含有以单乙酰基二酰基甘油化合物作为有效成分的用于促进红细胞系细胞的分化或者增...的利记博彩app_3

文档序号:9892653阅读:来源:国知局
有所好转或者变有益的所有行为。将 本发明的组合物包括在健康功能食品中使用的情况下,可以将所述组合物直接添加或者与 其他健康功能食品或者健康功能食品成分一起使用,也可以根据惯用的方法适当的使用。 有效成分的混合量可以根据使用目的合理的决定。一般,在食品或者饮料制备时本发明的 组合物对100重量份原料优选地以15重量份以下,更加优选地以10重量份以下的量来添加。 但是,以健康调节及卫生为目的的长期摄取的情况下,上述量可以是上述范围以下,并且因 在稳定性方面没有问题所以有效成分也可以使用上述范围以上的量。
[0038] 可以包括正在本发明的组合物的健康功能食品的种类没有特别的限定,具体的例 如,有肉类、香肠、面包、巧克力、糖类、快餐类、饼干类、披萨、方便面、其他面类、口香糖类、 包括冰淇淋类的乳制品、各种汤、饮料、茶、保健饮料、酒精类饮料及维生素复合剂等,并且 可以包括通常意义上的所有的健康功能食品,还可以包括作为动物饲料的食品。再者,本发 明的健康功能食品组合物以饮料的形态使用的情况下,与通常的饮料相同可以含有各种各 样的甜味剂、香味剂或者天然碳水化合物等作为添加成分。所述天然碳水化合物可以是葡 萄糖、像果糖的单糖、麦芽糖、像蔗糖的二糖、糊精、像环糊精的多糖及木糖醇、山梨醇、像赤 藓糖醇的糖醇。所述天然碳水化合物的比率虽不限于此,但本发明的组合物可以是每100 毗,优选地约0.01至0.04g,更加优选地0.02至0.03g。所述甜味剂可以是奇异果甜蛋白、像 甜叶菊提取物的天然甜味剂及糖精、像阿司帕坦的合成甜味剂。除上述以外本发明的健康 功能食品组合物可以含有各种各样的营养剂、维生素、电解质、风味剂、着色剂、果胶酸及其 的盐、海藻酸及其盐、有机酸、保护性胶体增稠剂、PH调节剂、稳定化剂、防腐剂、甘油、乙醇、 使用在碳酸饮料的碳酸化剂等。此外还可以含有天然水果汁、水果汁饮料及为蔬菜饮料的 制备的果肉。
[0039] 作为另一种做法,本发明提供包括将所述药学组合物给药至红细胞减少症怀疑个 体的阶段的预防或者治疗红细胞减少症的方法。本发明中所述红细胞减少症的怀疑个体是 指包括人类在内的已经发病红细胞减少症的,或者可能发病红细胞减少症的所有动物,通 过把本发明的药学组合物给药至红细胞减少症怀疑个体而有效地治疗个体。有关红细胞减 少症如上述说明所述。本发明中的用语"给药"是指以某种适当的方法对红细胞减少症怀疑 个体导入本发明的药学组合物,给药途径是可以通过口服或者非口服的多重途径用药,只 要能达到目的就可以。
[0040] 本发明的治疗方法还可以包括,包含上述化学式1的单乙酰基二酰基甘油化合物 的药学组合物的以药学有效量来给药。适当的总1日使用量是正确的医学判断范围内根据 主治医生而决定,一般以0.001至l〇〇〇mg/kg的量,优选地以0.05至200mg/kg,更加优选地以 0.1至100mg/kg的量,每日1次至分成数次给药。但是优选地,根据本发明的目的对特定患者 的具体治疗的有效量是,根据为了想达到的反应的种类和程度、情况是否使用不同的制剂 的具体组合物、患者的年龄、体重、一般健康状态、性别及饮食、给药时间、给药途径及组合 物的分泌率、治疗期间、与具体的组合物一起使用或者同时使用的药物等多样的因素和医 药领域公知的类似因素来分别适用。
[0041]发明的有益效果
[0042]本发明的单乙酰基二酰基甘油化合物促进红细胞系细胞的分化或者增殖具有卓 越效果,作为克服了当前所使用的贫血治疗剂的副作用且无毒性且治疗效果卓越的化合 物,可以有益的使用为预防、治疗及改善红细胞减少症的组合物。
【附图说明】
[0043]图1是表示分别从给药EC-18的小鼠和没有给药EC-18的小鼠的骨髓中分离出的骨 髓细胞中所存在的红细胞系细胞的比率的图表;
[0044]图2是表示利用FACS来确认分别从给药EC-18的小鼠和没有给药EC-18的小鼠的骨 髓中分离出的骨髓细胞中所存在的红细胞系细胞的比率的图表;
[0045]图3是表示对照群(EC-18非给药群)及实验群(EC-18给药群)的各个小鼠的红细胞 系细胞、B细胞系、T细胞系、树枝状细胞系(DC)、巨噬细胞(Macrophage)、中性粒 (Neutrophil)细胞系及NK细胞系的分布的比较图表;
[0046]图 4 是表示利用 TER-119、CD19、CD4、CD8、CDllc、CDllb/F4、CDllb/ly及CD122抗体 比较红细胞系细胞、B细胞系、T细胞系、树枝状细胞系(DC)、巨噬细胞、中性粒细胞系及NK细 胞系的给药EC-18之后的分化或者增殖程度的比较图表;
[0047]图5是表示把正常群、对照群及实验群小鼠进行苯肼处理后,经3天时的红细胞的 浓度的图表;
[0048]图6是表示把正常群、对照群及实验群小鼠进行苯肼处理后,经13天时的红细胞的 浓度的图表。
【具体实施方式】
[0049] 以下,在下述例中更加具体的说明本发明,但是下述例是为了帮助理解本发明,本 发明并不仅限于此。
[0050] 实施例1:小鼠骨髓细胞的培养
[0051] 在包含有 10%胎牛血清(Fetal Calf Serum,FCS,HyClone,Logan,UT)、2mM L-谷 氨酸酯、lOOng/祕青霉素、lOOng/M:链霉素(Life Technologies)的RPMI1640(Life Technologies ,Karlsruhe ,Germany)培养基中,把从小鼠C57BL的骨髓中回收的骨髓细胞进 行培养及维持。所述骨髓细胞的培养是在37°C下,5%C0 2的氢解条件下实施。
[0052] 实施例2:从给药EC-18的小鼠中回收骨髓细胞
[0053]针对小鼠C57BL的骨髓细胞的回收按下述方法实施。选择8只25~30g的9周龄的小 鼠C57BL,其中3只用作对照群(Cl~C3)使用,对剩下的5只小鼠(E1~E5),经口腔以50mg/kg 给药EC-18,给药时间为7天。把给药EC-18的小鼠及用作对照群使用的小鼠的胫骨都脱节 后,利用70%的酒精进行消毒。切开胫骨(tibia)和大腿骨(femur)的组织并摘皮之后,取下 筋肉。顺着膝盖弯折的反方向折开并分离胫骨之后,利用70%的酒精进行清洗,然后浸泡到 PBS里。摘除大腿骨和胫骨之间的软骨,并摘除了大腿骨的筋肉。把大腿骨从骨盆中脱节后, 利用70%的酒精进行清洗,然后浸泡到PBS里。为了从大腿骨(femur)中分离骨髓细胞,把培 养液装到1滅注射器之后,切开骨盆侧末端,并把针头扎到膝盖侧的软骨上,使骨髓细胞因 细胞培养液挤出来。把装有骨髓细胞的细胞培养液移到软管并进行离心分离后,扔掉上清 液,回收骨髓细胞,然后聚集到RPMI1640培养基里,为了进行流式细胞分析术而做准备。 [0054] 实施例3:给药EC-18之后,通过FACscan分析红细胞
[0055]在给药EC-18的小鼠C57BL的骨髓细胞中,利用作为红细胞系细胞的标记基因的 TER-119抗体(BD Biosciences_Pharmingen,San ]〇86,04,1134)和?403,确认了红细胞系细 胞的分化及增殖程度。FACS的具体方然如下。为了 FACS分析,在按照实施例2的方法分离的 骨髓细胞中,利用抗(anti)-TER119-FITC抗体进行了 1个小时的培养并染色,并使用 FACscan流式细胞仪(Becton Dickinson,San Jose,CA)进行了分析。其结果确认到,从给药 EC-18的小鼠中分离出来的骨髓细胞的红细胞系细胞(RBC)为41.7 %,这比起没有给药EC-18的小鼠 中分离出来的骨髓细胞的红细胞系细胞为 31.2%有增加 (图 1及图 2)。
[0056] 实施例4:利用FACscan分析骨髓细胞
[0057] 针对从给药EC-18的小鼠C57BL中分离出来的骨髓细胞(EC1~EC5或者EC18)中,对 红细胞系细胞反应TER-119抗体,对B细胞系反应CD19抗体,对T细胞系反应CD4及CD8抗体, 对DC细胞系反应⑶Ilc抗体,对巨噬细胞(Macrophage)细胞系反应⑶llb/F4抗体,对中性白 细胞(Neutrophi 1)细胞系反应⑶I lb/ly抗体,对NK细胞系反应⑶122抗体,并与没有给药 EC-18的小鼠的骨髓细胞(Cl~C3或者con)进行了比较。此时,将骨髓细胞和TER-119、CD19、 0)4、0)8、0)11。、0)1113/^4、0)1113/17、0)122
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