人yeats4基因的用途及其相关药物的利记博彩app
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物技术领域，更具体地涉及人YEATS4基因的用途及其相关药物。
【背景技术】
[0002] RNA干扰（RNA interference, RNAi)即用核苷酸组成的短的双链RNA(dsRNA)进 行转录后基因沉默。它可高效、特异地阻断体内特定基因的表达，导致其降解，从而引起 生物体内特异基因的沉默，使细胞表现出某种基因表型的缺失，是近年来新兴的一种常用 的研究基因功能、寻找疾病治疗方法的实验室技术。研究表明，长度为21-23nt的双链 RNA能够在转录和转录后水平特异性的引起RNAi (Tuschl T，Zamore PD, Sharp PA, Bartel DP. RNAi: double-stranded RNA directs the ATP-dependent cleavage of mRNA at 21to 23nucleotideintervals.Cell 2000 ;101:25-33·)。肿瘤患者虽经化疗、放疗和综合治疗， 但五年生存率仍很低，如能对肿瘤发病和进展有关的基因进行干预，将能为肿瘤的治疗开 辟新途径。近年来，RNAi已成为肿瘤的基因治疗的有效策略。利用RNAi技术可以抑制原 癌基因、突变的抑癌基因、细胞周期相关基因、抗凋亡相关基因等的表达来抑制肿瘤进程 (Uprichard, Susan L. The therapeutic potential of RNA interference. FEBS Letters 2005 ;579:5996-6007.)。
[0003] YEATS4 (增值细胞核抗原结合蛋白，PAF15)是由YEATS4基因编码的蛋白，定位于 人类15号染色体长臂22区31带（15q22. 31)，共含有5个外显子区，编码111个氨基酸， 其中第15位赖氨酸、第24位赖氨酸存在单/双泛素化修饰，而第63位赖氨酸存在单泛素 化修饰（neXtProt/Ensembl/Reactome)。其主要定位于细胞核，在核周区也有少量分布， 且在不同物种间进化高度保守（NCBI Reference Sequence:NP_001025160. 1)。YEATS4 蛋 白只在细胞周期的S期和G2期表达，与G2/M期达到高峰，在有丝分裂结束时表达急剧下 降。该蛋白的表达还具有组织特异性，在肝脏、胰脏和胎盘中高表达。YEATS4在DNA复制 期间起着调控DNA修复的作用，当DNA损伤时YEATS4的第15位和第24位赖氨酸发生单 泛素化，招募DNA聚合酶跨越损伤缺口合成DNA从而达到修复。该蛋白的过表达会促进紫 外线照射导致的DNA损伤的修复并阻止细胞死亡，而其表达抑制则会阻碍DNA复制及细胞 存活[Simpson F, Lammerts van Bueren K, Butterfield N et al. The PCNA-associated factor YEATS4/pl5(PAF)binds the potential tumor suppressor product p33INGlb. Exp Cell Res 2006 ；312:73 - 85. Turchi L,Fareh M, Aberdam E et al. ATF3and pl5PAF are novel gatekeepers of genomic integrity upon UV stress. Cell Death Differ 2009 ； 16:728 - 37. van Bueren KL, Bennetts JS, Fowles LF, Berkman JL, Simpson F, fficking C. Murine embryonic expression of the gene for the UV-responsive protein pl5 (PAF). Gene Expr Patterns 2007;7:47 - 50·]。
[0004] 关于YEATS4在肿瘤相关领域的报道很少。为了研究YEATS4和肿瘤的相关性，本 发明选取结肠癌细胞模型，以RNAi为手段研究YEATS4在结肠癌发生和发展中的作用。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于公开与人YEATS4基因相关的治疗方法及药物，以RNA干扰 (RNAi)为手段研究YEATS4基因在肿瘤细胞的存活和凋亡过程中的作用。
[0006] 本发明第一方面，以RNA干扰为手段，研究了 YEATS4基因在肿瘤发生和发展中的 作用，公开了一种抑制或降低肿瘤细胞生长、增殖、分化和/或存活的方法，该方法包括：向 肿瘤细胞施用一种能够特异性抑制YEATS4基因的转录或翻译，或能够特异性抑制YEATS4 蛋白的表达或活性的分子，以此来抑制肿瘤细胞的生长、增殖、分化和/或存活。
[0007] 所述肿瘤细胞选自其生长与YEATS4蛋白的表达或活性相关的肿瘤细胞。较优的， 所述肿瘤细胞选自结肠癌。
[0008] 所述抑制或降低肿瘤细胞生长、增殖、分化和/或存活的方法中，所述分子的施用 量为足够降低YEATS4基因的转录或翻译，或者足够降低YEATS4蛋白的表达或活性的剂量。 进一步的，所述YEATS4基因的表达至少被降低50 %、80 %、90 %、95 %或99 %。
[0009] 所述分子可选自但不限于：核酸分子、碳水化合物、脂类、小分子化学药、抗体药、 多肽、蛋白或干扰慢病毒。
[0010] 所述核酸包括但不限于：反义寡核苷酸、双链RNA(dsRNA)、核酶、核糖核酸内切酶 ΠΙ制备的小干扰RNA(esiRNA)或者短发夹RNA(shRNA)。
[0011] 所述双链RNA、核酶、esiRNA或者shRNA含有YEATS4基因的启动子序列或YEATS4 基因的彳目息序列。
[0012] 进一步的，所述双链RNA为小干扰RNA(siRNA)。所述小干扰RNA包含第一链和第二 链，所述第一链和所述第二链互补共同形成RNA二聚体，并且所述第一链的序列与YEATS4 基因中15-27个连续的核苷酸序列基本相同。所述小分子干扰RNA能特异性结合靶序列所 编码的mRNA片段，并特异性沉默人YEATS4基因的表达。
[0013] 进一步的，所述小干扰RNA的第一链序列与YEATS4基因中的靶序列基本相同。较 优的，所述YEATS4基因中的靶序列含有如SEQ ID N0:1-5任一所示的序列。
[0014] 所述YEATS4基因中的靶序列即为所述小分子干扰RNA特异性沉默YEATS4基因表 达时，与所述的小分子干扰RNA互补结合的mRNA片段所对应的YEATS4基因中的片段。
[0015] 较佳的，所述YEATS4基因来源于人。
[0016] 本发明第一方面还公开了一种分离的人YEATS4基因在制备或筛选肿瘤治疗药 物，或者在制备肿瘤诊断药物中的用途。
[0017] 进一步的，所述肿瘤选自结肠癌。
[0018] 所述将分离的YEATS4基因用于制备或筛选肿瘤治疗药物包括两方面的内容：其 一，将YEATS4基因作为药物或制剂针对肿瘤细胞的作用靶标应用于制备肿瘤治疗药物或 制剂；其二，将YEATS4基因作为药物或制剂针对肿瘤细胞的作用靶标应用于筛选肿瘤治疗 药物或制剂。
[0019] 所述将YEATS4基因作为药物或制剂针对肿瘤细胞的作用靶标应用于制备肿瘤治 疗药物或制剂具体是指：将YEATS4基因作为RNA干扰作用的靶标，来研制针对肿瘤细胞的 药物或制剂，从而能降低肿瘤细胞内YEATS4基因的表达水平。
[0020] 所述将YEATS4基因作为药物或制剂针对肿瘤细胞的作用靶标应用于筛选肿瘤治 疗药物或制剂具体是指：将YEATS4基因作为作用对象，对药物或制剂进行筛选，以找到可 以抑制或促进人YEATS4基因表达的药物作为肿瘤治疗备选药物。如本发明所述的YEATS4 基因小分子干扰RNA(siRNA)即是以人YEATS4基因为作用对象筛选获得的，可用作具有抑 制肿瘤细胞增殖作用的药物。除此之外，诸如抗体药物，小分子药物等也可将YEATS4基因 及其蛋白作为作用对象。
[0021] 所述将YEATS4基因用于制备肿瘤诊断药物，是指将YEATS4基因表达产物作为一 项肿瘤诊断指标应用于肿瘤诊断药物的制备。
[0022] 通过免疫组织化学的方法检测YEATS4基因在肿瘤组织、正常组织和肿瘤周围正 常组织中的表达水平。研究发现：YEATS4基因在肿瘤组织中的表达量显著高于正常组织和 肿瘤周围正常组织。提示YEATS4基因可能作为一种癌基因，在肿瘤的发生发展中发挥重要 作用；YEATS4基因的表达水平可能成为肿瘤诊断的标志。
[0023] 所述肿瘤治疗药物为能够特异性抑制YEATS4基因的转录或翻译，或能够特异性 抑制YEATS4蛋白的表达或活性的分子，从而降低肿瘤细胞中YEATS4基因的表达水平，达到 抑制肿瘤细胞的增殖、生长、分化和/或存活的目的。
[0024] 所述通过分离的YEATS4基因制备或筛选获得的肿瘤治疗药物或者肿瘤诊断药物 包括但不限于：核酸分子、碳水化合物、脂类、小分子化学药、抗体药、多肽、蛋白或干扰慢病 毒。
[0025] 所述核酸包括但不限于：反义寡核苷酸、双链RNA(dsRNA)、核酶、核糖核酸内切酶 ΠΙ制备的小干扰RNA(esiRNA)或者短发夹RNA(shRNA)。
[0026] 所述肿瘤治疗药物的施用量为足够降低人YEATS4基因的转录或翻译，或者足够 降低人YEATS4蛋白的表达或活性的剂量。以使人YEATS4基因的表达至少被降低50%、 80%、90%、95%或 99%。
[0027] 采用前述肿瘤治疗药物治疗肿瘤的方法，主要是通过降低人YEATS4基因的表达 水平抑制肿瘤细胞的增殖来达到