] 优选地，所述胎牛血清的含量为10-90体积％。
[0027]本发明中，当所述重组人白介素-2、聚乙二醇、1，2_丙三醇和基础培养基等的体积 百分含量之和小于100%时，所述免疫细胞冻存液进一步包含剩余体积的人血白蛋白或丙 二醇。
[0028] 优选地，所述人血白蛋白的的含量为0 · 05-10 · I g/mL，例如可以是0 · 05g/mL、I g/ mL、1·5g/mL、2g/mL、2·5g/mL、3g/mL、3·5g/mL、5g/mL、7g/mL、8g/mL、8g/mL、10·Ig/mL 〇
[0029] 本发明采用在免疫细胞冻存液中添加人血白蛋白为细胞冻存稳定剂使用，采用药 用人血白蛋白使用量低，可进一步提高采用本方法冻存细胞存储稳定性，避免由于细胞存 储供者血质问题导致过程储存活性不稳定或细胞复苏率下降。
[0030] 优选地，所述丙三醇的含量为10-20体积％。
[0031]第二方面，本发明还提供了如本发明第一方面所述的免疫细胞冻存液在免疫细胞 冻存复苏中的应用。
[0032] 优选地，所述免疫细胞为T细胞、自然杀伤细胞或NTK细胞中的任意一种。
[0033] 本发明还提供了一种组合物在免疫细胞冻存液中的应用，所述组合物包括以下组 分:重组人白介素-2、聚乙二醇、1，2-丙二醇和基础培养基。
[0034] 本发明采用将重组人白介素-2(IL_2)添加到免疫细胞冻存液中，可大幅度提高所 述免疫细胞的活性，使其具有高活性，从而使免疫细胞很好地保持了细胞复苏后的生理功 能和生物学特性。
[0035] 本发明在所述组合物中还可以添加人血白蛋白，其有利于在冷冻复苏过程中调节 渗透压，对细胞保护作用好，并且冻存液成本低，提高细胞冻存稳定性。
[0036]本发明中所述组合物中含有的重组人白介素-2和人血白蛋白具有显著的协同作 用，可以显著提高免疫细胞的活性和复苏后的存活率。
[0037] 本发明中，所述免疫细胞冻存液包括:重组人白介素-250-200U/mL;聚乙二醇0.1-0.4g/mL; 1，2-丙二醇0.2-0.4g/mL;基础培养基或注射用氯化钠90-99体积％，总量为 100%〇
[0038]本发明所述免疫细胞冻存液中的重组人白介素-2的含量为50-200U/mL，例如可以 是50U/mL、60U/mL、80U/mL、IOOU/mL、120U/mL、150U/mL、1600U/mL、180U/mL、200U/mL。
[0039]本发明所述免疫细胞冻存液中的聚乙二醇含量为0.1-0.4g/mL，例如可以是O.lg/ mL、0·12g/mL、0·15g/mL、0·2g/mL、0·22g/mL、0·25g/mL、0·3g/mL、0·32g/mL、0·35g/mL、 0·38g/mL、0·4g/mL。
[0040]本发明所述免疫细胞冻存液中的I，2-丙二醇含量为0.2-0.4g/mL，例如可以是 0·2g/mL、0·22g/mL、0·25g/mL、0·3g/mL、0·32g/mL、0·35g/mL、0·38g/mL、0·4g/mL。
[0041 ]本发明所述免疫细胞冻存液中的基础培养基或注射用氯化钠的体积百分含量为 90%、90·5%、91%、91·5%、92%、92·5%、93%、93·5%、94%、94·5%、95%、95·5%、96%、 96.5 %、97 %、97.5 %、98 %、98.5 %、99 %。如果在免疫细胞冻存液中还含有除重组人白介 素-2、聚乙二醇、1，2_丙二醇组分以外的其它组分时，所述基础培养基的含量会进行适当的 下调，比如降低为80 %-95 %，例如所述基础培养的含量还可以是80 %、80.5 %、81 %、 81.5%、82%、82.5%、83%、83.5%、84%、84.5%、85%、85.5%、86%、86.5%、87%、 87.5 %、88 %、88.5 %、89 %、89.5 %，以满足所述免疫细胞冻存液中各组分含量之和为 100%〇
[0042]本发明所述免疫细胞冻存液中的重组人白介素_2、聚乙二醇、1，2_丙二醇，以及基 础培养基或注射用氯化钠可以采用上述各组分所选择的含量进行任意配合，各组分的体积 百分含量之和为100%。
[0043] 优选地，所述免疫细胞冻存液包括：重组人白介素-280-180U/mL;聚乙二醇0.2_ 0 · 4g/mL; 1，2-丙二醇0 · 25-0 · 4g/mL;基础培养基95-99体积 ％。
[0044]本发明所述免疫细胞冻存液中，所述基础培养基为RPMI-1640培养基或淋巴细胞 培养基。
[0045] 优选地，所述淋巴细胞培养基为GT-T551培养基或GT-T561培养基。
[0046]本发明所述免疫细胞冻存液中不含有动物血清，因此不会引入外源蛋白，降低了 动物病原污染的可能性，也不会对人体过继免疫治疗产生影响。
[0047]本发明中所述免疫细胞冻存液还含有血清替代物，其适用于采用淋巴细胞培养基 作为基础培养基的情况。例如，所述免疫细胞冻存液还含有Ultroser G、自体血浆或胎牛血 清中的任意一种。
[0048] 优选地，所述Ultroser G的含量为0 · 2-1 · 8g/mL，例如可以是0 · 2g/mL、0 · 5g/mL、 0·6g/mL、0·8g/mL、Ig/mL、I·2g/mL、I·3g/mL、I·5g/mL、I·6g/mL、I·8g/mL 〇
[0049] 优选地，所述自体血浆的含量为10-90体积％。
[0050] 优选地，所述胎牛血清的含量为10-90体积％。
[00511本发明中，当所述重组人白介素_2、聚乙二醇、1，2-丙三醇和基础培养基等的体积 百分含量之和小于100%时，所述免疫细胞冻存液进一步包含剩余体积的人血白蛋白。
[0052] 优选地，所述人血白蛋白的的含量为0.05-1. Og/mL，例如可以是0.05g/mL、0 . Ig/ mL、0·15g/mL、0·2g/mL、0·25g/mL、0·3g/mL、0·35g/mL、0·5g/mL、0·7g/mL、0·8g/mL、1·Og/ mL〇
[0053] 在第三方面，本发明还提供了一种免疫细胞的冻存方法，其包括：
[0054] (1)将免疫细胞与本发明第一方面所述的免疫细胞冻存液混合;和
[0055] (2)进行程序降温至-80°C，然后转移至液氮中冷冻保存。
[0056] 本发明中所述免疫细胞优选的冻存方法包括以下步骤：
[0057] (1)冻存液的制备:制备本发明第一方面所述的免疫细胞冻存液；
[0058] (2)细胞悬液的制备:将供体资源离心后，分离去除上层血浆，并将下层浓血离心， 分离获得免疫细胞，将所述免疫细胞与所述免疫细胞冻存液混合得到细胞悬液，置于无菌 的冻存管中；
[0059] (3)冷冻:将所述冻存管进行程序降温至_80°C，然后转移至液氮中冷冻保存；
[0060] (4)细胞复苏:取出冻存管快速置于37-40°C水浴1-3分钟，振荡直至细胞悬液完全 融化，经离心，以淋巴细胞无血清培养基洗涤2-3次，即可。
[0061] 本发明所述的冻存方法中，步骤(2)所述供体资源为外周血或脐带血。
[0062] 本发明所述的冻存方法中，通过采用步骤(2)，可以有效提高免疫细胞的纯度，从 而有利于后续的复苏以及细胞存活率的提高。
[0063]外周血和脐带血中均富含各种矿物质离子和蛋白因子，可提供细胞代谢所述物质 并维持细胞所述的渗透压，是天然的营养体系和缓冲体系。采用来自外周血和脐带血的免 疫细胞，并经特殊的提取过程，可以增加免疫细胞的纯度，并避免了动物源病原微生物的交 叉感染风险，使免疫细胞的冻存更加安全有效，便于冻存细胞后续的临床应用。
[0064] 优选地，所述离心的转