0.17M Tris中含0.16M， pH 7.6)低渗裂解10分钟，W除去红细胞群，从而获得浆细胞、粒细胞和淋己细胞。将裂解所 得的、只包含单核细胞的细胞悬浮液，接种于多孔板中，细胞密度与使用添加了20%胎牛血 清的RPM巧h充培养基的祖细胞相同。
[0116] 在存在和不存在不同浓度的大麻素试剂WIN 55,212-2的情况下解育原代培养物。 所分析的试剂WIN55，212-2的浓度范围为0.5-50微摩尔。在存在或不存在大麻素试剂的情 况下，原代培养物的解育时间为12或18小时。
[0117] 如图6A-抓清晰可见，在造血祖细胞群(A)和粒细胞群(B)中，细胞活力不受影响。 在淋己细胞群(C)中，仅在最高剂量检测到活力丧失。但是，当W大于IOuM的剂量处理时， WIN使浆细胞(D)的细胞活力急剧下降。
[0118] 运些结果表明，使用CBl和/或CB2大麻素受体激动剂化合物，特别是WIN55,212-2， 不仅显示对所建立的骨髓瘤细胞系的细胞毒性，而且还显示运些化合物具有低毒性，运为 其作为针对多发性骨髓瘤和相关疾病的有前景的疗法的用途铺平了道路。
【主权项】
1. 一种大麻素试剂在制备用于预防和/或治疗单克隆丙种球蛋白病的药品中的用途。2. 根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述单克隆丙种球蛋白病选自多发性骨髓 瘤、浆细胞白血病、瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症、淀粉样变性病或其任意组合。3. 根据权利要求1-2中任一项所述的用途，其特征在于，所述单克隆丙种球蛋白病为多 发性骨髓瘤。4. 根据权利要求1-3中任意一项所述的用途，其特征在于，所述大麻素试剂为CB1受体 激动剂、CB2受体激动剂或混合激动剂。5. 根据权利要求4-5中任一项所述的用途，其特征在于，所述大麻素试剂选自：HU-308; JWH-133;L-759,633;PRS 211,375(也称为大麻酚）；AM-1241;JWH-015;L-759,656;GW-842， 166父;6卩-13;1'!1(：(四氢大麻酚）；冊-210;1^-759,656 ;￥預55,212-2;〇? 55940;〇^-13;5八8-378;JWH-018(也称为AM-678);CP 50,556-1(左南曲朵）；或其任意组合。6. 根据权利要求5所述的用途，其特征在于，所述大麻素试剂为WIN 55，212-2，或其任 何盐或溶剂化物。7. 根据权利要求5所述的用途，其特征在于，所述大麻素试剂为WIN 55，212-2，或其任 何盐或溶剂化物，并且其中所述单克隆丙种球蛋白病为多发性骨髓瘤。8. 根据权利要求4所述的用途，其特征在于，所述大麻素试剂选自：大麻萜酚(CBG)类试 剂、大麻色烯(CBC)类试剂、大麻二酚(CBD)类试剂、脱氢大麻二酚(CBND)类试剂、四氢大麻 酚(THC)类试剂、大麻酚(CBN)类试剂、大麻三醇(CBT)类试剂、大麻艾尔松(CBE)类试剂、异 大麻素试剂、大麻环酚(CBL)类试剂、大麻二吡喃环烷(CBT)类试剂、大麻色满酮(CBCN)类试 剂或其任意组合。9. 根据权利要求8所述的用途，其特征在于，该大麻萜酚(CBG)类大麻素试剂选自：大麻 萜酚(E) -CBG-C5、大麻萜酚单甲醚(E) -CBGM-C5A、大麻萜酚酸A (Z) -CBGA-C5A、次大麻环萜酚 (E) -CBGV-C3、大麻萜酚酸A (E) -CBGA-C5A、大麻萜酚酸A单甲醚(E) -CBGAM-C5A、次大麻萜酚 酸A(E)-CBGVA-C3A或其任意组合。10. 根据权利要求8所述的用途，其特征在于，该大麻色烯（CBC)类大麻素试剂选自： (± )-大麻色烯CBC-C5、（ ± )-大麻色烯酸A CBCA-C5A、（ ± )-次大麻色烯CBCV-C3、（ ± )-次大 麻色烯酸A CBCVA-C3A或其任意组合。11. 根据权利要求8所述的用途，其特征在于，该大麻二酚（CBD)类大麻素试剂选自： (-)_大麻二酚CBD-C5、大麻二酚单甲醚CBDM-C 5、大麻二酚-C4CBD-C4、（-)_次大麻二酚CBDV-C3、cannabidiorcol CBD-&、大麻二酚酸CBDA-C5、次大麻二酚酸CBDVA-C3或其任意组合。12. 根据权利要求8所述的用途，其特征在于，该脱氢大麻二酚(CBND)类大麻素试剂选 自：脱氢大麻二酚CBND-C5、脱氢次大麻二酚CBND-C 3或其任意组合。13. 根据权利要求8所述的用途，其特征在于，该四氢大麻酚(THC)类大麻素试剂选自： A 9_四氢大麻酚Λ 9-THC_C5、Δ 9四氢大麻酚-C4 Δ 9-THC_C4、Δ 9-四氢次大麻酚Δ 9-THCV_C3、 Δ 9-Tetrahydrocannabiorcol Δ 9-THC〇-Ci、Δ 9-四氢大麻酚酸Α Δ 9-THCA-C5A、Δ 9-四氢大 麻酚酸B Δ 9-THCA_C5B、Δ 9-四氢大麻酚酸-C4A和/或B Δ 9-THCA_C4A和/或B、Δ 9-四氢次大麻 酸酸AA9-THCVA_C3A、Δ-tetrahydrocannabiorcolic acid A和/或BA9-THCOA_CiA和/或 B、（-)_ Δ 8-反式（6aR，10aR) - Δ 8-四氢大麻酚 Δ 8-THC-C5、（-) - Δ 8-反式-(6aR，10aR)_四氢 大麻酚酸Α Λ 8-THCA_C5A、（_)_(6aS，10aR)_ Δ 9-四氢大麻酚(-)-顺式-Δ 9-THC_C5、或其任意 组合。14. 根据权利要求8所述的用途，其特征在于，该大麻酚(CBN)类大麻素试剂选自：大麻 酚 CBN-Cs、大麻酚-C4CBN-C4、次大麻酚 CBN-C3、大麻酚-C2CBN-C2、cannab i orco 1 CBN-Ci、大 麻酚酸ACBNA-C5A、大麻酚甲醚CBNM-C5、或其任意组合。15. 根据权利要求8所述的用途，其特征在于，该大麻三醇（CBT)类大麻素试剂选自： (-)-(9R，10R)_ 反式-大麻三醇(-)-反式 48!'-(：5、（ + )(95，105)-大麻三醇(+ )-反式-081'-(：5、 (± )-(9R，10S/9S，10R)-大麻三醇（± )-顺式-CBT-C5、（-)-(9R，10R)-反式-10-0-乙基-大 麻三醇（-)-反式-CBT-〇Et-C 5、（ ± )-(9R，10R/9S，10S)-大麻三醇-C3( ± )-反式-CBT-C3、8， 9-二羟-Δ 6a(1QaL四氢大麻酚8，9-Di- 0H-CBT-C5、大麻二酚酸a大麻三醇酯CBDA- C5 9-OH-CBT-C5酯、（_)-(6aR，9S, 10S, 10aR)-9, 10-二羟-六氢大麻酚，Cannabiripsol 0已1111&13；[1^口8〇1-〇5;(-)-6&，7，10￡1三轻-八 9-四氢大麻酸（-)-〇&1111&13；!^61：1'〇1、10-氧代-Δ 6a(1()a)四氢大麻酚0THC、或其任意组合。16. 根据权利要求8所述的用途，其特征在于，该大麻艾尔松(CBE)类大麻素试剂选自： (5aS，6S，9R，9aR)-大麻艾尔松CBE-Cs、（ 5aS，6S，9R，9aR)-C3-大麻艾尔松CBE-C3、（ 5aS，6S， 9R，9aR)_大麻艾尔松酸A CBEA-C5A、（5aS，6S，9R，9aR)-大麻艾尔松酸B CBEA-C5B、（5aS，6S， 9R，9aR)-C3-大麻艾尔松酸B CBEA-C3B、大麻环醚萜酚-C30H-异-HHCV-C3、脱氢大麻呋喃 DCBF-C5、大麻呋喃CBF-C5、或其任意组合。17. 根据权利要求8所述的用途，其特征在于，该异大麻素类大麻素试剂选自：（-)-Δ7-反式-(1R，3R，6R)_异四氢大麻酚、（±)-& 7-1，2-顺式-(11?，31?，65/15,35,61〇-异四氢次大 麻酚、（-)-A7-反式(1R，3R，6R)_异四氢次大麻酚或其任意组合。18. 根据权利要求8所述的用途，其特征在于，该大麻环酚（CBL)类大麻素试剂选自： (±)-(1&5,3&1?，8匕1?，8。1〇-大麻环酚〇81^-〇5、（±)-(1&5,3&1?，8匕1?，8。1〇-大麻环酚酸八 CBLA-C5A、（ ± )-(laS，3aR，8bR，8cR)-次大麻环酚CBLV-C3、或其任意组合。19. 根据权利要求8所述的用途，其特征在于，该大麻二吡喃环烷(CBL)类大麻素试剂选 自：大麻二吡喃环烷CBT-C5,或其任意组合。20. 根据权利要求8所述的用途，其特征在于，该大麻色满酮(CBCN)类大麻素试剂选自： 大麻色满酮CBCN-C5、大麻色满酮-C3、CBCN-C 3、大麻色满酮CBC0N-C5、或其任意组合。21. 包含权利要求4-20中任意一项所述的大麻素试剂的组合物在制备用于预防和/或 治疗单克隆丙种球蛋白病的药品中的用途。22. 根据权利要求21所述的用途，其特征在于，所述组合物为药物组合物，并可选地包 括一种或多种药学上可接受的赋形剂。23. 包含权利要求4-20中任意一项所述的大麻素试剂和适于治疗单克隆丙种球蛋白病 的另外的活性成分的联合制剂在制备用于同时或序贯联合给药治疗单克隆丙种球蛋白病 的药品中的用途和。24. 根据前面的权利要求所述的用途，其特征在于，所述单克隆丙种球蛋白病选自多发 性骨髓瘤、浆细胞白血病、瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症、淀粉样变性病或其任意组合。25. 根据权利要求23-24中任一项所述的用途，其特征在于，所述单克隆丙种球蛋白病 为多发性骨髓瘤。26. 根据权利要求23-25中任意一项所述的用途，其特征在于，所述活性成分选自：万 珂、美法仑、强的松、来那度胺、地塞米松、沙利度胺、阿霉素、硼替佐米、普乐沙福注射液、粒 细胞集落刺激因子、泊马度胺、卡非佐米、或其任意组合。
【专利摘要】本发明涉及使用增加剂量的大麻素性质的化合物抑制骨髓瘤细胞系的活性。此外，在活力和增殖方面，这些相同的化合物显示不影响CD34+细胞(正常的造血祖细胞)。因此，本发明为将大麻素性质的化合物用作针对多发性骨髓瘤和相关疾病的有前景的疗法铺平了道路。
【IPC分类】A61K31/35, A61P35/00, A61K31/352, A61K31/05, A61K31/343, A61P35/02, A61K31/353
【公开号】CN105682651
【申请号】
【发明人】何塞-安东尼奥·佩雷斯-西蒙, 玛丽亚-维多利亚·巴巴多-冈萨雷斯
【申请人】安达卢西亚健康服务部
【公开日】2016年6月15日
【申请日】2014年6月13日