中所制备的特应性皮炎动物模型，并用基质乳霜处 理对照组。观察自动痊痒反应一小时，并对下香酪处理后的恢复效果进行比较。
[0177] 结果显示特应性皮炎动物模型在一小时内进行抓晓行为约40次，运与仅进行低于 10次的抓晓行为的正常动物相比显著增加。然而，在用下香酪处理特应性皮炎动物模型之 后，抓晓行为与正常动物的相似(图4)。
[0178] 实验实施例4:下香酪经抓晓测试对痊痒的作用
[0179] 为了确定与本发明中诱导痊痒的物质如组胺或血清素的反应，进行行为实验。为 了诱导抓晓，使用已知能在人中诱导痒感的组胺和血清素。在此，用无菌盐溶液稀释组胺或 血清素。在实验的前一天，通过将ZOlitel与甲苯嚷嗦Wl :4的比例混合并注射ImL/kg使实 验动物麻醉，并用理发剪在实验动物的颈背上移除1.5cmX 1.5cm平方厘米的颈背区域的毛 发。在实验当天，制作IOcmX 20cmX 15cm尺寸的盒子，并使小鼠在盒子中稳定30分钟。此后， 将10化L溶剂或实验物质应用于小鼠颈背部，并且30分钟后，经皮内注射在实验动物的颈背 部注射50化诱导痊痒的物质（500yg/部位的组胺或IOiig/部位的血清素）。接下来，视频记录 实验动物的反应，持续30分钟，并通过将实验动物的后爪至颈背部的注射区域的上下作为 一次抓晓来进行抓晓测试。此外，W3种不同的浓度（lwt%、3wt%和lOwt%)应用作为乳霜 的下香酪，检测对组胺或血清素诱导的痊痒的反应。在此，应用的乳霜制剂的量为I(K)化或 200化。
[0180] 结果显示不含下香酪的乳霜未显著降低组胺巧OOiig)诱导的痊痒，但用3wt%下香 酪处理将痊痒反应降低了至少40%。此外，随着lOwt%的下香酪增加了对组胺依赖性痊痒 的阻断效果，观察到了量依赖的形式。
[0181] 同时，对下香酪对由血清素（1化g)诱导的痊痒的效果进行检测。证实与组胺诱导 的痊痒不同，在用10化L 3wt%下香酪处理的组中未观察到止痒作用，并且用10化L lOwt% 下香酪处理的组显示出对血清素诱导的痊痒的阻断。结果提示下香酪对组胺或血清素诱导 的痊痒有效果，但对组胺诱导的痊痒更有效。
[0182] 实验实施例5:下香酪衍生物对痊痒的作用
[0183] 如实验实施例4中所述，为了诱导抓晓，通过皮内注射在颈背部用50化g/部位的组 胺注射对照组中的实验动物，并且所述实验组与组胺一起同时注射作为代表性的下香酪衍 生物的IOyM的异下香酪(顺式与反式的混合物，8化g)和IOiiM的甲基下香酪(8化g) W及IOiiM 的下香酪(8化g)。此后，视频记录实验动物的反应，持续30分钟，并通过将实验动物的后爪 至颈背部的注射区域的上下动作作为一次抓晓来进行抓晓测试。
[0184] 结果显示，仅用组胺进行皮内注射的动物模型平均抓晓约152次，而同时注射下香 酪的动物模型（i)平均抓晓约45次;用异下香酪注射的动物模型（ii)平均抓晓约80次;和用 甲基下香酪注射的动物模型（iii)平均抓晓99次；因而证实同时注射下香酪和其衍生物显 著降低了抓晓的次数（图11)。运提示不仅下香酪显示出对组胺诱导的痊痒的止痒作用，下 香酪的衍生物也显示出对组胺诱导的痊痒的止痒作用。
[0185] 实验实施例6:下香酪对急性机械性疼痛反应和转棒(rotarod)运动活动的作用
[0186] 实验实施例6-1:下香酪对急性机械性疼痛反应的作用
[0187] 下香酪被用作牙科的麻醉剂，并且可W显示出通过阻断存在于感觉神经元的电压 依赖性钢离子通道而阻断疼痛的作用。然而，通过阻断钢离子通道来阻断疼痛的作用是由 阻断所有的皮肤感觉信息所诱导的，因而是非特异性现象。因此，进行冯弗雷(von-Frey)测 试，W通过确认痊痒有效浓度的下香酪是否阻断了疼痛反应来检测止痒作用是否是由通过 阻断感觉神经的电压依赖性钢离子通道而降低的刺激所诱导的。参考化apian等（1994)，用 冯弗雷丝(0.02g至4g)刺激实验动物的后爪，并测量50%回避反应。通过该方法，测量对机 械性刺激的回避反应，并作为反应的阔值进行评估。
[0188] 结果显示，利用冯弗雷，3wt%的下香酪在机械性疼痛中未显示出显著差异。运提 示3wt%的下香酪与通过阻断电压依赖性钢离子通道所诱导的麻醉效果无关。
[0189] 实验实施例6-2:下香酪对运动活动的作用
[0190] 在本发明中，进行转棒测试W检测下香酪对对象的运动操作能力的影响。决定通 过在30秒内将速度从Irpm逐渐增加至40rpm来旋转筒W进行转棒测试，并测量直至从筒上 掉落的时间。如果下香酪显示出对运动能力的影响，则缩短时间。此外，为了检测痊痒反应 是否由因下香酪导致的降低的运动能力而减弱，在不同的下香酪浓度下对运动能力进行检 测。
[0191] 结果显示，所有下香酪处理的组（200化的3wt %、200化的IOwt %和400化的 lOwt%)都显示出与对照组的运动能力相似的运动能力。运提示痊痒有效的下香酪浓度未 降低对象的运动能力，并且特异性地作用于抑制痊痒。
[0192] 实验实施例7:下香酪对急性热疼痛反应的作用
[0193] 为了检测3wt%的下香酪是否对辣椒素受体起作用并影响对热刺激的行为反应， 进行哈格里夫化argreaves)测试。参考化rgreaves等（1988)，将由光引起的热刺激递送至 受对象的后爪，并测量相应的回避反应时间。
[0194] 结果显示，与基质乳霜(其为乳霜制剂)相比，3wt%的下香酪显著增加在针对热疼 痛的应答中的回避反应，运意味着下香酪乳霜阻断了热疼痛。因此，运提示下香酪通过阻断 辣椒素受体对组胺依赖性痊痒起作用。
[01M]实验实施例8:对下香酪乳霜止痒作用的持续时间的评估
[0196] 为了检测下香酪止痒作用的持续时间，在诱导组胺诱导的痊痒之后，检测下香酪 作用的持续时间。在诱导组胺诱导的痊痒前各自1小时、3小时和5小时，用20化L 3wt%的下 香酪乳霜进行预处理，并在相应的时间过去之后，如实验实施例4中诱导组胺诱导的痊痒。 同时，用基质乳霜处理对照组。
[0197] 结果是，组胺诱导的痊痒动物模型在30分钟内进行抓晓行为约152次，而用基质乳 霜处理的动物模型在30分钟内进行抓晓行为约141次，在诱导组胺诱导的痊痒前一小时用 下香酪乳霜预处理的动物模型进行抓晓行为约59次，运证实了短时期内的镇静作用。此外， 进行3小时前和5小时前预处理的动物模型分别进行抓晓行为约70次和107次，从而证实痊 痒镇静作用持续高至5小时（图10)。
[0198] 基于上述描述，本领域普通技术人员应当理解，在不脱离本发明的技术理念或必 要特征的情况下，在本发明的实践中可W采用其它的具体实施方案。就运一点而言，上述实 例仅用于说明性目的，并且本发明不意图受运些实例的限制。本发明的范围应被理解为包 括来源于如下权利要求或其等同概念的意思和范围的所有修改或修改形式，而非上述详细 描述。
【主权项】
1. 用于预防或治疗特应性皮炎的药物组合物，其包含由式1或式2所表示的化合物或其 药学上可接受的盐作为活性成分，其中，在所述式中，R是氢或烷基。2. 如权利要求1所述的组合物，其中式1中的R是氢或甲基，以及式2中的R是氢。3. 如权利要求1所述的组合物，其中所述组合物还包含药学上可接受的载体。4. 如权利要求1所述的组合物，其中所述化合物或其药学上可接受的盐的浓度范围为 3wt% 至 10wt%。5. 如权利要求1所述的组合物，其中所述化合物或其药学上可接受的盐的特征在于阻 断辣椒素受体。6. 用于预防或改善特应性皮炎的健康功能性食品组合物，其包含由式1或式2所表示的 化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分，其中，在所述式中，R是氢或烷基。7. 用于预防或改善特应性皮炎的准药物组合物，其包含由式1或式2所表示的化合物或 其药学上可接受的盐作为活性成分， [式1][式2]其中，在所述式中，R是氢或烷基。8. 用于预防或改善特应性皮炎的化妆品组合物，其包含由式1或式2所表示的化合物或 其药学上可接受的盐作为活性成分，其中，在所述式中，R是氢或烷基。9. 如权利要求6至8中任一项所述的组合物，其中式1中的R是氢或甲基，以及式2中的R 是氢。10. 如权利要求6至8中任一项所述的组合物，其中所述化合物或其药学上可接受的盐 的浓度范围为3wt%至10wt%。11. 用于治疗特应性皮炎的经皮制剂，其包含权利要求1至5中任一项所述的组合物。12. 如权利要求11所述的制剂，其中所述经皮制剂为软膏、乳霜、凝胶、洗液、溶液、乳状 液、悬液、粘贴剂、糊剂、搽剂、泥敷剂、胶带剂、气雾剂或外用粉末形式。13. 用于预防或治疗特应性皮炎的方法，其包括向疑患有特应性皮炎的对象施用权利 要求1至5中任一项所述的组合物。
【专利摘要】本发明涉及用于预防、治疗或缓解特应性皮炎的药物组合物、功能性健康食品组合物、准药物组合物和化妆品组合物，所述组合物包含丁香酚或其衍生物或其药学上可接受的盐作为活性成分。本发明的丁香酚或其衍生物对特应性皮炎具有优良的止痒作用，因此，丁香酚或其衍生物是这样的化合物：其能够克服常规用于特应性皮炎的治疗剂的副作用，并显示出优良的治疗效果而没有毒性。因此，丁香酚或其衍生物可用作用于预防、治疗和缓解特应性皮炎的组合物。
【IPC分类】A61K31/05, A61K9/70, A61K31/045, A61P17/00
【公开号】CN105682652
【申请号】
【发明人】吴硕培, 郑丞畯, 郑智薰, 金勇虎, 李相勋
【申请人】首尔大学校产学协力团
【公开日】2016年6月15日
【申请日】2014年10月24日