实验结结果见附图2至附图7所示,优化试验结果如表1所 /Jn 〇
[0107] 表1真空辅助提取条件优化试验结果
[0110]利用Design-Expert 8.0统计软件对表1实验数据进行回归拟合,分别得到提取液 中多酚、黄酮、多糖、花青素的含量对真空度、提取温度和提取时间3个因素的二次多项回归 方程:
[0111] 多酚:
[0112] Yi = 367.83+17.33Xi+l. 67X2+2.25X3-19.25ΧιΧ2-1.75ΧιΧ3+9.13Χ 2Χ3-9.35Χι2-3.98Χ22+2.40Χ 32
[0113] 黄酮:
[0114] Y2 = 470.67+22.17Χι-1.58Χ2+0.083Χ3-21.25ΧιΧ2-2.62ΧιΧ 3+11. OOX2X3-H. 79Χι2-9.54Χ22-1.17Χ3 2
[0115] 多糖:
[0116] Υ3 = 774·17+19·79Χι-1·13Χ2+0·79Χ3-15·69ΧιΧ2-2·06ΧιΧ3+6·31Χ2Χ3-9·99Χι 2-3.74Χ22+0.010Χ32
[0117] 花青素 :
[0118] Υ4=48 · 50+3 · 04Χι+0 · 54X2+0 · 96X3-3 · 94ΧιΧ2-0 · 56ΧιΧ3+1 · 19Χ2Χ3-0 · 36Χι2-0 · 36Χ22+ 1 · 64Χ32
[0119]根据Des ign-Expert软件对回归模型进行分析,得出各抗氧化成分的最佳提取工 艺条件参数,分别为:多酚:真空度〇 . 67Mpa,提取温度80 °C,提取时间36min;黄酮:真空度 O . 7Mpa,提取温度77 °C,提取时间38min ;多糖:真空度O . 7Mpa,提取温度80 °C,提取时间 35min;花青素:真空度0.68Mpa,提取温度75°C,提取时间38min。综合考虑各抗氧化活性成 分的含量,结合其它因素的单因素实验结果,得出真空辅助提取的最优提取条件为:干燥油 茶花粉碎粒度为60~80目,提取溶剂乙醇-水体积分数为60%~70%,料液比为Ig: 30~ 40mL,提取时间为30~40min,提取温度为70~80°C,真空度为0.6~0.7MPa。单因素试验结 果进一步证明了本发明工艺的优越性。
[0120] 实施例19超高压二次辅助提取的工艺条件优化
[0121] 为进一步证实本发明工艺的优越性,本实施例通过单因素实验进行验证。采用超 高压二次辅助提取时,压力、提取温度和提取时间3个因素对干燥油茶花中抗氧化成分提取 的影响较显著。在此基础上,采用Box-Behnken设计方法,设计三因素三水平优化试验,优化 超高压二次辅助提取工艺条件,实验结果见附图8至附图10所示,具体试验结果如表2所示。
[0122] 表2超高压二次辅助提取条件优化试验结果
[0125]利用Design-Expert 8.0统计软件对表2实验数据进行回归拟合,分别得到提取液 中多酚、黄酮、多糖、花青素的含量对提取压力、提取时间和提取温度3个因素的回归方程:
[0126] 多酚:
[0127] Yi = 364.60+28.00Xi+3.62X2-7.13X3-2.00ΧιΧ2-3.00ΧιΧ 3+5.75Χ2Χ3+1.08Χι2-10.67Χ 22-23.68Χ32
[0128] 黄酮:
[0129] Υ2 = 482.40+41.63Χι+21.25Χ2+10.63Χ3-13.75ΧιΧ2-12.50ΧιΧ 3-5.75Χ2Χ3-33.45Χι2-37.70Χ 22-31.45Χ32
[0130] 多糖:
[0131] Y3 = 799.00+27.88Χι+5.13Χ2-5.75Χ3-11.50ΧιΧ2-8.25ΧιΧ 3-2.25Χ2Χ3-11.50Χι2-40.50Χ 22-41.75Χ32
[0132] 花青素 :
[0133] Y4= 59 · 80+3 · 88Χι+0 · 88X2-1 · 25X3+1 · 75ΧιΧ2-1 · 50ΧιΧ3_0 · 50X2X3-4 · 78Χι2-6 · 28Χ22-9.52Χ32
[0134]根据Design-Expert软件对回归模型进行分析,得出各抗氧化成分的最佳提取工 艺条件参数,分别为:多酚:提取压力373Mpa,提取时间7.2min,提取温度49°C ;黄酮:提取压 力400Mpa,提取时间6 · 2min,提取温度42°C ;多糖:提取压力398Mpa,提取时间7 · Omin,提取 温度44.3 °C ;花青素:提取压力362Mpa,提取时间7.5min,提取温度43 °C。综合考虑各抗氧化 活性成分的含量,结合其它因素的单因素实验结果,得出超高压二次辅助提取的最优提取 条件为:干燥油茶花粉碎粒度为80~100目,提取溶剂乙醇-水浓度为50%~60%,料液比 为Ig: 30~40mL,提取压力为300~400Mpa,提取时间为6~8min,提取温度为40~50°C,间歇 加压提取两次。单因素试验结果进一步证明了本发明工艺的优越性。
[0135] 实施例20油茶花颗粒冲剂配方优选试验
[0136] 为进一步证实本发明工艺的优越性,本实施例通过配方优选实验进行验证。结合 制备颗粒冲剂的常用辅料并综合考虑到提取到的油茶花提取浓缩液中的活性成分及其本 身风味,重点考虑营养成分的大限度保留和风味的优选,本发明通过大量前期研究,确定添 加可溶性淀粉包埋苦味物质,添加阿拉伯胶、葡萄糖粉作为赋形剂,添加柠檬酸调节风味, 获得具有抗氧化活性的油茶花颗粒冲剂的最佳配方,辅料与油茶花提取浓缩液的香味、口 味等感官品质相得益彰。
[0137] 所述油茶花颗粒冲剂的配方中各成分重量百分比为:浓缩液10%~70%、可溶性 淀粉1 %~5 %、阿拉伯胶10 %~40 %,葡萄糖粉10 %~70 %,柠檬酸0.5 %~3 %,所述浓缩 液由油茶花抗氧化活性原液浓缩得到。优选配方为:浓缩液30%~50%、可溶性淀粉1 %~ 2%、阿拉伯胶10%~20%,葡萄糖粉30%~50%,柠檬酸0.5%~1.5%。本实施例以油茶花 提取浓缩液、可溶性淀粉、阿拉伯胶、葡萄糖粉和柠檬酸的添加重量百分比为因素,选用L 18 (35)正交实验表进行配方优选试验验证。调配后根据工艺程序制备油茶花抗氧化颗粒冲 剂,每个配方取15g颗粒,加入IOOmL温开水冲溶,让10个有品尝经验的业内人士品尝,以颗 粒冲剂的感官状态、冲溶性、冲溶后的色泽、滋味和气味等为评价指标进行评价并打分,最 后得到综合评分,实验结果见表3所示。
[0138] 表3配方优选正交实验表
[0141] 由表3的数据通过极差分析可以优化得到油茶花颗粒冲剂配方的最佳配比为:油 茶花提取浓缩液40%、可溶性淀粉1.5%、阿拉伯胶18%、葡萄糖粉40%和柠檬酸0.5%。
[0142] 实施例21油茶花颗粒冲剂产品质量分析
[0143] 对本发明制得的油茶花颗粒冲剂随机抽取产品进行感官指标、微生物指标以及抗 氧化性能的分析。
[0144] (1)感官指标:对油茶花抗氧化颗粒冲剂的色泽、组织形态、颗粒度、滋味及冲调性 进行评定。色泽:颗粒呈褐色,色泽一致;冲调后,汤剂为浅褐色;组织形态:外观干燥、颗粒 均匀;无杂质、无结块受潮现象;颗粒度:14~30目的颗粒占比95%以上;滋味:冲调后,汤剂 滋味可□,且有油茶花特有香气,无其它怪味;冲调性:冲调性好,能够较快溶解,汤底无焦 肩等杂质。
[0145] (2)微生物指标:经检测,结果为细菌总数(cfu/gH 100个/g,大肠杆菌(MPN/ 100g) < 30,无致病菌检出。
[0146] (3)抗氧化性能:取本发明油茶花抗氧化颗粒冲剂,以温开水冲调为一系列不同浓 度,测定样品液的还原能力及对自由基的清除能力。
[0147]①油茶花颗粒冲剂的还原能力测定
[0148] 在2.5mL pH = 6.6磷酸缓冲液中加入1ml样品液(稀释一定样液梯度)和ImL 1 %铁 氰化钾溶液,混合均匀后将混合物在50 °C恒温条件下加热20min后,急速冷却,加入2.5mL 10%三氯乙酸,离心分离lOmin。取上层清液5ml,依次加入5ml水和Iml 0.1 %氯化铁溶液, 混合均匀,静置IOmin后在波长710nm下测定吸光值(A) J值越大,则样品的还原力越强。实 验以低浓度0.05mg/mL的抗坏血酸为对照。实验结果如附图12所示。
[0149] 由附图12可得,本发明油茶花颗粒冲剂的还原能力很强,冲调后4g/100mL的汤剂 的还原能力相当于0.005g/l OOmL的抗坏血酸溶液。
[0150] ②油茶花颗粒冲剂清除DPPH ·自由基的效果
[0151] 将浓度为I X 10-4M的DPPH ·无水乙醇溶液3.OmL与0.1 mL不同浓度的样品液混合, 摇勾,室温、暗室反应30min,以无水乙醇调零测定其517nm处吸光值(A)。同时测定0.1 mL样 液与3. OmL无水乙醇混合液的吸光值(B)和0.1 mL无水乙醇与3. OmL DPPH ·醇溶液混合液的 吸光值(Ao)。样品对DPPH ·自由基的清除率(% ) = [ 1-(Α-Β)/Α0] X 100( % )。实验结果如附 图13所示。由附图13可得,本发明油茶花颗粒冲剂对DPPH ·自由基的清除率随浓度的增加 而提高,IOgAOOmL浓度的汤剂对DPPH ·的清除