实施例1步骤（2)方法进行重结晶（重结晶收 率 89. 7% )。
[0206] RRT0. 89 含量=0.83%、RRT1. 14 含量=0.34%、RRT2. 68 含量=0.20%。此次重 结晶纯化，RRT0. 89含量降低82%，RRTL 14含量降低79%，RRT2. 68含量降低83%。
[0207] 步骤（3)、再次重结晶精制：
[0208] 取以上步骤（2)所得产物照本发明实施例1步骤（3)方法进行重结晶（重结晶收 率 93. 5% )。
[0209] 1^1'0.89含量=0.17%、1^1'1.14含量=0.06%、1?訂2.68含量=0.04%。此次重 结晶纯化，RRT0. 89含量降低80%，RRTL 14含量降低82%，RRT2. 68含量降低80%。
[0210] 步骤（4)、再次重结晶精制：
[0211] 取以上步骤（3)所得产物照本发明实施例1步骤（4)方法进行重结晶（重结晶收 率 91. 2% )。
[0212] RRT0. 89 含量=0.023%、RRTL 14 含量=0.010%、RRT2. 68 含量=0.007%。此 次重结晶纯化，RRT0. 89含量降低86%，RRTL 14含量降低83%，RRT2. 68含量降低82%。 经测定，其MS m/z: 318 (M-Br )，1H NMR与CN103159659A说明书最后一段所载格隆溴铵相 同。
[0213] 在对以上各批次试样进行测试时，【HPLC-A】法中RRT0. 89杂质的相对保留时间均 在0. 86~0. 92范围内，【HPLC-B】法中RRTL 14杂质的相对保留时间均在1. 10~1. 18范 围内，RRT2. 68杂质的相对保留时间均在2. 63~2. 73范围内。
[0214] 以上步骤（2)至步骤（4)所得产物，特别是步骤（3)至步骤（4)所得产物均可作 为本发明的格隆溴铵原料药，例如用于制备药物制剂用。
[0215] 实施例3 :制备格降溴铵原料药
[0216] 步骤（1)、合成式I化合物及其对映体：
[0217] 照CN102627595A说明书【具体实施方式】部分的方法即说明书[0043]段至[0046] 段所载方法制备得到格隆溴铵。RRT0. 89含量=4. 13%、RRTL 14含量=1. 36%、RRT2. 68 含量=1. 03%。
[0218] 步骤（2)、重结晶精制：
[0219] 取以上步骤（1)所得产物照本发明实施例1步骤（2)方法进行重结晶（重结晶收 率 92. 4% )。
[0220] 1^1'0.89含量=0.70%、1^1'1.14含量=0.24%、1?訂2.68含量=0.16%。此次重 结晶纯化，RRT0. 89含量降低83%，RRTL 14含量降低82%，RRT2. 68含量降低84%。
[0221] 步骤（3)、再次重结晶精制：
[0222] 取以上步骤（2)所得产物照本发明实施例1步骤（3)方法进行重结晶（重结晶收 率 92. 0% )。
[0223] 1^1'0.89含量=0.12%、1^1'1.14含量=0.048%、1?訂2.68含量=0.027%。此次 重结晶纯化，RRTO. 89含量降低83%，RRTL 14含量降低80%，RRT2. 68含量降低83%。
[0224] 步骤（4)、再次重结晶精制：
[0225] 取以上步骤（3)所得产物照本发明实施例1步骤（4)方法进行重结晶（重结晶收 率 93. 1% )。
[0226] RRT0. 89 含量=0.021 %、RRTL 14 含量=0.009%、RRT2. 68 含量=0.005%。此 次重结晶纯化，RRT0. 89含量降低85%，RRTL 14含量降低81%，RRT2. 68含量降低81%。 经测定，其MS m/z: 318 (M-Br )，1H NMR与CN103159659A说明书最后一段所载格隆溴铵相 同。
[0227] 在对以上各批次试样进行测试时，【HPLC-A】法中RRT0. 89杂质的相对保留时间均 在0. 86~0. 92范围内，【HPLC-B】法中RRTL 14杂质的相对保留时间均在1. 10~1. 18范 围内，RRT2. 68杂质的相对保留时间均在2. 63~2. 73范围内。
[0228] 以上步骤（2)至步骤（4)所得产物，特别是步骤（3)至步骤（4)所得产物均可作 为本发明的格隆溴铵原料药，例如用于制备药物制剂用。
[0229]比较实施例1:参照本文实施例1步骤（3)的操作，不同的仅是将其中第一溶剂 即无水乙醇-乙酸乙酯混合溶剂替换为乙醇与水、甲醇、1-辛醇、苯甲醇、乙酸乙酯以体积 比（100 :10)的混合液，制得5批产物。计算这5批产物经过此次重结晶纯化后RRT0. 89、 RRTL 14、RRT2. 68三者含量降低程度，结果RRT0. 89的含量降低均在31. 3~57. 4%范 围内，RRTL 14的含量降低均在27. 8~55. 6%范围内，RRT2. 68的含量降低均在33. 6~ 53. 8%范围内，远比使用本发明无水乙醇-乙酸乙酯混合溶剂时含量降低至少75%的低。
[0230]比较实施例2:参照本文实施例1步骤（3)的操作，不同的仅是将其中第一溶剂即 无水乙醇-乙酸乙酯混合溶剂100 :1〇体积比改为100 :〇、1〇〇 :5、100 :20、或100 :30,制得 4批产物。计算这4批产物经过此次重结晶纯化后杂质含量降低程度，结果RRT0. 89的含量 降低均在24. 1~52. 3%范围内，RRTL 14的含量降低均在17. 4~58. 6%范围内，RRT2. 68 的含量降低均在21. 3~42. 3%范围内。
[0231]比较实施例3:参照本文实施例1步骤（3)的操作，不同的仅是将其中第二溶剂即 正己烷替换为乙醚、叔丁基甲基醚、正庚烷、正己烷，制得4批产物。计算这4批产物经过此 次重结晶纯化后杂质含量降低程度，结果RRT0. 89的含量降低均低于48 %，RRTL 14的含量 降低均低于41%，RRT2. 68的含量降低均低于38%。
[0232]比较实施例4:取本发明实施例1步骤⑵的产物和实施例2步骤⑵的产物，分 别照CN101133021B说明书[0021]段的方法进行重结晶，制得2批产物。计算这2批产物 经过此次重结晶纯化后杂质含量降低程度，结果RRT0. 89的含量降低均低于52%，RRTL 14 的含量降低均低于41%，RRT2. 68的含量降低均低于55%。
[0233]比较实施例5:照CN101133021B说明书[0014]至[0021]段所载方法制备得到一 批格隆溴铵产物（在本发明中可记为#〇21B)。
[0234] #021B 照本发明【HPLC-A】和【HPLC-B】测定，RRT0. 89 含量=0? 312%、RRT1. 14 含 量=0? 193%、RRT2. 68 含量=0? 176%。
[0235] 将#021B以及本发明上文实施例3步骤（3)和步骤⑷所得产物三者采用 CN101133021B说明书[0022]至[0034]段所载HPLC方法进行检测，结果对于RRT0. 95处的 杂质，#02IB样品中为0. 14 %，实施例3步骤（3)样品中中为0. 06 %，实施例3步骤（4)样品 中中为0.0 il%。即使假设该RRTO. 95与本发明RRTO. 89是同一物质，则表明CN101133021B 的HPLC方法灵敏度低，可能有漏测。
[0236] 制备例1 :制备RRT0. 89杂质（杂质Ix)
[0237] 照CN103012231A说明书[0049]至[0052]段方法分别制备3S，2' S-格隆溴铵和 3R，2' R-格隆溴铵，分别经乙腈重结晶使它们在本发明【HPLC-A】法中色谱纯度均在98. 5% 以上，二者在该色谱法中相对于本发明3R2S/3S2R格隆溴铵的相对保留时间均在0. 88~ 0. 91范围内。将此二者以1 :1重量比混合，得到RRT0. 89杂质，即本发明格隆溴铵的赤型 异构体（杂质Ix)，可作为本发明化学试验或生物学试验使用。
[0238] 制备例2 :制备RRTL14杂质（即GP碱、杂质Iv)
[0239] 照US2956062A所记载的方法制备格隆胺碱，经丙酮重结晶纯化至在本发明 【HPLC-B】法中色谱纯度在98. 5%以上，其在该色谱法中相对于本发明3R2S/3S2R格隆溴铵 的相对保留时间在1. 13~1. 15范围内，得到RRTL 14杂质（杂质Iy)，可作本发明为化学 试验或生物学试验使用。
[0240] 试验例1 :本发明原料药的件能测试
[0241]测试实施例1步骤（2)~步骤（5)、实施例2步骤（2)~步骤（4)、实施例3步骤 (2)~步骤（4)、比较实施例1~4所得各批次的格隆溴铵物料的理化数据，结果如下：
[0242] (1)外观性状：均为白色结晶粉末。
[0243] (2)熔点：均在192~196°C范围内，熔距均不超过2°C。
[0244] (3)照中国药典2010年版二部814页所载格隆溴铵各项检测方法进行测定，结果 这些批次的格隆溴铵试样均符合该标准规定。
[0245] 试验例2 :原料药的稳宙件考察
[0246] 取以上实施例1步骤（1)~步骤（5)、实施例2步骤（1)~步骤（4)、实施例3步 骤（1)~步骤（4)所得各批次的格隆溴铵物料，#021B样品，以及由实施例1步骤（5)所得 格隆溴铵与制备例1所得杂质lx、制备例2所得杂质Iy、和/或市售所得杂质Iz以一定比 例混合（以少许无水乙醇溶解，随即真空干燥以使它们充分混合，测定其中lx、Iy和/或Iz 相对于格隆溴铵的含量）制成组配物。
[0247] 将这些物料密封，在40°C条件下密封、避光放置6个月，计算在此条件下处置6个 月后某杂质相对于该杂质在〇月时的含量增加百分数。
[0248] 结果发现，在各种含量情况下，杂质Ix和杂质Iy两者在6个月时相对于其 在〇月时的含量增加百分数均低于36%。例如实施例1步骤⑴样品中的杂质Ix， 在〇月时为4. 63%，在6月时为5. 97%，杂质Ix含量增加百分数为29 % [算法： (5. 97%-4. 63% )/4. 63% X 100%= 29%，下同]。又例如实施例1步骤（2)样品中的杂 质Iy，在0月时为0. 39%，在6月时为0. 51 %，杂质Iy含量增加百分数为31 %。
[0249] 但是对于杂质Iz，其在高温处置6个月后的含量增加百分数却显示与样品中杂质 Iy含量有关：当杂质Iy含量低于〇. 130%时，杂质Iz含量增加百分数均低于33%;但是当 杂质Iy含量大于〇. 150%时，杂质Iz含量增加百分数显示增加至90%以上，并且样品中杂 质Iy含量越高则杂质Iz含量增加百分数越大。例如实施例1步骤（2)样品中的杂质Iy =0.39%，该试样在6月后杂质Iz由原有的0.23%增加至0.75%，杂质Iz含量增加百分 数达到226%;而实施例1步骤（3)样品中的杂质Iy = 0. 08%，该试样在6月后杂质Iz由 原有的0.05%增加至0.062%，杂质Iz含量增加百分数仅为24%。#021B在高温处置6个 月后杂质Iz的含量增加百分数为129%。具体结果见表1。
[0250]表 1 :
[0251]
[0252] 以上表中，第二列ExlS(I)表示本发明实施例1步骤（1)所得产物，该产物作为试 样，其中各杂质相对于格隆溴铵的含量列于第三列"特征（lx、Iy、Iz %含量）"中，其它表述 均有类似含义。
[0253]表 2 :
[0254]
[0256] 以上表中，第二列ExlS (5)+Iy表示本发明实施例1步骤（5)所得产物与制备例2 所得杂质Iy进行组配，组配物中各杂质相对于格隆溴铵的含量列于第三列"特征（Ix、Iy、 Iz %含量）"中，其它表述均有类似含义。
[0257]表 3 :
[0258]
[0262] 以上表中，第二列Ex2S (4)+Iy+Iz表示本发明实施例2步骤（4)所得产物与制备 例2所得杂质Iy以及市售的杂质Iz进行组配，组配物中各杂质相对于格隆溴铵的含量列 于第三列"特征（Ix、Iy、Iz%含量）"中，其它表述均有类似含义。表中结果可见，即使适量 增加试样本体中的杂质Iz量至〇. 200 %，其含量增加趋势仍然与样品中的杂质Iy有关。
[0263]另外，参考以上表4的组配物，不同的是在各试样中再添加适量杂质Ix至其在组 合物中相对于格隆溴铵的量而言达到0.5%。得到11个组配物同样进行6个月40°C处置， 结果杂质Ix和杂质Iy两者在6个月时相对于其在O月时的含量增加百分数均低于33%。 但杂质Iz在6个月时相对于其在O月时的含量增加百分数与表4中相应杂质Iy含量的组 配物结果基本相同（均不超过5个百分点），例如与表4编号7的试样相应的组配物的Iz 增加百分数为136%。
[0264] 以上这些制备的可作为原料药的格隆溴铵经测试，其中杂质Ix含量最低的试样 为0.004%，杂质Iy含量最低的试样为0.003%，杂质Iz含量最低的试样为0.002%。显 然，就本发明原料药而言，其中杂质Iy相对于格隆溴铵而言含量低于0. 50% (例如低于 0? 30%、低于0? 25%、低于0? 20%、低于0? 15%、低于0? 13% )是有益的，例如Iy含量（相 对于格隆溴铵计）在〇? 003%~0? 500%范围内（例如在0? 003%~0? 400%范围内、例如在 0? 003%~0? 300%范围内、例如在0? 003%~0? 250%范围内、例如在0? 003%~0? 200% 范围内、例如在0.003%~0. 150%范围内、例如在0.003%~0. 130%范围内）是有益的。 已经测试上述可作为原料药的格隆溴铵对于它们杂质Iy相对于格隆溴铵而言含量低于 0. 13%的试样，它们的杂质Ix相对于格隆溴铵而言含量均低于0.3%，它们的杂质Iz相对 于格隆溴铵而言含量均低于0. 13%。一一即对于可作为本发明的格隆溴铵原料药而言，作 为本发明的一个实施方案，本发明的格隆溴铵原料药中，杂质Ix相对于格隆溴铵而言含量 低于0.3% (例如为0.004%~0.300% )，杂质Iy相对于格隆溴铵而言含量在0.003%~ 0. 130%范围内，杂质Iz相对于格隆溴铵而言含量在0.002%~0. 130%范围内，具有这些 特点的格隆溴铵原料药是本发明优选的。
[0265]组合物例1 :
[0266] 使用本发明实施例1步骤（4)所得格隆溴铵作为原料