心包内 (intraperi cardiac)、腹膜内方式、胸膜内方式、前列腺内方式、肺内方式、直肠内方式、肾 内方式、视网膜内方式、脊柱内方式、滑膜内方式、胸廓内方式、子宫内方式、膀胱内方式、推 注方式、阴道方式、直肠方式、颊部方式、舌下方式、鼻内方式、离子电渗疗法方式或经皮方 式。大多数合适的途径为口服施用或注射。在某些实施方式中，皮下注射为优选的。
[0078] 通常，本文公开的包含干细胞动员剂和/或免疫抑制剂的药物组合物可以单独使 用(例如，免疫抑制剂与干细胞动员剂一起施用)或与以通过常规试验限定的适当剂量的其 它治疗剂同时使用以便获得最佳功效同时使任何潜在的毒性最小化。利用本发明的药物组 合物的给药方案可以根据多种因素选择，所述因素包括患者的类型、种类、年龄、体重、性 另IJ、医学状况;待治疗的病况的严重性;施用途径;患者的肾功能和肝功能；以及使用的特定 药物组合物。本领域普通医师可容易地确定防止、抵抗或停滞疾患的进展所需的有效量的 药物组合物（以及包括治疗剂在内的潜在的其它药剂)并开处方。
[0079] 在产生最大功效以及具有最小毒性的范围内实现治疗方案(例如，包含干细胞动 员剂和/或免疫抑制剂的药物组合物与另一治疗剂组合）的浓度的最佳精度可以需要基于 一个或多个靶位点的药物组合物的可用性的动力学的方案。当确定治疗方案的最佳浓度 时，可以考虑药物组合物的分布、平衡和消除。当组合以实现期望的效果时，可以调节本文 公开的药物组合物的剂量。另一方面，药物组合物和各种治疗剂的剂量可以独立地优化并 组合以实现协同结果，其中病状的减少大于任一单独使用的病状减少。
[0080] 具体地，本文公开的药物组合物的毒性和治疗功效可以通过标准药学方法在细胞 培养或实验动物中测定，例如测定LD5q (50 %群体致死的剂量)和ED5q (在50 %群体中治疗有 效的剂量）。毒性作用与治疗效果之间的剂量比率为治疗指数并且它可以表示为比率LD50/ ED 5q。显示出大的治疗指数的药物组合物为优选的，除了组合物的细胞毒性为期望的活性或 治疗结果。虽然可以使用显示出毒性副作用的药物组合物，但递送系统可将此类组合物靶 向受影响的组织部位以便对未感染细胞的潜在损伤最小化，从而降低副作用。通常，本发明 的药物组合物可以以使功效最大化且使毒性最小化的方式来施用。
[0081] 从细胞培养测定和动物研究获得的数据可以用于配制用于人类的一系列剂量。此 类组合物的剂量优选位于一系列循环浓度内，所述循环浓度包括具有很少或无毒性的m) 5〇。 剂量可以在该范围内变化，这取决于使用的剂量形式和利用的施用途径。对于在本发明的 方法中使用的任何组合物，可以由细胞培养测定最初估计治疗有效剂量。可以在动物模型 中配制剂量以实现包括在细胞培养中测定的IC 5q (实现症状的半数最大抑制的测试组合物 的浓度)的循环血浆浓度范围。此类信息可以用于精确地测定人中有用的剂量。例如可以通 过高效液相色谱法来测量血浆水平。
[0082]而且，本发明的组合物的剂量施用可以使用药物代谢动力学/药效动力学建模系 统进行优化。例如，可以选择一个或多个给药方案并且药物代谢动力学/药效动力学模型可 以用于测定一个或多个给药方案的药物代谢动力学/药效动力学曲线(profile)。然后，可 以选择用于施用的其中一个给药方案，基于特定的药物代谢动力学/药效动力学曲线，所述 给药方案实现期望的药物代谢动力学/药效动力学响应。参见WO 00/67776,其通过引用完 全明确地并入本文。
[0083] 更具体地，药物组合物可以以每日单剂量施用，或者总的每日剂量可以以每日两 次、三次或四次的分剂量施用。在口服施用的情况下，组合物的每日剂量可以在约0.1 ng/患 者/天至约l，〇〇〇mg/患者/天的宽范围间变化。更具体地，范围可以为约0.001ng/kg体重/天 至10mg/kg体重/天，对于成人（约60kg)而言，为约0· I-IOOyg/天、约1.0-50yg/天或约1 ·〇-20mg/天。
[0084] 药物组合物的每日剂量可以在约0.1 ng/成人/天至约1000 mg/成人/天的宽范围内 变化。对于口服施用，组合物可以以片剂形式提供，对于给药于待治疗患者的症状调节，所 述片剂含有约〇· Ing至约1000 mg的组合物或0.1、0·2、0·5、1.0、2.0、5.0、10.0、15.0、100、 150、200、250、300、350、400、450、500、550、600、650、700、800、900或1000毫克的组合物。有 效量的药物组合物通常以约〇 . lng/kg体重/天至约20mg/kg体重/天的剂量水平提供。在一 个实施方式中，范围为约〇 . 2ng/kg体重/天至约10mg/kg体重/天。在另一实施方式中，范围 为约0.5ng/kg体重/天至约10mg/kg体重/天。药物组合物可以以约1至约10次/天的方案施 用。
[0085] 在注射的情况下，通常方便的是通过静脉内途径给予成人(约60kg)每天约0.0001 yg-30mg、约0.01yg-20mg或约0.0 lmg-IOmg的量。在其它动物的情况下，针对60kg计算的剂 量也可以施用。更具体地，在注射的情况下，通常方便的是通过皮下途径给予以下量的他克 莫司：约0 · 01mg/kg至约0 · 5mg/kg，更具体地，约0 · 01mg/kg至0 · 5mg/kg、约0 · 02mg/kg至约 0 · 5mg/kg、约0 · 03mg/kg至约0 · 5mg/kg、约0 · 04mg/kg至约0 · 45mg/kg、约0 · 06mg/kg至约 0 · 45mg/kg、约0 · 07mg/kg至约0 · 4mg/kg、约0 · 08mg/kg至约0 · 35mg/kg、约0 · 09mg/kg至约 0 · 3mg/kg、约0 · lmg/kg至约0 · 25mg/kg等。
[0086] 本发明的药物组合物的剂量可任选地包括0.0001yg/kg/施用至1000mg/kg/施用、 或0.001yg/kg/施用至100.0mg/kg/施用、0.01yg/kg/施用至10mg/kg/施用、0· lyg/kg/施用 至10mg/kg/施用，包括但不限于:0·1、0·2、0·3、0·4、0·5、0·6、0·7、0·8、0·9、1、2、3、4、5、6、 7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、 33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53,54、55、56、57、 58、59、60、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、 84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99和/或100-50011^/1^/施用或它们的 任何范围、数值或部分，或以实现以下血清浓度:0.1、0.5、0.9、1.0、1.1、1.2、1.5、1.9、2.0、 2.5、 2.9、3.0、3.5、3.9、4.0、4.5、4.9、5.0、5.5、5.9、6.0、6.5、6.9、7.0、7.5、7.9、8.0、8.5、 8·9、9·0、9·5、9·9、10、10·5、10·9、11、11·5、11·9、20、12·5、12·9、13·0、13·5、13·9、14·0、 14.5、 4.9、5.0、5.5、5.9、6.0、6.5、6.9、7.0、7.5、7.9、8.0、8.5、8.9、9.0、9.5、9.9、10、10.5、 10.9、11、11.5、11.9、12、12.5、12.9、13.0、13.5、13.9、14、14.5、15、15.5、15.9、16、16.5、 16·9、17、17·5、17·9、18、18·5、18·9、19、19·5、19·9、20、20·5、2