103] 4. 8竹节参皂苷V、竹节参总皂苷、竹节参水提液和竹节参醇提液各低剂量组溶液 的配制
[0104] 竹节参皂苷v低剂量溶液的配制=给药剂量+给药体积=0.0126g/kg+10mL/ kg = 0? 00126g/mL。
[0105] 精密称取0. 126克竹节参皂苷v粉末溶解在100毫升的0. 5%的CMC-Na溶液中， 即得浓度为1.26mg/ml的竹节参皂苷v溶液，给药剂量为0.〇126g/kg。
[0106] 竹节参总阜苷低剂量组浓度=给药剂量+给药体积=0.025g/kg+10mL/kg = 0?0025g/mL。
[0107] 取竹节参总皂苷粉末0. 25g，加0. 5%的CMC-Na溶液溶解，定容至100mL即得到浓 度为0. 0025g/mL的竹节参总皂苷溶液。
[0108] 竹节参水提液低剂量组浓度=给药剂量+给药体积=0.18g/kg+10mL/kg = 0.018g/mL。
[0109] 竹节参水提液低剂量溶液的配制：取竹节参粗颗粒1. 8g别加10倍量的水直火煎 煮3次，煎煮时间分别为2小时、1. 5小时和1小时。过滤，合并3次提取液，水浴浓缩至药 材：药液为0. 18:10水溶液（0. 018药/ml)。
[0110] 竹节参醇提高剂量浓度=给药剂量+给药体积=0? 18g/kg+10mL/kg = 0? 05g/ mL〇
[0111] 竹节参醇提液中剂量溶液的配制：取竹节参粗颗粒0. 18g，按"竹节参总皂苷的制 备"方法提取和回收乙醇，配制成药材：药液为0. 18 :10的水溶液（0. 018g生药/ml)。
[0112]5分组与给药
[0113] 雄性大鼠136机分为17,每组8只。分别为空白对照组，模型对照组，二妙丸阳性对 照组，痛风定阳性对照组，竹节参水提液高、中、低剂量组，竹节参醇提液高、中、低剂量组， 竹节参总皂苷高、中、低剂量组，竹节参皂苷V高、中、低剂量组。每组大鼠分别灌胃给予预 先配置好的药液10mL/kg，空白对照组和模型对照组给予等体积的纯净水。每天给药1次， 连续给药4d。
[0114] 二妙丸阳性对照组（1.25g/kg)，痛风定阳性对照组（0.5g/kg)，阿司匹林阳性对 照组（0. lg/kg)，竹节参水提液高（1. 5g/kg)、中（0. 5g/kg)、低剂量组（0. 18g/kg)，竹节参 醇提液高（1. 5g/kg)、中（0. 5g/kg)、低剂量组（0. 18g/kg)，竹节参总苷高（0. 225g/kg)、中 (0? 075g/kg)、低剂量组（0? 025g/kg)，竹节参皂苷 V 高（0? 113g/kg)、中（0? 0377g/kg)、低剂 量组（0? 0126g/kg)。
[0115] 6大鼠足跖容积的测定
[0116] 末次给药前用标记笔在大鼠右后足趾踝关节上方同一部位划一清晰标记线，测定 每只大鼠右后肢正常足趾容积。
[0117] 7造模
[0118] 末次给药后lh，采用75%的乙醇擦洗大鼠右后足进行消毒，而后于右后足跖腱膜 下注射浓度为〇. lg/mL的尿酸钠生理盐水混悬液（空白组注射等体积生理盐水）0. lmL。并 于注射后l、2、3、4、6、8h测大鼠右后足跖容积，计算肿胀度。
[0119] 8实验结果
[0120] 根据测定的大鼠足趾容积，按照如下公式计算大鼠足跖肿胀率。
[0121] 大鼠足跖肿胀率=(造模后大鼠右后足跖容积一造模前大鼠右后足跖容积造 丰旲如大鼠右后足妬容积。
[0122] 表1足底注射尿酸钠后大鼠足妬肿胀率（n = 8,a)
[0123]
[0125] 注：①与空白组比较，#p〈0. 05, ##p〈0. 01 ;与模型组比较，*p〈0. 05, #p〈0. 01。
[0126] ②水高、水中、水低分别表示竹节参水提液高、中、低剂量组；醇高、醇中、醇低分别 表示竹节参醇提液高、中、低剂量组；Z高、Z中、Z低分别表示竹节参总皂苷高、中、低剂量 组；V高、V中、V低分别表示竹节参皂苷V高、中、低剂量组；二妙丸、痛风定、阿司匹林分别 为中药和西药的阳性对照药。
[0127] 由表1可知，造模lh后模型对照组大鼠足跖肿胀率显著性大于空白对照组，说明 造模成功，该模型可以用于验证药物对尿酸钠诱导的足跖肿胀的抑制作用。
[0128] 二妙丸组大鼠足跖肿胀率在造模后2_8h内持续低于模型对照组，但两者之间没 有显著性差异；痛风定组大鼠足跖肿胀率在造模后2-8h内持续低于模型对照组，但两者之 间没有显著性差异；阿司匹林阳性对照组（0. lg/kg)实验大鼠足跖肿胀率在造模后l-8h内 持续低于模型对照组，且在造模后2h至8h时二者之间有显著性差异（p〈0. 05)，在造模后 3h、4h时有极显著性差异（p〈0. 01)。
[0129] 竹节参水提液高、中剂量组，竹节参醇提液高、中剂量组，竹节参总皂苷高、中剂量 组，竹节参皂苷V高、中剂量组，大鼠足跖肿胀率在造模后l_8h内持续低于模型对照组，且 在造模后2h至8h时二者之间有显著性差异（p〈0. 05)，在造模后3h、4h时有极显著性差异 (p〈0. 01);竹节参水提液低剂量组，竹节参醇提液低剂量组，竹节参总皂苷低剂量组，竹节 参皂苷V低剂量组，大鼠足跖肿胀率在造模后l-8h内持续低于模型对照组，且在造模后2h 至8h时二者之间有显著性差异（p〈0. 05)。
[0130] 结论：竹节参水提液、竹节参醇提液、竹节参总皂苷、竹节参皂苷V对尿酸钠诱导 的大鼠模型足跖胀肿具有显著性或极显著性抑制作用。阳性对照药痛风定胶囊和二妙丸仅 有抑制炎症的趋势，但这种趋势没有统计学的显著意义。阿司匹林阳性对照对尿酸钠诱导 的大鼠模型足跖胀肿具有显著性或极显著性抑制作用。竹节参水提液、竹节参醇提液、竹节 参总皂苷、竹节参皂苷V对尿酸钠诱导的大鼠模型足跖胀肿抑制作用明显优于阳性对照药 痛风定胶囊和二妙丸。
[0131] 竹节参水提液、竹节参醇提液、竹节参总皂苷、竹节参皂苷V抗尿酸性关节炎模型 大鼠的治疗作用与阳性对照药阿司匹林相当。且节参水提液、竹节参醇提液、竹节参总皂 苷、竹节参皂苷V抗尿酸性关节炎模型大鼠的治疗作用具有一定量效关系。竹节参总皂苷 是竹节参水提液、竹节参醇提液抗尿酸性关节炎模型大鼠的治疗作用的活性部位；竹节参 皂苷V是竹节参总皂苷抗尿酸性关节炎模型大鼠的治疗作用的活性成分。
【主权项】
1. 竹节参提取物在制备抗尿酸性关节炎药物中的应用。2. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于所述的竹节参提取物的活性部位为竹节参 总皂苷。3. 根据权利要求2所述的应用，其特征在于所述竹节参总皂苷的活性部位为竹节参皂 苷V。4. 根据权利要求1-3中任意一项所述的应用，其特征在于所述的竹节参提取物为竹节 参水提液、竹节参醇提液、竹节参总皂苷和竹节参皂苷V中的至少一种。5. 根据权利要求2、3或4所述的应用，其特征在于所述竹节参总皂苷中竹节参皂苷V 的含量彡50%。6. 根据权利要求4所述的应用，其特征在于所述竹节参皂苷V的纯度多90 %。7. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于所述的抗尿酸性关节炎药物最终实施形式 包括竹节参水提液、竹节参醇提液、竹节参总皂苷和竹节参皂苷V中的至少一种与药学上 可接受的载体或者常规食用辅料。
【专利摘要】本发明公开竹节参提取物在制备抗尿酸性关节炎药物中的应用。所述的竹节参提取物为竹节参水提液、竹节参醇提液、竹节参总皂苷和竹节参皂苷Ⅴ中的至少一种。本发明竹节参皂苷Ⅴ及其竹节参总皂苷提取物是从天然的中药竹节参中提取得到的,竹节参是常用的中草药,有长期的中医用药经验，该药使用安全性高，无明显毒性作用记载。竹节参提取物尤其是竹节参皂苷Ⅴ及其竹节参总皂苷具有抗尿性关节炎的极显著性作用。因此，竹节参提取物尤其是竹节参皂苷Ⅴ及其竹节参总皂苷有开发成抗痛风药物的前景。
【IPC分类】A61K31/704, A61K36/258, A61P19/06, A61P19/02
【公开号】CN105168284
【申请号】
【发明人】杨小林
【申请人】杨小林
【公开日】2015年12月23日
【申请日】2015年9月9日