5克/升、丝氨酸浓度为0. 13~0. 25克/升、精氨酸浓度为0. 1~0. 2克 /升、NH4C1浓度为0. 65~1. 6克/升、1(2即04浓度为1~3克/升、KH 2Ρ04浓度为0. 2~ 〇· 5克/升、MgSO4 7Η20浓度为0· 1~0· 3克/升、CaCl2 2Η20浓度为0· 1~0· 2克/升、 FeSO4 7Η20 浓度为 0· 005 ~0· 011 克 / 升、NaCl 浓度为 0· 05 ~0· 15 克 / 升、Na2MoO4 ·2Η20 浓度为〇. 01~〇. 03克/升以及生物素浓度为0. 0005~0. 002克/升，所述的水溶液pH 为 6. 8 ~7. 5。
[0031] 本实施方式采用甘油、甘露醇、葡萄糖、鼠李糖、果糖、α-酮戊二酸等物质组成混 合碳源，来替代常规使用的单一碳源，精确控制碳源、氮源和矿质营养元素的平衡，并用优 化的发酵工艺控制花生根瘤菌的生产过程，制备得到的花生液体根瘤菌剂在20°C恒温柜中 保存12个月活菌数仍然达每毫升100亿以上，中国农业部微生物肥料及食用菌菌种质量检 测中心对本发明的菌剂抽样检测的结果为110亿/毫升，杂菌数为0。目前我国的农业微 生物菌剂（包括根瘤菌剂）的国家标准为2亿/克活菌数，相比提高了 50倍。国外液体花 生根瘤菌剂最好产品的实测活菌数为50亿左右，保质期为12个月，保证最低活菌数不低于 20亿/毫升。本广品的活菌数尚于国外最好广品。
[0032]
【具体实施方式】二：本实施方式与【具体实施方式】一不同的是：所述的丙三醇浓度为 1. 5~2. 5克/升、甘露醇浓度为1. 5~2. 5克/升、葡萄糖浓度为1. 5~2. 5克/升、鼠李 糖浓度为1. 5~2. 5克/升、果糖浓度为1. 5~2. 5克/升、α -酮戊二酸浓度为〇. 75~ 1. 25克/升、酵母粉浓度为3. 0~4. 0克/升、丝氨酸浓度为0. 15~0. 20克/升、精氨酸 浓度为〇. 125~0. 175克/升、NH4Cl浓度为0. 8~1. 25克/升、K2HPO4浓度为I. 1~1. 6 克/升、KH2PO4浓度为0· 25~0· 4克/升、MgSO 4 7Η20浓度为0· 15~0· 25克/升、CaCl22Η20浓度为0· 11~0· 15克/升、FeSO4 7Η20浓度为0· 006~0· 009克/升、NaCl浓度为 0. 08~0. 12克/升、Na2MoO4 ·2Η20浓度为0. 015~0. 025克/升和生物素浓度为0. 0008~ 0.0012克/升。其它与【具体实施方式】一相同。
【具体实施方式】 [0033] 三：本实施方式与一或二不同的是：所述的丙三醇浓 度为2克/升、甘露醇浓度为2. 0克/升、葡萄糖浓度为2. 0克/升、鼠李糖浓度为2. 0克/ 升、果糖浓度为2. 0克/升、α -酮戊二酸浓度为1. 〇克/升、酵母粉浓度为3. 5克/升、丝 氨酸浓度为〇. 18克/升、精氨酸浓度为0. 15克/升、NH4Cl浓度为I. 1克/升、K2HPO4浓度 为1. 2克/升、KH2PO4浓度为0. 34克/升、MgSO 4 7Η20浓度为0. 2克/升、CaCl2 2Η20浓度 为 〇· 13 克 / 升、FeSO4 7Η20 浓度为 0· 0083 克 / 升、NaCl 浓度为 0· 1 克 / 升、Na2MoO4 · 2Η20 浓度为〇. 02克/升和生物素浓度为0. 001克/升。其它与一相同。
[0034]
【具体实施方式】四：本实施方式与【具体实施方式】一至三之一不同的是：所述的水溶 液pH为7. 0~7. 2。其它与【具体实施方式】一至三之一相同。
【具体实施方式】 [0035] 五：本实施方式与一至四之一不同的是：所述的水溶 液pH为7.1。其它与一至四之一相同。
【具体实施方式】 [0036] 六：一种采用上述花生根瘤菌制备花生液体根瘤菌剂的方法，其是 按以下步骤进行的：
[0037] S 1、按照丙三醇浓度为1~3克/升、甘露醇浓度为1~3克/升、葡萄糖浓度为 1~3克/升、鼠李糖浓度为1~3克/升、果糖浓度为1~3克/升、α -酮戊二酸浓度为 0. 5~1. 5克/升、酵母粉浓度为2. 5~4. 5克/升、丝氨酸浓度为0. 13~0. 25克/升、精 氨酸浓度为〇. 1~〇. 2克/升、NH4C1浓度为0. 65~1. 6克/升、K2HPO4浓度为1~3克/ 升、KH2PO4浓度为0. 2~0. 5克/升、MgSO4 7Η20浓度为0. 1~0. 3克/升、CaCl2 2Η20浓度 为0· 1~0· 2克/升、FeSO4 7Η20浓度为0· 005~0· 011克/升、NaCl浓度为0· 05~0· 15 克/升、Na2MoO4 · 2Η20浓度为0. 01~0. 03克/升以及生物素浓度为0. 0005~0. 002克/ 升，称取上述物质，并依次加入到纯水中混合均匀，调节pH至6. 8~7. 5,得到花生液体根瘤 菌培养基；
[0038] S2、将Sl得到的花生液体根瘤菌培养基加入到发酵罐中，121°C高压蒸汽灭菌 20min，待培养基温度降至30°C时，将花生根瘤菌按体积百分含量5 %~10 %的接种量接种 至灭菌的花生液体根瘤菌培养基中，在温度为25~35°C、搅拌速度为50~150r/min、空气 流量为〇· 3~0· 6v/v/m、罐压为0· 05~0· 2kPa、溶氧为60 %~80 %、发酵液pH为6. 5~ 7. 5的条件下，发酵72~144h，即得花生液体根瘤菌剂。其中，v/v/m为发酵行业专有的 表示空气流量的单位，0. 3~0. 6v/v/m表示每分钟进入发酵罐的空气体积是培养基体积的 0· 3 ~0· 6 倍。
[0039] 本实施例通过搅拌速度的变化来达到控制溶氧的目的，当溶氧低于60%时控制系 统自动增加转速，当溶氧高于80%时控制系统自动降低转速。
[0040] 本实施方式采用甘油、甘露醇、葡萄糖、鼠李糖、果糖、α-酮戊二酸等物质组成混 合碳源，来替代常规使用的单一碳源，精确控制碳源、氮源和矿质营养元素的平衡，并用优 化的发酵工艺控制花生根瘤菌的生产过程，制备得到的花生液体根瘤菌剂在20°C恒温柜中 保存12个月活菌数仍然达每毫升100亿以上，中国农业部微生物肥料及食用菌菌种质量检 测中心对本发明的菌剂抽样检测的结果为110亿/毫升，杂菌数为0。目前我国的农业微 生物菌剂（包括根瘤菌剂）的国家标准为2亿/克活菌数，相比提高了 50倍。国外液体花 生根瘤菌剂最好产品的实测活菌数为50亿左右，保质期为12个月，保证最低活菌数不低于 20亿/毫升。本广品的活菌数尚于国外最好广品。
[0041]
【具体实施方式】七：本实施方式与【具体实施方式】六不同的是：Sl中，丙三醇浓度为 1. 5~2. 5克/升、甘露醇浓度为1. 5~2. 5克/升、葡萄糖浓度为1. 5~2. 5克/升、鼠李 糖浓度为1. 5~2. 5克/升、果糖浓度为1. 5~2. 5克/升、α -酮戊二酸浓度为〇. 75~ 1. 25克/升、酵母粉浓度为3. 0~4. 0克/升、丝氨酸浓度为0. 15~0. 20克/升、精氨酸 浓度为〇. 125~0. 175克/升、NH4Cl浓度为0. 8~1. 25克/升、K2HPO4浓度为I. 1~1. 6 克/升、KH2PO4浓度为0· 25~0· 4克/升、MgSO 4 7Η20浓度为0· 15~0· 25克/升、CaCl22Η20浓度为0· 11~0· 15克/升、FeSO4 7Η20浓度为0· 006~0· 009克/升、NaCl浓度为 0. 08~0. 12克/升、Na2MoO4 ·2Η20浓度为0. 015~0. 025克/升和生物素浓度为0. 0008~ 0. 0012克/升，称取上述物质。其它与【具体实施方式】六相同。
[0042]
【具体实施方式】八：本实施方式与【具体实施方式】六或七不同的是：S1中所述的按丙 三醇浓度为2克/升、甘露醇浓度为2. 0克/升、葡萄糖浓度为2. 0克/升、鼠李糖浓度为 2. 0克/升、果糖浓度为2. 0克/升、α -酮戊二酸浓度为1. 〇克/升、酵母粉浓度为3. 5克/ 升、丝氨酸浓度为0. 18克/升、精氨酸浓度为0. 15克/升、NH4Cl浓度为I. 1克/升、K2HPO4浓度为1. 2克/升、KH2PO4浓度为0. 34克/升、MgSO JH2O浓度为0. 2克/升、CaClJH2O浓 度为 〇. 13 克 / 升、FeSO4 7Η20 浓度为 0. 0083 克 / 升、NaCl 浓度为 0. 1 克 / 升、Na2MoO4 ·2Η20 浓度为〇. 02克/升以及生物素浓度为0. 001克/升。其它与【具体实施方式】六或七相同。
【具体实施方式】 [0043] 九：本实施方式与六至八之一不同的是：S2中所述的 花生液体根瘤菌培养基占发酵罐总体积的60 %~80 %。其它与六至八之一 相同。
【具体实施方式】 [0044] 十：本实施方式与六至九之一不同的是：S2中所述的 花生液体根瘤菌培养基占发酵罐总体积的70%。其它与六至九之一相同。
【具体实施方式】 [0045] ^^一 ：本实施方式与六至十之一不同的是：S2中所述 的在温度为29~31°C、搅拌速度为75~125r/min、空气流量为0. 35~0. 55v/v/m、罐压为 0.075~0. 18kPa、溶氧为65~75 %、发酵液pH为6. 8~7. 3的条件下，发酵72~144h。 其它与六至十之一相同。
[0046]
【具体实施方式】十二：本实施方式与【具体实施方式】六至^^一之一不同的是：S2中所 述的在温度为30°C、搅拌速度为100r/min、空气流量为0. 45v/v/m、罐压为0. lkPa、溶氧为 70%、发酵液pH为7. 2的条件下，发酵72~144h。其它与【具体实施方式】六至^ 之一相 同。
【具体实施方式】 [0047] 十三：本实施方式与六至十二之一不同的是：S2中所 述的发酵80~130h。其它与六至十二之一相同。
【具体实施方式】 [0048] 十四：本实施方式与六至十三之一不同的是：S2中所 述的发酵90~120h。其它与六至十三之一相同。
【具体实施方式】 [0049] 十五：本实施方式与六至十四之一不同的是：步骤二 中所述的发酵l〇〇h。其它与六至十四之一相同。
【具体实施方式】 [0050] 十六：本实施方式与六至十五之一不同的是：Sl中所 述的调节pH至7. 0~7. 3。其它与六至十五之一相同。
【具体实施方式】 [0051] 十七：本实施方式与六至十六之一不同的是：Sl中所 述的调节pH至7. 2。其它与六至十六之一相同。
【具体实施方式】 [0052] 十八：本实施方式与六至十七之一不同的是：Sl中所 述的调节pH至7. 2。其它与六至十七之一相同。
【具体实施方式】 [0053] 十九：本实施方式与六至十八之一不同的是：待培养 基温度降至30°C。其它与六至十八之