核酸提取用设备的制造方法_3

文档序号:9882099阅读:来源:国知局
个例子的核酸提取用设备1040的图。如图5例示,核酸提取用设备1040在管部100的第一液柱10侧的端部形成有与管部100连通的储液部130。储液部130的内部与管部100的内部连通。
[0088]储液部130能够在内部收容液体。储液部130具有能够从外部向储液部130内部导入物质的开口 131。储液部130的形成有开口 131的位置不被特别地限定。储液部130也可以具有多个开口 131。储液部130的内容积不被特别地限定,例如能够形成0.1mL以上10mL以下。储液部130的材质不被特别地限定,能够形成高分子、金属等,也可以与管部100的材质相同。
[0089]如核酸提取用设备1040那样,具备储液部130,从而能够在储液部130内收容例如粒子等、吸附液以及检体,而使核酸吸附于粒子等。而且,能够将该粒子等从管部100的第一液柱10侧容易地导入到管部100内。
[0090]另外,储液部130能够与管部100 —同振摇,从而能够充分地搅拌储液部130内的液体。由此,能够使核酸迅速地吸附于粒子等。此外,适当地变更导入储液部130的检体量与管部100内的液体的体积,由此能够使检体中的核酸在溶出液中定量浓缩。
[0091]在如核酸提取用设备1040那样具有储液部130的情况下,也可以进一步具有对储液部130的开口 131进行密封的、可自由拆卸的盖132。而且,作为储液部130的材质,则选择橡胶、弹性体、高分子等具有挠性的材料,则在将盖132安装于储液部130的状态下,使储液部130变形,从而能够对管部100的内部进行加压。
[0092]由此,在将溶出核酸的第四液柱40的溶出液从管部100的第五液柱50侧的端部排出时,能够从管部100的第一液柱10侧容易地施加压力。由此,能够进行从向容器120导入检体的工序至将溶出液容易地分注于例如用于PCR的反应容器等的工序。另外,若安装盖132,则能够抑制雨使储液部130与管部100 —同振摇时的漏液,因此能够进一步提高使核酸吸附于粒子等的效率。
[0093]1.6.5.搬运/保存用构造
[0094]在搬运、保存核酸提取设备时,戴上已带电的丁腈手套的手与管部接触,从而在水性溶液与管之间产生电场。在该情况下,例如,在后述那样欲将水性溶液挤出至管的外部时,往往水性溶液被管的内壁吸引而附着于管的内壁,从而能够仅挤出油,水性溶液不移动、液柱分裂、或者水性溶液在管的内壁反弹从而使水性溶液的液滴在油中浮游。分裂、成为液滴的水性溶液往往通过静电的作用而在油中移动,而与由其他的前处理试剂构成的液柱混和。于是,已混和的液柱的水性溶液的组成变化,从而可能过损失各液柱的功能。
[0095]因此,核酸提取设备优选具备在将其搬运时、保存时,能够防止管部内的油、水性溶液的带电的构造,优选具备不使戴上已带电的丁腈手套的手等的带电物质与管部内的油、水生溶液接近的构造。此外,在本说明书中,所谓“防止带电”是指不需要100%消除带电,只要将产生带电减少直至管不产生问题而发挥功能即可。
[0096]为了不使戴上已带电的丁腈手套的手等的带电物质与管部内的油、水性溶液接近,例如能够以包围管部的方式设置罩部。图6是示意性地表示安装了能够覆盖管部100的、作为装卸式罩部的帽140的核酸提取设备1050、与取下该帽140的核酸提取设备1050的图。帽140的材质例如能够列举非磁性金属、玻璃、塑料、橡胶、石头为例。在将核酸提取设备1040使用为提取核酸时,也可以除去帽140,使后述的永久磁铁410接近管部100。
[0097]图7是示意性地表示安装了能够覆盖管部100的、作为罩部的、附带盖151的伸缩式帽150的核酸提取设备1060、与使该伸缩式帽150收缩的核酸提取设备1060的图。伸缩式帽150只要能够沿管部100延伸的方向进行伸缩,则也可以为任意的构造,例如,也可以形成蛇腹构造。在为了提取核酸而使用核酸提取设备1060时,除去盖151,而使伸缩式帽150沿管部100的伸长方向收缩从而使管部100露出。伸缩式帽150也可以利用手进行收缩,或者也可以在核酸提取用装置设置口径比伸缩式帽150的外径小的设备插入口,将核酸提取设备1060压入该设备插入口,从而使伸缩式帽150收缩,而使后述的永久磁铁410接近管部100。
[0098]图8是示意性地表示安装了能够覆盖管部100的、作为伸缩式罩部的、具有弹簧161与弹簧161的保持部162的盖160的核酸提取设备1070、与使该弹簧161收缩的状态的核酸提取设备1070的图。在弹簧161容易左右摇摆的情况下,也可以将用于将弹簧161固定于规定的位置的支柱设置于弹簧161的内侧。在为了提取核酸而使用核酸提取设备1070时,利用手使弹簧161沿管部100的伸长方向收缩,从而使管部100露出,而将已收缩的弹簧161固定于保持部162。也可以在核酸提取用装置设置口径比弹簧161的外径小的设备插入口,将设备压入该设备插入口,从而使弹簧收缩而使管部100露出,进而使后述的永久磁铁410接近管部100。
[0099]图9是示意性地表示具备从管部100经由支承部170而形成的罩部171的核酸提取设备1080的图。图9B是图9A的虚线部的剖视图。在为了提取核酸而使用核酸提取设备1080时,也可以使永久磁铁410从罩部171的外侧接近。
[0100]图10是示意性地表示在罩部171设置沿管部100延伸的方向延伸的狭缝173的核酸提取设备1082的图。图1OB是图1OA的虚线部的剖视图。在为了提取核酸而使用核酸提取设备1082时,后述的永久磁铁410能够插入狭缝173而接近管部100。
[0101]图1lA是示意性地表示具有形成网眼构造的罩部174的核酸提取设备1084的图。图1lB是示意性地表示具有呈水珠状打开孔的罩部175的核酸提取设备1085的图。在核酸提取设备1084、1085的罩部设置有一个以上孔,但孔的大小比人的手指的大小小,因此抑制在搬运时把持了核酸提取设备1084、1085的人的手的手指超过罩部而接近管部100。
[0102]图12是示意性地表示放入附带紧固件180的袋181的核酸提取设备1086的图。在搬运核酸提取设备1086时,优选以即使利用戴上已带电的丁晴手套的手握住袋181,也能够防止上述管部与上述罩部附着的方式向袋181内封入氮气等气体,而使其膨胀至手距管部100的内腔表面3mm以上不接近的程度。袋181的材料只要由能够变形的材料形成则不被特别地限定,但例如能够使用塑料。在为了提取核酸而使用核酸提取设备1086时,也可以刺破袋181而使管部100露出。由此,能够使永久磁铁410接近管部100。袋181也可以形成若拉动紧固件180则容易使袋破裂的构造。
[0103]也能够以戴上已带电的丁晴手套的手等的带电物质不接近管部内腔的方式使核酸提取设备的管部的侧壁的厚度增厚。由此,即便在已带电的手等与管部接触的情况下,也能够防止管部内的油、水性溶液带电。管部的侧壁的厚度为能够防止管部内腔中的油、水性溶液的带电的厚度,并且,只要为后述的永久磁铁的操作经由管部的侧壁而能够形成的厚度即可,但优选为3mm以上,优选为9.5mm以下。
[0104]在管部的侧壁中埋入有非磁性且为导电物质的金属或者合金等,从而能够进一步提高防止管部内的油、水性溶液的带电的效果。例如,能够埋入有螺旋状的铜线。
[0105]以上那样,若防止管部内的油、水性溶液的带电,则能够稳定地维持管部的各液柱的位置。而且,防止核酸提取设备的带电,由此使使用了核酸提取设备的核酸提取自动化变得容易。
[0106]1.6.6.第六液柱以及第七液柱
[0107]本实施方式的核酸提取用设备也可以在管部的内部具有第六液柱以及第七液柱。图13是示意性地表示在管部100的内部具有第六液柱60以及第七液柱70的核酸提取用设备1100的图。
[0108]核酸提取用设备1100具有在上述的核酸提取用设备的管部100的内部的第三液柱30与第四液柱40之间从第三液柱30侧依次追加了由不与油混和的第二清洗液构成的第六液柱60以及由油构成的第七液柱70的结构。
[0109]第六液柱60配置于管部100内的第三液柱30的与第二液柱20相反一侧的位置。第六液柱60由第二清洗液构成。第二清洗液是与构成第三液柱30的油以及构成第七液柱70的油均不混和的液体。作为第二清洗液,能够列举水或者溶质浓度为1mM以下、优选为7mM以下、更加优选为5mM以下的缓冲液。缓冲液的组成不被特别地限定,能够例示Tris-盐酸缓冲液等,也可以含有Η)ΤΑ(乙二胺四乙酸)等。另外,第二清洗液可以是与第一清洗液相同的组成,也可以是不同的组成。
[0110]第六液柱60的体积不被特别地限定,能够以吸附有核酸的粒子等的量等为指标适当地设定。例如,在粒子等的体积为0.5 μ L的情况下,第六液柱60的体积只要为10 μ L以上则足够,优选为20 μ L以上50 μ L以下,进一步优选为20 μ L以上30 μ L以下。若第六液柱60的体积在该范围内,则在粒子等的体积为0.5 μ L的情况下,能够充分地进行粒子等的清洗。此外,在粒子等的清洗时,优选第六液柱60的体积更大,但能够考虑管部100的长度、粗度、依赖于它们的第六液柱60的管部100的长边方向的长度等而适当地设定。
[0111]第六液柱60也可以被油的液柱分割而由多个液柱构成。在第六液柱60由被油液柱分割的多个液柱构成的情况下,第二清洗液的液柱形成有多个。因此,在第六液柱60被油液柱分割的情况下,若清洗的对象为水溶性物质,则通过被分割的第二清洗液到达的水溶性物质的浓度比通过未被分割的相同体积的第二清洗液到达的水溶性物质的浓度小,因此更加优选。第六液柱60被分割的数目任意,但若清洗的对象为水溶性物质,则例如若以等体积2等分,则计算上能够使水溶性物质的浓度下降至未分割时的1/4的浓度。第六液柱60被分割的数目例如能够考虑管部100的长度、清洗的对象等而被适当地设定。此外,在使第二液柱20的第一清洗液与第六液柱60的第二清洗液相同的情况下,在不具有上述的第六液柱60以及第七液柱70的核酸提取用设备中能够获得与分割了第二液柱20的情况相同的效果。
[0112]第七液柱70由不与相邻的第六液柱60以及第四液柱40的液体混和的油构成。第七液柱70的油也可以是与第一液柱10、第三液柱30以及第五液柱50的油不同种类的油。作为油,能够形成与在第一液柱10等中例示的油相同的油。
[0113]优选在第七液柱70中没有气泡、其他的液体,但只要吸附有核酸的粒子等能够通过第七液柱70,也可以存在气泡、其他的液体。另外,优选在第七液柱70与相邻的第四液柱40以及第六液柱60之间没有气泡、其他的液体,但只要吸附有核酸的粒子等能够在管部100内移动,也可以存在气泡、其他的液体。此外,优选在第七液柱70中没有气泡、其他的液体。
[0114]第七液柱70的管部100的长边方向的长度只要在能够形成液柱的范围内则不被特别地限定。作为第七液柱70的管部100的长边方向的具体长度,为Imm以上50mm以下,为了不使粒子等的移动距离过大,而优选为Imm以上30mm以下,进一步优选为5mm以上20mm以下。在核酸提取用设备1100中,在采用若使第七液柱70的管部100的长边方向的长度增长则从管部100的第五液柱50侧的端排出第四液柱40的方式的情况下,能够难以排出第六液柱60。在该情况下,作为第七液柱70的具体长度,能够形成1mm以上50mm以下。
[0115]另外,第七液柱70具有抑制第二清洗液(第六液柱60)以及溶出液(第四液柱40)相互混合的功能。另外第七液柱70成为更高粘度的油,从而当使粒子等在与第二清洗液(第六液柱60)的界面移动的情况下,能够提高油所带来的“洗掉效果”。由此,在使粒子等从第六液柱60的第二清洗液的液柱向油的第七液柱70移动的情况下,能够难以将附着于粒子等的水溶性的成分带入第七液柱70 (油)。
[0116]根据核酸提取用设备1100,能够将吸附有核酸的粒子等在第二液柱20以及第六液柱60进行清洗。由此,能够进一步提高粒子等的清洗效率。
[0117]另外,在核酸提取用设备1100中,也可以第二液柱20的第一清洗液含有促溶剂。例如,若在第二液柱20的第一清洗液含有盐酸胍,则能够在第二液柱20维持或强化吸附于粒子等的核酸的吸附并且对粒子等进行清洗。作为在第二液柱20含有盐酸胍的情况下的浓度,例如,能够形成3mol/L以上10mol/L以下,优选为5mol/L以上8mol/L以下。若盐酸胍的浓度在该范围内,则能够使吸附于粒子等的核酸更加稳定地吸附,并且能够对其他的杂质等进行清洗。
[0118]而且,将第六液柱60的第二清洗液形成水或缓冲液,从而能够在第二液柱20 (第一清洗液)使吸附于粒子等的核酸更加稳定地吸附并且进行清洗,并且能够在第六液柱60 (第二清洗液)中稀释促溶剂并且对粒子等进一步进行清洗。
[0119]即便是在管部100的内部具有第六液柱60以及第七液柱70的核酸提取用设备1100,也能够在结构中附加上述栓、容器、储液部等,从而获得与上述相同的效果是容易理解的。
[0120]2.核酸提取用盒
[0121]图14是表示本实施方式的核酸提取用试剂盒的一个例子的示意图。图14例示的核酸提取用试剂盒2000包括构成上述的核酸提取用设备的主要部位的部件。对与“1.核酸提取用设备”的项目中进行了说明的结构相同的结构标
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