OME及卷萊合物)在从聚合物供应商，如Evon化Industries接收后直接使用。
[0174] 通过将比马前列素与可生物降解的聚合物于带有10-mm不诱钢球的不诱钢容器中 组合并且在化rbula混合器中混合15分钟。将容器从混合器中取出并用刮勺揽拌粉末渗和 物。检查粉末渗和物的均匀性并重复混合程序。根据生产商的说明设置双螺杆微型混炼机/ 挤压机。挤压机的出口装备有激光测微仪和拉出器W控制挤压细丝的厚度。允许双螺杆微 型混炼机/挤压机平衡到挤压溫度;然后按维持恒定负载和扭矩的速率将粉末渗和物送入 挤压螺杆中。向导向机构中挤压细丝并切割成具有特定长度的单独植入物(棒）W便为植入 物获得所需目标重量（±5%)和药物剂量。例如，分别通过将挤压细丝切割成50±2.化g (5%)、75±3.75iig(5%)和100±5蛇（5%)的目标重量可制成含10yg、15iig和20yg比马前列 素的植入物。
[0175] 表1和2总结了在运项研究期间制备并试验的一些植入物的药物和聚合物组成(制 剂）。先前在美国专利申请公布201 I/O 182966中已经描述了制剂1。表3总结了一些植入物的 结果。对于每种植入物我们测量了 1)在体外随时间推移比马前列素从植入物释放到由 0.OlM憐酸盐缓冲盐水(PBS)(抑7.4、37°C)组成的释放介质中的速率(对于重复抽样植入 物按照随时间推移比马前列素平均总释放量百分比计算并绘图），2)随时间推移植入物在 0.OlM憐酸盐缓冲盐水(PBS)(抑7.4、37°C)中溶胀的程度和范围，3)植入物在0.OlM憐酸盐 缓冲盐水(PBS)(抑7.4、37°C )中降解的速率。估计的植入物体外寿命是基于降解结果对每 种植入物制剂而测定。对于体外试验而言将植入物置于小瓶中并通过25至40kGy的丫福射 剂量灭菌。
[0176] 先前的研究已经教导我们，含超过30重量％比马前列素的植入物在浸入特定释放 介质如PBS后往往引起"突发"的比马前列素释放。另一方面，对于含少于20重量％比马前列 素的植入物而言，比马前列素的释放有时延迟，在将植入物置于释放介质中的时间与大量 比马前列素开始在介质中出现的时间之间产生不良迟滞期。因此，为了配制前房内缓释植 入物并且获得所需的目标药物释放曲线，为运项研究制备的所有植入物含20重量％比马前 列素。
[0177] 如下面的结果所示，我们鉴定出可W在体外W近线性的速率(大约半阶释放动力 学)提供比马前列素持续释放大约60天，无初始突发效应或迟滞期的聚合物制剂(2号制剂） (图1)。释放速率比具有1号制剂的植入物略快。而且，出于下面讨论的原因，特别是对于倾 向于向下沉降到眼睛的前房角内的前房内植入物而言，具有2号制剂的植入物表现出优于1 号制剂的显著改善。
[0178] 令人惊讶地，我们发现通过调节在我们的初始S聚合物药物递送系统（制剂1)中 存在的S种可生物降解的聚合物(R203S、RG752S和R202H)的比例，我们可W明显减少植入 物的体外寿命(表3)，同时维持近线性的药物释放速率超过早期对制剂1所观察到的大约60 天期限（图1)。如表3所示，具有制剂2的植入物在体外降解速度为具有制剂1的植入物的近 两倍。而且，在聚合物组成上从制剂1到制剂2的适度调节也改善了植入物的溶胀行为（图2A 和B)。如图2A和B所示，具有制剂2的植入物在置于PBS(抑7.4、37°C)中之后大约两个月达 到约550至600WI1的最大溶胀直径和约1.5mm的最大长度并且之后开始收缩，而具有制剂1的 植入物即使在两个月之后仍继续溶胀，在接下来进行测量的3至4个月在长度和直径上增 长。对于制剂1和2植入物的降解速率和溶胀行为上的差异在图3所示的运些植入物的显微 图像中在视觉上也显而易见。我们考虑到对于最终将沉降或专口置于青光眼或高眼压患者 眼睛的前房角中的前房内植入物而言，制剂2的低溶胀、快速降解特征是理想的。此外，在体 外对运种植入物所观察到的比马前列素的近线性、长期释放，表明具有制剂2的挤压植入物 在置于眼睛的前房中之后将对降低眼睛中的眼内压长期有效，可能长达两个月或更长时 间。
[01巧]通过在设为37°C和50巧m的振荡水浴中在2mL的0.01M PBS抑7.4(每个小瓶1个植 入物）中解育植入物进行体外药物释放试验。在24小时时取样，然后第一个月每周取样，之 后每两周取样。在每个取样时间点用新鲜介质更换释放介质并且使用HPLC量化PBS中比马 前列素的浓度。图1中示出了具有制剂1和2(表1)的植入物的比马前列素释放曲线。数据点 表示3-4个重复植入物样品的平均释放量。
[0180] 通过在设为37°C的振荡水浴中在0.OlM PBS pH 7.4中解育植入物进行体外聚合 物降解试验。对于每种制剂而言，解育各自大约6mm长度的20个植入物持续8周，一式=份。 每周取样。使用装备R. I.检测器的GPC和作为标准的聚苯乙締测定峰分子量(MW)。由一阶动 力学曲线计算降解速率常数W测定所有制剂的体外聚合物降解速率常数。表3中总结了基 于总动力学速率常数的制剂等级次序和每种植入物制剂的估计体外寿命(tiooo)DTiooo表示 预计植入物中聚合物的分子量降到1000道尔顿W下的时间。
[0181] 对于植入物溶胀研究（图2A、2B和3及表3)，于96孔测定板中大约400化的PBS(pH 7.4,0.01M)中解育每种植入物并且置于设为37°C和50巧m的化ake N Bake杂交箱中。在每 个时间点在150X放大倍数下记录植入物图像并且通过Keyence数码显微镜测量长度和直 径。在开始时记录图像，然后第一个月每周记录，之后每两周记录。
[0182] 进行对正常比格犬的体内动物研究W评价植入物的体内功效、耐受性和安全性。 在第2、3、4和5组犬中对四种制剂(表4)进行评价。第1组接受安慰剂植入物。每种制剂作为 单个20-iig(剂量)植入物单侧给药(OD);每种制剂四只犬;对侧眼睛作为对照。每周进行IOP 和安全性测量，持续3个月，然后每两周进行，直到6个月。通过IOP和瞳孔直径评估功效;通 过中央角膜内皮细胞密度和角膜厚度及前房闪辉和细胞评估耐受性;并且通过6个月时的 眼部组织结构评估安全性。关于功效，四种制剂全部减低IOP和瞳孔直径(犬经比马前列素 暴露变得瞳孔缩小）（图4和5)。犬瞳孔直径的减小是比马前列素暴露于前房的指示。
[0183] 在表4描述的植入物的范围内，对于W下耐受性量度而言受治眼和对侧眼之间无 差异：中央角膜内皮细胞密度、中央角膜厚度，或前房闪辉和细胞。主要的安全性量度为组 织结构并且在眼组织的结构上不存在显著或不利的变化。运些植入物(表4)的运些结果显 示，使用本发明的新制剂的单个前房内剂量展示出优良的功效、耐受性和安全性。
[0184] 植入物注入前房后眼睛中的角膜内皮细胞密度的减小表明植入物正在损伤角膜 内皮。运发生在，例如植入物因为太大而不能适合前房角内时，致使其倚靠并摩擦角膜内 皮，或因为，即使植入物确实适合所述角内，植入物溶胀到运样的程度，W致其开始接触并 摩擦角膜内皮。运样对角膜内皮的刺激最终导致在角膜病灶中屯、处内皮细胞密度丧失，并 且可能导致病灶性混浊、角膜水肿和角膜新生血管化。
[01化]在前房内注入100-蛇、150-蛇、200-蛇或250-蛇（总重量)通过挤压工艺制备并且 包含制剂1的植入物后2、5、10、16和26周在犬中测量病灶角膜内皮细胞密度。受治动物(第 2-5组)在右眼睛的前房中接受一个植入物，而左眼不治疗。一组犬，第1组，在任一只眼中都 不接受注射。如图6所示，到第26周在接受150-iig、200-iig和250-iig植入物的动物中观察到 角膜内皮细胞密度降低。相反，如图6所示，在接受含20yg比马前列素的100-iig植入物的犬 中在角膜内皮细胞密度上不存在临床显著降低。运些结果显示前房内植入物的大小是植入 物与眼睛的前房相容性的重要考虑因素，并且确保植入物将适合在前房角内并且在置于眼 睛中很久W后不引起诸如水肿或混浊等不利影响。
[0186]表1:用于生产挤压前房内植入物的含比马前列素的持续递送制剂(1-5)
[0188]表2:用于生产挤压前房内植入物的含比马前列素的持续递送制剂(6-8)
[0190]表3:选择的通过挤压工艺生产的前房内植入物的体外特性
[0192]表4:用于犬体内研究的含比马前列素的挤压前房内植入物
【主权项】
1. 一种用于降低眼睛中的眼内压（IOP)的可生物降解的眼内植入物，所述植入物包含 可生物降解的聚合物基质、聚乙二醇3350和作为活性剂的前列腺酰胺，其中所述前列腺酰 胺和聚乙二醇3350与所述可生物降解的聚合物基质缔合，所述可生物降解的聚合物基质包 含 a) 特性粘度为0.25-0.35(11/^的酯端聚(0儿-丙交酯）， b) 特性粘度为0.16-0.24(11/^的酸端聚(0儿-丙交酯），和 c) 特性粘度为0.16-0.24dl/g且D，L-丙交酯与乙交酯摩尔比为约75:25的酯端聚(D，L-丙交酯-共-乙交酯）； 其中所述前列腺酰胺占所述植入物的18-22重量％，所述酯端聚(D，L-丙交酯）占所述 植入物的18-22重量％，所述酸端聚(D，L-丙交酯）占所述植入物的13.5-16.5重量％，所述 酯端聚（D，L-丙交酯-共-乙交酯）占所述植入物的36-44重量％，并且其中所述聚乙二醇 3350占所述植入物的3.5-6.5重量％，其中所述聚(D，L-丙交酯)和聚(D，L-丙交酯-共-乙交 酯）聚合物中的每一种的特性粘度是在25°C下针对所述聚合物于氯仿中的0.1%溶液而测 定。2. 根据权利要求1所述的可生物降解的眼内植入物，其中所述前列腺酰胺占所述植入 物的20重量％，所述酯端聚(D，L-丙交酯）占所述植入物的20重量％，所述酸端聚(D，L-丙交 酯）占所述植入物的15重量％，所述酯端聚(D，L-丙交酯-共-乙交酯）占所述植入物的40重 量％，并且其中所述聚乙二醇3350占所述植入物的5重量％。3. 根据权利要求1或权利要求2所述的植入物，其中所述植入物为棒状并且通过热熔挤 压工艺形成并且其中所述植入物直径或宽度为150μπι至300μπι，长度为0.50mm至2.5mm，并且 总重量为30yg至100yg。4. 根据权利要求1-3中任一项所述的植入物，其中所述植入物在置于眼睛的前房中之 后不接触角膜内皮。5. 根据权利要求1-4中任一项所述的植入物，其中所述植入物在置于眼睛中之后对降 低眼睛中的眼内压2个月或更长时间有效。6. 根据权利要求1-5中任一项所述的植入物，其中所述前列腺酰胺是具有式（I)的化合 物其中虚键表示可以呈顺式或反式构型的单键或双键，A为具有2至6个碳原子的亚烷基 或亚烯基自由基，所述自由基可被一个或多个氧化物自由基中断并且被一个或多个羟基、 氧代基、烷氧基或烷基羧基取代，其中所述烷基自由基包含1至6个碳原子;B是具有3至7个 碳原子的环烷基自由基，或选自具有4至10个碳原子的烃基芳基和杂芳基自由基的芳基自 由基，其中杂原子选自氮、氧和硫原子;X为-N(R4)2,其中R4独立地选自氢和具有1至6个碳原 子的低级烷基自由基;Z为=0; R1和R2中的一个为=0、-OH或-0(CO)R6基团，而另一个为-OH 或-0(C0)R 6,或R1为=0而R2为H，其中R6为具有1至约20个碳原子的饱和或不饱和无环经基， 或为_(CH 2)mR7其中m为0或1至10的整数，并且R7为具有3至7个碳原子的环烷基自由基，或如 以上所定义的烃基芳基或杂芳基自由基。7. 根据权利要求1-5中任一项所述的植入物，其中所述前列腺酰胺为比马前列素。8. -种降低哺乳动物眼睛中的眼压的方法，所述方法包括将根据权利要求1或权利要 求2所述的可生物降解的眼内植入物置于所述哺乳动物的眼睛中，由此所述植入物为所述 眼睛提供对降低所述眼睛中的眼压有效的量的前列腺酰胺。9. 根据权利要求8所述的方法，其中所述哺乳动物为具有升高的眼内压、高眼压或青光 眼的人类患者。10. 根据权利要求8或权利要求9所述的方法，其中所述植入物置于所述患者的眼睛的 前房中。11. 根据权利要求8-10中任一项所述的方法，其中所述植入物在置于眼睛的前房中之 后对降低眼睛中的眼内压至少两个月有效。12. 根据权利要求8-11中任一项所述的方法，其中所述前列腺酰胺为比马前列素。13. 根据权利要求8-12中任一项所述的方法，其中所述植入物通过挤压工艺形成并且 其中所述植入物直径或宽度为150至300μπι，长度为0.50至2.5mm，并且总重量为30至100yg。14. 根据权利要求8-13中任一项所述的方法，其中所述植入物在置于眼睛的前房中之 后不接触角膜内皮。15. 根据权利要求8-14中任一项所述的方法，其中使用眼内递送装置将所述植入物置 于所述眼睛中，所述装置包括细长壳体和从所述壳体纵向延伸的套管，所述套管具有近端 和远侧尖端并且具有延伸通过其中的内腔，所述内腔具有足以容纳所述植入物并容许所述 植入物平移通过所述内腔并进入所述患者的眼睛的内径。16. -种用于将可生物降解的眼内植入物递送到患者的眼睛内的装置，所述装置包括 根据权利要求1所述的眼内植入物、细长壳体和从所述壳体纵向延伸的套管，所述套管具有 近端、远侧尖端和延伸通过其中的内腔，所述内腔具有足以容纳所述眼内植入物并容许所 述植入物平移通过所述内腔并进入所述患者的眼睛的内径。17. 根据权利要求16所述的装置，其中所述套管为25号、26号、27号、28号、29号或30号 针。18. -种制备根据权利要求1所述的可生物降解的眼内植入物的方法，所述方法包括混 合所述前列腺酰胺与所述聚(D，L-丙交酯）和聚(D，L-丙交酯-共-乙交酯）聚合物及聚乙二 醇3350,挤压所述混合物形成细丝，接着将所述细丝切割成适合置于眼睛的前房或玻璃体 中的长度从而形成眼内植入物。
【专利摘要】在眼内降解并且对降低眼内压在一段持续时期有效的含前列腺酰胺的眼内植入物。所述植入物通常含有前列腺酰胺，如比马前列素，和选自聚丙交酯和聚(丙交酯-共-乙交酯)聚合物的至少三种不同的可生物降解的聚合物并且经优化置于眼睛的前房，特别是前房角中并且与之相容。描述了制备和在患者中使用所述植入物降低高眼压和眼内压的方法。
【IPC分类】A61K31/5575, A61K9/16, A61K47/34, A61K47/10
【公开号】CN105682645
【申请号】
【发明人】A·N·格布雷麦斯克尔, M·R·罗宾逊
【申请人】阿勒根公司
【公开日】2016年6月15日
【申请日】2014年10月31日