0177] 实施例7红酵母对添加剂保存活性的影响
[0178] 以实施例2中所述的制备方法获得的添加剂为样品1，将实施例2中的红酵母替换 为市售的饲料酵母，比较两种样品的保存活性。在室温下保存上述样品6个月，之后重复实 施例8的实验，通过料肉比的变化表征添加剂活性的变化，结果表明：样品1的残余活性在 85%以上，样品2的残余活性保持在60%左右。
[0179] 实施例8红酵母对添加剂热稳定性的影响
[0180] 以实施例2中所述的制备方法获得的添加剂为样品1，将实施例2中的红酵母替 换为市售的饲料酵母，比较两种样品的热稳定性。在45°C下保存上述样品24h，之后重复实 施例8的实验，通过料肉比的变化表征添加剂活性的变化，结果表明：样品1的残余活性在 75%以上，样品2的残余活性保持在40%左右。
【主权项】
1. 一种热稳定性好的饲料添加剂，其特征在于，由以下重量分数的组分组成：抗菌肽 5-10份，蜂胶10-20份，女贞子萃取物15-30份，红酵母培养物15-30份，灵芝菌固体发酵培 养物25-45份，羊肚菌酶解粉20-30份，杜仲叶提取物10-15份； 所述红酵母具体为海洋红酵母WYNl(Rhodotorulasp.WYNl)，保藏编号为：CCTCCNo:M2014592。2. 如权利要求1所述的一种热稳定性好的饲料添加剂，其特征在于，所述红酵母培养 物制备方法如下： 种子培养按酵母常规培养方法进行培养； 发酵培养：初始pH为8,将种子培养液按接种量3-8 %接种于发酵培养基，摇床转速为 50-80r/min，24-28°C培养10-15小时后调整温度为16-20°C进行低温静止培养，停止搅拌， pH调整为3-5,保持2-4小时；之后阶梯形升温到24-30°C，pH调整为4. 6-5. 5,按照2. 5%的 添加量添加蛋白胨，按照2%的量添加酵母粉；摇床转速为50-100r/min，继续发酵10-15h。 发酵结束后，发酵液经孔径IO-1000 ym粗滤，然后与10-20°C循环超滤浓缩去除水分 得固形物含量20-40%浓缩液，浓缩液经真空冷冻干燥、超微粉碎得红酵母培养物。3. 如权利要求2所述的一种热稳定性好的饲料添加剂，其特征在于，所述发酵培养基 质量体积比组成为：葡萄糖1 %，酶解玉米粉1-3 %，蛋白胨2. 5 %，硫酸镁0. 02 %，磷酸二氢 钾0. 15%，铜含量150-200mg/L，氯化钠20%，其余为水。4. 如权利要求2所述的一种热稳定性好的饲料添加剂，其特征在于，所述酶解玉米粉 的制备方法为：将玉米粉置于配料罐中，以V:m为2:1加入纯净水，调节pH值3-7,加入中 温淀粉酶，酶活为30u/g玉米粉，与酶活为30u/g玉米粉的蛋白酶，边搅拌边升温至45-55°C 保温15-30min，然后缓慢升温至60-65°C保温15-30min，冷冻干燥备用。5. -种制备如权利要求1所述的一种热稳定性好的饲料添加剂的方法，包括如下步 骤： (1) 所述抗菌肽及蜂胶均为市售产品； (2) 所述女贞子萃取物制备方法如下： 女贞子粉碎，过40-50目筛后，添加女贞子3-6倍重量无水乙醇浸渍提取，控制温度 30-45°C，2-4小时后调整温度为55-60°C1-2小时，提取液浓缩、干燥得到乙醇提取物；乙醇 提取后的女贞子残渣中添加75-85°C热水，热水添加量为女贞子残渣重量的2-4倍，处理时 间30-50分钟，连续提取2-3次，将提取液真空浓缩后喷雾干燥，得到热水提取物；将上述乙 醇提取物和热水提取物合并粉碎，过60目筛，即得女贞子提取物； (3) 所述灵芝菌固体发酵培养物制备方法如下： 斜面菌种活化培养：将保藏的灵芝斜面菌种转接到斜面培养基上，22-28 °C培养 96-120小时左右，至菌丝长满斜面即可；最佳培养温度25°C; ① 液体一级种子培养：将上述灵芝斜面菌种挑取一块接入装有100毫升培养基的500 毫升摇瓶中进行一级种子培养，培养条件：旋转式摇床80-180转/分，22-28°C培养96-130 小时； ② 液体二级种子培养：将一级摇瓶种子以5-20 %接种量接入装有100毫升培养基的 500毫升摇瓶中进行二级种子培养，培养条件：旋转式摇床80-180转/分，22-28 °C培养 96-130小时左右； ③ 固体发酵培养：将二级摇瓶种子以5-10%接种量接入装有灭菌后固体发酵培养基 的500L固体发酵罐中，培养条件：装料量50 %，培养温度20-27 °C，湿度75-90%，通风量 0. 3-1. 0(V/V)，培养时间15-40天，每隔3-10天开启搅拌10分钟，采用SGF固体发酵罐； ④ 发酵培养结束，选择流化床干燥，将物料干燥到水分含量在7 %以下，对固体发酵物 料进行粉碎既得灵芝菌固体发酵培养物； (4) 所述杜仲叶提取物的制备方法如下： 杜仲叶粉碎后加入5-8倍软水，用粗磨研磨，并加入板蓝根，加入量以杜仲重量的 1-2%，混合后经胶体磨研磨，调整胶体磨定子与转子的间隙为50~100微米，胶体磨流量 控制为〇. 1~〇. 5吨/小时，之后浆液加入混合酶进行酶解，pH5. 2-5. 5,温度45-50°C，酶 解时间3-4hr，所述混合酶用量为浆液重量的0. 05-0. 2%，所述混合酶重量份数组成为：果 胶酶4份、(6-葡聚糖酶1份、蛋白酶2份和纤维素酶2份。酶解液灭酶、过滤，冷冻浓缩、 冷冻干燥后粉碎既得杜仲提取物； (5) 所述羊肚菌酶解粉的制备方法如下： ① 羊肚菌子实体干燥粉碎； ② 水溶均质：将粉碎后的羊肚菌子实体加入不锈钢筒中，加入子实体质量3-6倍的水， 浸泡3-5小时，然后将此羊肚菌子实体液通过胶体磨，胶体磨操作条件为：调整胶体磨定子 与转子的间隙为〇. 5-1微米，胶体磨流量为0. 4-1吨/小时； ③ 升温酶解：将经过胶体磨处理的羊肚菌子实体液转移到不锈钢酶解罐中加热到 50-60°C，调整pH到4. 5-6. 0,加入羊肚菌子实体重量0. 05-0. 1 %的纤维素酶、0. 01-0. 1 % 的P-葡聚糖酶、〇. 01-0. 1 %的蛋白酶，保温酶解〇. 5-1. 5小时，酶解过程中不断搅拌； ④ 干燥：酶解后的醪液过滤后干燥获得羊肚菌酶解粉； (6) 所述红酵母培养物制备方法如下： 种子培养按酵母常规培养方法进行培养； 发酵培养：初始pH为8,将种子培养液按接种量3-8 %接种于发酵培养基，摇床转速为 50-80r/min，24-28°C培养10-15小时后调整温度为16-20°C进行低温静止培养，停止搅拌， pH调整为3-5,保持2-4小时；之后阶梯形升温到24-30°C，pH调整为4. 6-5. 5,按照2. 5%的 添加量添加蛋白胨，按照2%的量添加酵母粉；摇床转速为50-100r/min，继续发酵10-15h。 发酵结束后，发酵液经孔径l〇-l〇〇〇ym粗滤，然后与10-20°C循环超滤浓缩去除水分 得固形物含量20-40%浓缩液，浓缩液经真空冷冻干燥、超微粉碎得红酵母培养物； 发酵培养基质量体积比组成为：葡萄糖1 %，酶解玉米粉1-3 %，蛋白胨2. 5 %，硫酸镁 0. 02 %，磷酸二氢钾0. 15 %，铜含量150-200mg/L，氯化钠20 %，其余为水； 所述酶解玉米粉的制备方法为：将玉米粉置于配料罐中，以V:m为2:1加入纯净水，调 节pH值3-7,加入中温淀粉酶，酶活为30u/g玉米粉，与酶活为30u/g玉米粉的蛋白酶，边 搅拌边升温至45-55°C保温15-30min，然后缓慢升温至60-65°C保温15-30min，冷冻干燥备 用。 (6)所述复合饲料添加剂由以下方法制得： 抗菌肽，蜂胶，女贞子萃取物，红酵母培养物，灵芝菌固体发酵培养物，羊肚菌酶解粉， 杜仲叶提取物按照比例混合得到复合饲料添加剂。6. -种权利要求1所述的一种热稳定性好的饲料添加剂，其特征在于，由以下重量分 数的组分组成：抗菌肽8份，蜂胶15份，女贞子萃取物20份，红酵母培养物25份，灵芝菌 固体发酵培养物30份，羊肚菌酶解粉25份，杜仲叶提取物12份；红酵母为CCTCCNo:M 2014592。7.权利要求1所述的一种热稳定性好的饲料添加剂在畜禽饲料中的应用。
【专利摘要】本发明涉及一种热稳定性好的饲料添加剂及其制备方法，属于饲料酶制剂领域。所述热稳定性好的饲料添加剂由以下重量份数的组分组成：抗菌肽5-10份，蜂胶10-20份，女贞子萃取物15-30份，红酵母培养物15-30份，灵芝菌固体发酵培养物25-45份，羊肚菌酶解粉20-30份，杜仲叶提取物10-15份。其中红酵母为海洋红酵母WYN1(Rhodotorula？sp.WYN1)，保藏编号为：CCTCC？No：M2014592。由于本发明所使用的红酵母能够高产胡萝卜素，并且将培养基中的无机铜转化为螯合铜进行富集，更好的促进了动物的生长发育，提高饲料利用率，以及改善饲料添加剂的热稳定性。CCTCC No：M201459220141125
【IPC分类】A23K1/16, A23K1/00, A23K1/165, A23K1/14
【公开号】CN105166410
【申请号】
【发明人】邵素英
【申请人】邵素英
【公开日】2015年12月23日
【申请日】2015年9月17日