对于SlP 1受体的偏向 性激动作用有关，同时具有最小的功能性拮抗作用或灵敏度降低效应。对于4-[5-(3_氯-苯 氧基)-噁唑并[5，4-d]嘧啶-2-基]-2，6-二甲基-苯氧基}-乙酸在治疗AKI方面的用途来说， 这代表了重要的临床安全优点。
[0022] 发明概述
[0023] 本发明涉及{4- [ 5- (3-氯-苯氧基)-噁唑并[5，4-d ]嘧啶-2-基]-2，6-二甲基-苯氧 基}-乙酸或其可药用盐，用于预防或治疗AKI(急性肾损伤）。
[0024] 本发明还涉及如下使用的{4-[5-(3_氯-苯氧基)_噁唑并[5,4_d]嘧啶-2-基]-2， 6-二甲基-苯氧基}-乙酸或其可药用盐，其中，{4-[5-(3_氯-苯氧基)-噁唑并[5,4-d]嘧啶-2-基]-2,6-二甲基-苯氧基}-乙酸当以AKI保护性剂量给予时，不会引起淋巴细胞减少，并 且当给予较高剂量时，引起有限的淋巴细胞减少。
[0025] 本发明还涉及{4- [ 5- (3-氯-苯氧基)_噁唑并[5，4-d ]嘧啶-2-基]-2，6-二甲基-苯 氧基}_乙酸或其可药用盐，在预防或治疗AKI中用作非淋巴细胞减少性药剂。
[0026] 本发明还涉及{4- [ 5- (3-氯-苯氧基)-噁唑并[5，4-d ]嘧啶-2-基]-2，6-二甲基-苯 氧基}_乙酸或其可药用盐，用于预防或治疗AKI，当以AKI保护剂量给予时，不会产生淋巴细 胞减少效果。
[0027] 本发明还涉及用作上述用途的{4-[5-(3_氯-苯氧基）_噁唑并[5,4-d]嘧啶-2-基]-2,6-二甲基-苯氧基}-乙酸或其可药用盐，其中，当给予非淋巴细胞减少性剂量时，{4-[5-(3-氯-苯氧基)-噁唑并[5，4-d]嘧啶-2-基]-2，6_二甲基-苯氧基}-乙酸是AKI保护性 的。
[0028] 本发明还涉及{4- [ 5- (3-氯-苯氧基)-噁唑并[5，4-d ]嘧啶-2-基]-2，6-二甲基-苯 氧基}_乙酸或其可药用盐，用于预防或治疗AKI (急性肾损伤），其中，{4-[5-(3_氯-苯氧 基)-噁唑并[5,4-d]嘧啶-2-基]-2,6-二甲基-苯氧基}-乙酸是不会引起受体灵敏度降低的 选择性的SlPdfi动剂。
[0029] 本发明还涉及{4- [ 5- (3-氯-苯氧基)-噁唑并[5，4-d ]嘧啶-2-基]-2，6-二甲基-苯 氧基}_乙酸或其可药用盐，用于预防或治疗AKI (急性肾损伤），其中，{4-[5-(3_氯-苯氧 基)-噁唑并[5，4-d]嘧啶-2-基]-2，6_二甲基-苯氧基}-乙酸是在AKI保护剂量下的非淋巴 细胞减少性的选择性SlPdfi动剂。
[0030] 本发明还涉及{4- [ 5- (3-氯-苯氧基)-噁唑并[5，4-d ]嘧啶-2-基]-2，6-二甲基-苯 氧基}_乙酸或其可药用盐，其在用于预防或治疗AKI中没有产生淋巴细胞减少的效果。
[0031 ] 本发明还涉及药物，这种药物含有{4- [ 5- (3-氯-苯氧基)_噁唑并[5，4-d ]嘧啶-2-基]-2,6-二甲基-苯氧基}-乙酸或其可药用盐作为活性成分。
[0032]本发明还涉及药物组合物，其含有作为活性成分的{4-[5-(3_氯-苯氧基)_噁唑并 [5,4-d]嘧啶-2-基]-2,6-二甲基-苯氧基}-乙酸或其可药用盐，以及药用赋形剂，用于预防 或治疗AKI。
[0033]本发明还涉及一种制品，其含有：
[0034]-包装材料；
[0035] -药物组合物，这种药物组合物含有作为活性成分的{4_[ 5-(3-氯-苯氧基)_噁唑 并[5,4_d]嘧啶-2-基]-2,6_二甲基-苯氧基}_乙酸或其可药用盐，以及药用赋形剂;和
[0036] -包含在包装材料内的标签或包装说明书，用于注明：可以用该药物组合物治疗 AKI患者。
[0037] 本发明还涉及在需要的患者中治疗AKI的方法，所述方法包括:给予所述患者治疗 有效量的{4- [ 5- (3-氯-苯氧基)-噁唑并[5，4-d ]嘧啶-2-基]-2，6-二甲基-苯氧基}-乙酸或 其可药用盐。
[0038] 本发明还涉及在需要的患者中治疗AKI的方法，所述方法包括:给予所述患者治疗 有效量的{4- [ 5- (3-氯-苯氧基)-噁唑并[5，4-d ]嘧啶-2-基]-2，6-二甲基-苯氧基}-乙酸或 其可药用盐，其中，{4-[5-(3_氯-苯氧基)-噁唑并[5,4-d]嘧啶-2-基]-2,6-二甲基-苯氧 基}-乙酸没有淋巴细胞减少性效果。
[0039] 本发明还涉及在需要的患者中治疗AKI的方法，所述方法包括:给予所述患者治疗 有效量的{4- [ 5- (3-氯-苯氧基)-噁唑并[5，4-d ]嘧啶-2-基]-2，6-二甲基-苯氧基}-乙酸或 其可药用盐，其中，当给予AKI保护剂量时，{4-[5-(3_氯-苯氧基)-噁唑并[5,4-d]嘧啶-2-基]-2,6-二甲基-苯氧基}-乙酸没有淋巴细胞减少性效果。
[0040] 本发明还涉及在需要的患者中治疗AKI的方法，所述方法包括:给予所述患者治疗 有效量的{4- [ 5- (3-氯-苯氧基)-噁唑并[5，4-d ]嘧啶-2-基]-2，6-二甲基-苯氧基}-乙酸或 其可药用盐，其中，治疗是预防性的治疗。
[0041] 本发明还涉及一种制品，其中，标签或包装说明书包含在包装材料内，用于注明： 可以用上述药物组合物治疗AKI患者，不会产生淋巴细胞减少性效果。
[0042] 本发明还涉及一种制品，其中，标签或包装说明书(insert)包含在包装材料内，用 于注明：可以用上述药物组合物治疗AKI患者，不会产生淋巴细胞减少性效果，其中治疗是 预防性的治疗。
[0043] 定义
[0044] 为方便起见，并且为了便于阅读，在本申请的章节和图中，化合物{4-[5-(3_氯-苯 氧基)-噁唑并[5，4-d]嘧啶-2-基]-2，6-二甲基-苯氧基}-乙酸更名为"化合物A"。
[0045] 对于本发明来说，相应地理解下列术语：
[0046] -相比于其它4种SlP受体(SlP2-5)，选择性SlP1激动剂是对3" 1更有效的化合物。此 外，该化合物应该在大量受体、酶和离子通道试验中具有最小活性或没有活性。
[0047]-淋巴细胞减少是在免疫系统中具有重要功能的血液淋巴细胞、白细胞异常降低 的病症。在成人中，淋巴细胞水平低于1，500个细胞/微升是诊断标准(病症的标准），在儿童 中，淋巴细胞水平低于3,000个细胞/微升是诊断标准。
[0048] SlPjg化介导的淋巴细胞减少是指由使用SlP1调节剂所引起的淋巴细胞减少性病 症。由于SlP决定着SlP1介导的淋巴细胞从淋巴结流出到血液中，所以，人们认为，近来的药 剂通过抑制内化SlP 1受体再循环回到细胞表面或抑制SlP1活化而导致淋巴细胞减少。
[0049] -有限的淋巴细胞减少是血液淋巴细胞的暂时减少(在治疗之前，绝对的淋巴细胞 数超出正常范围）。暂时是指淋巴细胞的短暂变化，在24小时或48小时之内恢复正常范围。
[0050] -非淋巴细胞减少或没有淋巴细胞减少是指血液淋巴细胞的暂时缺少或持续减少 (在治疗之前，绝对的淋巴细胞数超出正常范围）。暂时是指淋巴细胞的短暂变化，在24小时 内恢复正常范围，而持续是指持续减少时间超出24小时。
[0051] -AKI保护剂量:能够使血浆肌酸酐明显降低至少30%的{4-[5-(3_氯-苯氧基)-噁 唑并[5,4-d]嘧啶-2-基]-2，6_二甲基-苯氧基}-乙酸的剂量。
[0052]-本文使用的治疗有效量是指对AKI产生影响的药用化合物的数量，例如{4-[5_ (3-氯-苯氧基)-噁唑并[5，4-d ]嘧啶-2-基]-2，6-二甲基-苯氧基}-乙酸。
[0053]-患者是指人类患者。
[0054]-预防性:用来预防或防止不希望有的效果，并且预防出现医学症状，尤其是疾病。
[0055] 第一个实施方案是{4-[5-(3_氯-苯氧基)-噁唑并[5,4-(1]嘧啶-2-基]-2,6-二甲 基-苯氧基}-乙酸或其可药用盐用于预防或治疗AKI，其中，{4-[5-(3_氯-苯氧基)-噁唑并 [5，4-d]嘧啶-2-基]-2，6-二甲基-苯氧基}-乙酸在AKI保护剂量下是非淋巴细胞减少性的。
[0056] 第二个实施方案是{4-[5-(3-氯-苯氧基)-噁唑并[5, 4-d]嘧啶-2-基]-2,6_二甲 基-苯氧基}-乙酸或其可药用盐用于预防或治疗AKI的用途，其中，SlP 1活化介导保护作用， 并且不会引起淋巴细胞减少。
[0057]另一个实施方案是一种上述制品，其中，包含在包装材料之内的标签或包装说明 书，用于注明：可以治疗接受上述药物组合物治疗的患者的AKI，并且不会引起淋巴细胞减 少。
[0058] 缩写
[0059] AKI:急性肾损伤
[0000] ApoM:脱脂载脂蛋白M
[0061 ] CIN:造影剂引起的肾病（Contrast Induced Nephropathy)
[0062] CKD:慢性肾病
[0063] DMS0:二甲亚砜
[0064] ERBP:欧洲肾脏最佳临床实践 [0065] eGFR:肾小球过滤率估计量
[0066] eNOS:内皮一氧化氮合酶
[0067] ESRD:晚期肾病 [0068] FlipR:荧光成像读板仪 [0069] GPCRs :G蛋白偶合受体 [0070] HDL:高密度脂蛋白
[0071] HDMEC:人类表皮的微血管内皮细胞
[0072] HSC:肝脏的星形细胞
[0073] I⑶:重病监护室
[0074] I/R:缺血/再灌注
[0075] KDIGO:改善全球肾脏疾病预后组织
[0076] PBS:磷酸盐缓冲盐水
[0077] RRT:肾脏替代治疗
[0078] SlP:鞘氨醇-1-磷酸盐
[0079] SlP1:鞘氨醇-1-磷酸盐1
[0080] SCr:血清肌酸酐
[0081 ] s.e.m:均值标准误差 实施例
[0082]下列实施例进一步说明本发明，但不限制本发明。为方便起见，并且为了便于阅 读，在附图和结果中，化合物{4- [ 5-( 3-氯-苯氧基)-噁唑并[5，4-d ]嘧啶-2-基]-2，6-二甲 基-苯氧基}-乙酸更名为"化合物A"。
[0083]进行统计分析和p值计算，并且在附图中，根据实验条件，用或符号表示。 [0084]图1:在大鼠缺血-再灌注（I/R)模型中，单一或重复给予化合物A和/或BAF-312的 效果
[0085] 对Fischer大鼠进行假手术或25分钟双侧肾动脉封闭，24小时再灌注之后，测定血 浆肌酸酐。（图1-A):在封闭之前1小时，评价化合物A，p. 〇 .给予化合物A的剂量为0.3、1和 3mg/kg。（图1-B):在封闭之前1小时，评价BAF-312，p.o.给予BAF-312的剂量为3、10和30mg/ kg。在封闭之前1小时，给予对照组载体(没有化合物）。***?〈0.0011/1?-载体相对于假手术 组。#p〈0.05; ##p〈0.01，化合物治疗组相对于载体组。条形图是平均+/-S. e .m。（图1-C):在 大鼠I/R损伤之后，收集肾样品，评价化合物A对皮层的白蛋白含量的影响。在进行假手术的 I/R-载体治疗的或I/R-化合物A(3mg/kg p. 〇 .)治疗的大鼠的样品肾的皮质区中，利用 Western印迹，测定白蛋白。（图1-D):给予化合物A(3mg/kg p.o)或载体，每天两次，给予5 天。在封闭之前1小时，进行最后一次给药。**?〈〇.〇1，1/1?-载体相对于假手术组。##郎〈 0.001，化合物A治疗相对于载体组。条形图是平均+/-S. e .m。
[0086]图2:化合物A在小鼠中对于横纹肌溶解引起的AKI损伤的影响 [0087] 在雄性CD 1小鼠中，口服给予化合物A(0 · 3、1、3和IOmg/kg)或载体，1小时之后，肌 内注射(后肢)8mL/kg的甘油（50 %，在PBS v/v中）。使假手术组接受相应体积的PBS。24小时 以后，评价血浆肌酸酐。**p〈〇. 01，甘油-载体相对于假手术组。郎〈0.05,化合物A治疗组相 对于载体组。条形图是平均+/-S. e. m。
[0088]图3:单一给药之后Fischer大鼠中的外周血单核细胞（图3-A)或（图3-B)单一给药 或（图3-C)重复给药之后的Sprague-Dawley大鼠中的外周血单核细胞
[0089] 在Fischer大鼠中，口服给予1、3、10和30mg/kg的化合物A，或在Sprague-Dawley大 鼠中，口服给予3mg/kg的化合物A。在Fischer大鼠中，口服给予1和10mg/kg的BAF-312,或在 Sprague-Dawley大鼠中，口服给予3mg/kg的BAF-312(n = 8)。在重复给药方案中，给予化合 物5天，b.i.d。用曲线下的面积(AUC)(图3-A)或每个时点的总白血球的百分比（图3-B/C)表 示血液淋巴细胞，并且说明平均+/-S.