注后至少1、5、10、15、20、30、45、60、90或120分钟。
[0033] 另外，无法预见的缺血-再灌注损伤优选是指其中是治疗或手术诱导再灌注而不 是缺血的情况。这种治疗或手术包括但非限于：
[0034] -药物溶栓，包括对中风、急性冠状动脉综合症、外周动脉闭塞、肺栓塞、肾动脉闭 塞进行的静脉内和血管内治疗方法；
[0035] -机械溶栓，例如经皮冠状动脉介入治疗、外周动脉血管成形术、内脏动脉血管成 形术；
[0036]-冠状动脉搭桥术；
[0037]-颈动脉内膜剥除术；
[0038]-肠系膜缺血；
[0039] -休克，包括失血性休克、心源性休克、神经性休克、过敏性休克；
[0040] -皮瓣坏死(flap-failure)，例如整形手术；
[0041 ]-手指或足趾及肢体的再植；
[0042]-绞窄性肠梗阻。
[0043] 或者，在另一个优选的实施方案中，所述方法用于预防、降低或治疗预见的缺血-再灌注发生。预见的缺血-再灌注的发生优选包括其中治疗或手术诱导缺血及随后的再灌 注的情况。下文列出了其中治疗或手术诱导暂时无血流或血流减少，即缺血或缺氧，然后出 现再灌注的情况：
[0044] -心肺转流术；
[0045] -动脉瘤修复，包括大动脉瘤、脑动脉瘤的修复；
[0046] -颈动脉内膜剥除术，其中在手术期间使用夹子；
[0047]-深低温停循环术；
[0048]-止血带的应用，即在外伤处置中使用止血带 [0049]-实体器官移植；
[0050]-任何其它医源性血流中断。
[0051 ]另外，与预见的缺血-再灌注损伤的发生相关的病变或疾病包括但非限于在器官 移植(肺、肝、肾、心脏)之后、具有血管夹紧的任何血管手术(例如大动脉夹紧，引起骨骼肌 缺血)之后、或者在对胰管或胆管进行处理(ERCP)之后的胰腺炎之后、体外循环(ECC)期间 或之后发生的缺血-再灌注损伤。
[0052]在预防、降低或治疗至少一种预见的缺血和再灌注损伤发生的方法的一个优选实 施方案中，本发明的ClINH至少在缺血期末或之后给予，即当缺血组织再灌注时给予。更优 选地，本发明的Cl INH在缺血期之后或者在开始再灌注之后至少10、15、20、30、45、60、90或 120分钟给予。优选地，本发明的ClINH在缺血之后或者在缺血和/或再灌注发生之后不超过 24、12、6、4或3小时给予。在另一个优选的实施方案中，Cl抑制剂在缺血之后或者在缺血和/ 或再灌注发生之后至少1小时、3小时、优选至少6小时、9小时、更优选至少18小时给予。 [0053]或者，本发明另一方面提供了一种预防、降低或治疗至少一种预见的缺血和再灌 注损伤发生的方法，其中本发明的ClINH在缺血和再灌注之前或在此期间给予。本领域技术 人员已知根据本发明ClINH的血浆半衰期，可以调整给予本发明ClINH的最早的可能时间点 以获得最佳结果。
[0054] 根据一个优选的实施方案，本发明的Cl INH持续给予需要其的对象和/或在器官移 植情况中持续给予待移植的器官。待移植的器官优选在具有合适培养基及适量ClINH的组 合物中保存。
[0055] 或者，或与前述优选的实施方案组合，在预见的缺血和再灌注损伤发生之前优选 是指在至少一种预见的缺血和再灌注损伤发生之前至多3小时、优选2小时、1小时、更优选 至多30分钟给予本发明C1INH。
[0056]需要本发明ClINH的对象是指可发生预见的缺血和再灌注损伤的对象。预见的缺 血和再灌注损伤的发生已经在本文描述。
[0057]优选在预见的缺血和再灌注损伤发生之前给予C1INH，因为其可与在缺血和再灌 注损伤发生之后给予ClINH相同或更好的方式预防与缺血和再灌注损伤相关的大多数(如 果不是全部)损害的发生。
[0058]在一个更优选的实施方案中，所述方法用于无法预见的缺血-再灌注的发生。更优 选地，缺血-再灌注损伤发生在中风或围产期中风之后。在这些类型的无法预见的缺血-再 灌注发生中，我们证实了本发明的Cl抑制剂在缺血半影区（pneumbra)中的神经保护作用。 缺血半影区优选是指海马和/或皮质。神经保护作用优选是指在海马中发生缺血之后至多3 小时及在皮质中发生缺血之后至多9小时用本发明的Cl抑制剂处理后减少海马和/或皮质 中的神经变性。更优选地，在海马缺血至多4、5、6或更多小时及在皮质缺血至多10、11、12或 更多小时减少神经变性。神经变性优选如实施例2所述评价:将脑组织切片用特异于神经元 变性的标记物优选Jade(S Chmued LC等，参考文献4)染色，通过荧光显微镜分析。使用这种 方法，减少神经变性是指在处理的样品中较未处理的样品中观测到染色的细胞减少至少 2%。优选地，神经变性的减少是指染色的细胞减少至少5%、7%、10%、15%、20%、25%、 30%、35%、40% 或更多。
[0059] 或者，或与前述实施方案组合，应用Cl抑制剂可降低缺血和/或再灌注导致的损 伤。更优选地，当缺血-再灌注损伤在中风或围产期中风之后发生时，应用本发明的Cl抑制 剂可减小梗塞面积。更优选地，梗塞面积如实施例2所述量化。更优选地，使用这种量化方 法，在缺血发生至少3小时后，梗塞面积减小至少10 %、优选至少20 %、40 %、60 %、70 %、 80%，及最优选梗塞面积减少90%。
[0060] 用于本发明方法中的C11NH可以作为本领域药物组合物的一部分或者与本领域药 物组合组合应用。这些药物组合物典型包含所述ClINH及药物学可接受的载体或赋形剂。根 据希望的局部或系统治疗方案、治疗区域及活性化合物的稳定性，可以通过多种方式给予 这些药物学组合物。根据给予方法确定合适的配方。所述药物组合物优选通过肠道外方法 给予，例如通过静脉内、动脉内、皮下、腹膜内或肌内注射或输注方式给予;或者通过鞘内注 射或颅内给予方法给予。在一个优选的实施方案中，通过静脉内输注方法给予。通过肠道外 给予的合适配方为本领域所已知，典型是液体配方。肠道外给予的ClINH制备物必须是无菌 的。灭菌可在冻干和重建之前或之后通过无菌过滤膜过滤而易于实现。ClINH制备物可通过 输注或推注方法持续给予。液体Cl INH配方可例如通过输液栗给予。典型的静脉内输注的组 合物可以含有100-500ml无菌的0.9%NaCl或5%葡萄糖溶液，任选补加20%白蛋白溶液及 100-500mg的C1INH。用于静脉内注射的药物组合物含有例如I-IOml无菌缓冲的水和1-250mg本发明的Cl INH。制备可经肠道外给予的组合物的方法为本领域所熟知，在多个资料 中详细描述，例如在以其全部内容并入作参考的Remington's Pharmaceutical Science (15th ed. ,Mack Publishing,Easton,PA, 1980)中描述。
[0061] 本发明方法中使用的ClINH的有效剂量即有效浓度和频率依赖于使用的特定药物 组合物、病变的严重性及患者的一般状况。通常地，可以通过常规优选法确定基于本发明方 法中使用的ClINH的药物组合物的有效剂量。合适的起始点是基于血浆衍生的ClINH的等价 药物组合物的使用剂量。本发明的药物组合物的优势是在治疗时可以应用高初始剂量，提 高成功治疗的可能性。这个高初始剂量是可能的，因为本发明药物组合物中的ClINH较其天 然对应物示出较快的清除率。特别是对于急性病例的治疗，本发明的高初始剂量的Cl INH可 以是有利的。这个高初始剂量可以是天然存在的对应物剂量的至少1.5、2、3或4倍。
[0062]在一个优选的实施方案中，本发明的ClINH经静脉内给予，剂量为大于50、100、 200、400、600、800或10001]/1^个体体重，优选为50-2000、100-1000、200-800、400-700或 500-700U/kg个体体重。1单位(U)的ClINH是在Iml人血液中存在的ClINH的量。一个这样的 单位相应于大约275yg血浆衍生的C1INH。假定分子量为110,000道尔顿，人血浆中ClINH的 浓度为2.5ymol/L(Nuijens et al.(1989)，J.Clin.Invest.84:443)〇 [0063]在本发明方法的另一个优选实施方案中，所述药物组合物进一步含有溶血栓药或 者与溶血栓药组合应用或者在用这种溶血栓药随后治疗之后使用。本文所述溶血栓药是指 能溶解血凝块(血栓)及重新开放动脉或静脉的药剂（药物）。溶血栓药通常是丝氨酸蛋白 酶，将血纤维蛋白溶酶原转变为纤溶酶，使得纤维蛋白原和纤维蛋白分解及血栓溶解。优选 的溶血检药包括retepIase(r_PA或Retavase)、alteplase( t_PA或Activase)、尿激酶 (Abbokinase)、尿激酶原、茴香酰化的纯化的链激酶激活物复合物(APSAC)，及链激酶。 [0064]另一方面，特别是除了美国之外的权限，本发明涉及本发明的ClINH根据上述任何 方法在生产预防、降低或治疗再灌注损伤的药物中的应用。
[0065] 在本文及其权利要求书中，动词"包含"以其非限制性含义应用，是指包括该单词 后面的项目，不排除未特别指出的项目。另外，文中"一个"、"一种"等不排除存在一个以上 的因素，除非文中需要其是一个且只有一个因素。因此，"一个"通常是指"至少一个"。
[0066] 附图描述
[0067] 图1:在缺血之前、之后及1小时后，用盐水或每只小鼠15U rhClINH(重组人C1INH， 见实施例1.2)处理后的小鼠在缺血后48小时梗塞面积的评价。
[0068] 图2:在缺血之前、之后及1小时后，用盐水或每只小鼠15U血浆衍生的hClINH处理 后的小鼠在缺血后24小时梗塞面积的评价.
[0069] ?3:从缺血开始后在不同时间点接受盐水或每只小鼠15U兔rhCl -INH的小鼠在缺 血48小时后梗死灶体积评价。数据以平均值土 SEM表示(每组6只小鼠）。*P〈0.05，**P〈0.01， 相对于盐水，单向ANOVA和Dunnett作为post-hoc检验。
[0070] M:FlU〇r〇-Jade染色的半定量评估。-=无阳性，+ =低阳性，++=中等阳性，+++ =高阳性。
[0071 ] _:在缺血发生后不同时间点接受盐水或每只小鼠15U兔rhCl-INH的缺血小鼠的 纹状体中通过Fluoro-Jade染色显示的神经变性代表性图像。条杆:1 ΟΟμπι。
[0072] _:在缺血发生后不同时间点接受盐水或每只小鼠15U兔rhCl-INH的缺血小鼠的 海马齿状回中通过Fluoro-Jade染色示出的神经变性代表性图像。条杆:1 ΟΟμπι。
[0073]里1:在缺血发生后不同时间点接受盐水或每只小鼠15U兔rhCl-INH的缺血小鼠的 皮质中通过Fluoro-Jade染色示出的神经变性代表性图像。条杆:100μπι。
[0074]图8:在缺血发生后3小时接受盐水或每只小鼠5、10、15U兔rhCl-INH的小鼠在缺血 48小时后的梗死灶体积评价。数据以平均值± SEM表示(每组6只小鼠）。**P〈0.01，相对于盐 水，单向ANOVA和Dunnett作为post-hoc检验。
[0075]图9:在缺血发生后3小时接受盐水或每只小鼠15U pdCl-INH或者牛或兔rhCl-INH 的小鼠在缺血48小时后的梗死灶体积评价。数据以平均值±SEM表示（每组6只