竹节参皂苷Ⅴ及其竹节参总皂苷在制备抗尿酸性关节炎药物中的应用_3

文档序号:8950875阅读:来源:国知局
575〇〇34. 5 = 0? 495mg/ml。计算竹节参总皂苷样品中Ro的百分含量,为〇竹节参总皂苷样品XV竹节参总鋪样品/W竹节参总鋪样品=0? 495mg/mlX25ml/23. 71mg= 52. 2%。
[0056] 计算得到的竹节参阜甘v样品中R〇的浓度,〇竹节参桌苷¥样品=0对照品XS竹节参桌苷¥样品 /S对照品=1. 45X175871L 5/575〇〇34. 5 = 0? 4435mg/ml。计算竹节参皂苷v样品中R〇的 百分含量,为C竹节参皂苷V样品XV竹节参阜苷¥样品/W竹节参阜苷¥样品=0? 4435mg/mlX25ml/l2. 00mg= 92. 4%〇
[0057] 实施例3 :竹节参皂苷V和竹节参总皂苷抗尿酸性关节炎的实验研究
[0058] 1实验题目
[0059] 研究竹节参皂苷V和竹节参总皂苷是否具有抗痛风性关节炎的作用。
[0060] 2研究目的
[0061] 验证竹节参皂苷V和竹节参总皂苷对尿酸钠诱导的大鼠足跖胀肿模型的预防或 治疗作用。
[0062] 3实验材料
[0063] 3. 1 试药
[0064] 竹节参皂苷V(实施例1制备,白色粉末、气微;易溶解于水)和竹节参总皂苷(实 施例1制备,棕黄色粉末、气微;易溶解于水);阿司匹林肠溶片(南京白敬宇制药有限责 任公司提供,批号:080535);痛风定胶囊(成都中汇制药有限公司,批号:110505);二妙丸 (北京同仁堂制药有限公司,批号=1083052);尿酸(sigma-Aldrich Co,批号:101073319); 氢氧化钠(汕头市西陇化工厂,批号:〇601051);氯化钠(南京化学试剂有限公司,批号: 080660378);纯净水(杭州哇哈哈集团有限公司,批号:20110425);羧甲基纤维素钠(天津 市科密欧化学试剂研发中心,批号=20070423)。
[0065] 3. 2 动物
[0066] SD大鼠,清洁级,雄性,220_260g,56只,由中国人民解放军南京军区医学动物实 验中心提供,许可证号:SCXK (军)2012-012。
[0067] 3. 3 材料
[0068] 0. 22 ym微孔滤膜,lml、2ml、5ml -次性注射器;大鼠足肿胀测定装置;电炉;高压 灭菌锅等。
[0069] 4试剂与药液的制备
[0070] 4. 1造模剂制备
[0071] 取4g尿酸置于800mL沸水中,加入24ml lmol/L的氢氧化钠溶液,轻轻搅拌至尿 酸完全溶解,加lmol/L的氢氧化钠溶液调节pH至7. 2,室温下轻轻搅拌冷却,4°C保存24h, 过滤得到沉淀物,将沉淀置于75°C干燥12h即得到尿酸钠。取lg尿酸钠置于130°C高温灭 菌30min,用前加无菌生理盐水定容至10mL,通过0. 22 ym微孔滤膜除菌,即得到0. lg/mL 的尿酸钠混悬液。
[0072] 4. 20?5 % 的 CMC-Na 溶液的配制
[0073] 取3. 5g CMC-Na粉末,加入少量水使其溶胀,再加沸水至200mL,持续加热至 CMC-Na完全溶解,即得到0. 5%的CMC-Na溶液。
[0074] 4. 3二妙丸混悬液的配制
[0075] 二妙丸的给药剂量=二妙丸的人用剂量+60kgX6. 25 = 12g + 60kgX6. 25 = 1. 25g/kg,本次试验二妙丸的给药剂量确定为1. 2g/kg。
[0076] 二妙丸的给药浓度=二妙丸的给药剂量+二妙丸的给药体积=1. 2g/kg+10mL/ kg = 0? 12g/mL〇
[0077] 取二妙丸12g,加0. 5 %的CMC-Na溶液研磨,定容至100mL即得0. 12g/mL的二妙 丸混悬液。
[0078] 4. 4痛风定混悬液的配制
[0079] 痛风定的给药剂量=痛风定的人用剂量+60kgX6. 25 = 4. 8g + 60kgX6. 25 = 0. 5g/kg,本次试验痛风定的给药剂量确定为0. 5g/kg。
[0080] 痛风定的给药浓度=痛风定的给药剂量+痛风定的给药体积=0. 5g/kg+ 10mL/ kg = 0. 05g/mL〇
[0081] 取痛风定胶囊内容物5g,加0. 5%的CMC-Na溶液研磨,定容至lOOmL即得0. 05g/ mL的痛风定混悬液。
[0082] 4. 5阳性阿司匹林对照组药液的配制
[0083] 阿司匹林溶液的配制=给药剂量+给药体积=0. lg/kg+10mL/kg = 0.0 lg/mL。
[0084] 精密称取1. Og阿司匹林粉末,溶解在100毫升的0. 5%的CMC-Na溶液中,即得浓 度为0. 01g/m L的阿司匹林溶液,给药剂量为0. lg/kg。
[0085] 4. 6竹节参皂苷V、竹节参总皂苷、竹节参水提液和竹节参醇提液各高剂量组溶液 的配制
[0086] 竹节参阜苷v高剂量溶液的配制=给药剂量+给药体积=0. 113g/kg+10mL/kg =0?0113g/mL。
[0087] 精密称取1. 13克竹节参皂苷v粉末溶解在100毫升的0. 5%的CMC-Na溶液中,即 得浓度为11. 3mg/ml的竹节参皂苷v溶液,给药剂量为0. 113g/kg。
[0088] 竹节参总皂苷高剂量组浓度=给药剂量+给药体积=0? 225g/kg+10mL/kg = 0?0225g/mL〇
[0089] 取竹节参总皂苷粉末2. 25g,加0. 5 %的CMC-Na溶液溶解,定容至100mL即得到浓 度为0. 0225g/mL的竹节参总皂苷溶液。
[0090] 竹节参水提液高剂量组浓度=给药剂量+给药体积=1. 5g/kg+10mL/kg = 0?15g/mL〇
[0091 ] 竹节参水提液高剂量溶液的配制:取竹节参粗颗粒200g,分别加10倍量的水直火 煎煮3次,煎煮时间分别为2小时、1. 5小时和1小时。过滤,合并3次提取液,水浴浓缩至 药材:药液为1. 5 :10的水溶液(0. 15g生药/ml)。
[0092] 竹节参醇提液高剂量组浓度=给药剂量+给药体积=1. 5g/kg+10mL/kg = 0?15g/mL〇
[0093] 竹节参醇提液高剂量溶液的配制:取竹节参粗颗粒200g,按"竹节参总皂苷的制 备"方法提取和回收乙醇,配制成药材:药液为1. 5 :10的水溶液(0. 15g生药/ml)。
[0094] 4. 7竹节参皂苷V、竹节参总皂苷、竹节参水提液和竹节参醇提液各中剂量组溶液 的配制
[0095] 竹节参皂苷v中剂量溶液的配制=给药剂量+给药体积=〇? 〇377g/kg+ 10mL/ kg = 0? 00377g/mL〇
[0096] 精密称取0. 377克竹节参皂苷v粉末溶解在100毫升的0. 5 %的CMC-Na溶液中, 即得浓度为3. 77mg/ml的竹节参皂苷v溶液,给药剂量为0. 〇377g/kg。
[0097] 竹节参总阜苷中剂量组浓度=给药剂量+给药体积=0.075g/kg+10mL/kg = 0?0075g/mL。
[0098] 取竹节参总皂苷粉末0. 75g,加0. 5 %的CMC-Na溶液溶解,定容至100mL即得到浓 度为0. 0075g/mL的竹节参总皂苷溶液。
[0099] 竹节参水提液中剂量组浓度=给药剂量+给药体积=0. 5g/kg+10mL/kg = 0?05g/mL〇
[0100] 竹节参水提液中剂量溶液的配制:取竹节参粗颗粒200g,分别加10倍量的水直火 煎煮3次,煎煮时间分别为2小时、1. 5小时和1小时。过滤,合并3次提取液,水浴浓缩至 药材:药液为0. 5 :10的水溶液(0. 05g生药/ml)。
[0101] 竹节参醇提高剂量浓度=给药剂量+给药体积=0. 5g/kg+10mL/kg = 0. 05g/ mL〇
[0102] 竹节参醇提液中剂量溶液的配制:取竹节参粗颗粒200g,按"竹节参总皂苷的制 备"方法提取和回收乙醇,配制成药材:药液为0. 5 :10的水溶液(0. 05g生药/ml)。
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