；
[0127] 发酵培养：初始pH为8,将种子培养液按接种量3%接种于发酵培养基，摇床转速 为50r/min，24°C培养10小时后调整温度为16°C进行低温静止培养，停止搅拌，pH调整为 3,保持2小时；之后每小时升温1. 5°C升温到24-30°C，pH调整为4. 6,按照2. 5%的添加量 添加蛋白胨，按照2%的量添加酵母粉；摇床转速为50r/min，继续发酵10h。
[0128] 发酵结束后，发酵液经孔径100ym粗滤，然后与10°C循环超滤浓缩去除水分得固 形物含量20%浓缩液，浓缩液经真空冷冻干燥、超微粉碎得红酵母培养物。
[0129] 发酵培养基质量体积比组成为：葡萄糖1%，酶解玉米粉2%，蛋白胨2. 5%，硫酸 镁0. 02%，磷酸二氢钾0. 15%，铜含量150mg/L，氯化钠20%，其余为水；
[0130] 所述酶解玉米粉的制备方法为：将玉米粉配料罐中，以V:m为2:1加入纯净水，调 节pH值3,加入中温淀粉酶，酶活为30u/g玉米粉，与酶活为30u/g玉米粉的蛋白酶，边搅拌 边升温至45°C保温15min，然后缓慢升温至60°C保温15min，冷冻干燥备用。
[0131] 采用上述方法发酵培养海洋红酵母WYN1，发酵液中生物量、类胡萝卜素产量及胞 内螯合铜含量分别为29. 38g/L、35mg/L和7240yg/g干菌。
[0132] 所述饲料添加剂由以下方法制得：
[0133] 粉碎后灵芝菌培养物、抗菌肽、蜂胶、女贞子萃取物、杜仲叶提取物、羊肚菌酶解 粉、红酵母培养物按照比例混合得到饲料添加剂。
[0134] 实施例4一种热稳定性好的饲料添加剂
[0135] 饲料添加剂重量份数组成如下：
[0136] 抗菌肽10份，蜂胶20份，女贞子萃取物30份，红酵母培养物30份，灵芝菌固体发 酵培养物25份，羊肚菌酶解粉30份，杜仲叶提取物15份；红酵母为CCTCCNo:M2014592 ;
[0137] 抗菌肽为上海楚肽生物科技有限公司销售产品；
[0138] 蜂胶为市售；
[0139] 所述女贞子萃取物制备方法如下：
[0140] 女贞子粉碎，过50目筛后，添加女贞子6倍重量无水乙醇浸渍提取，控制温度 45°C，4小时后调整温度为60°C维持2小时，提取液浓缩、干燥得到乙醇提取物；乙醇提取后 的女贞子残渣中添加85°C热水，热水添加量为女贞子残渣重量的4倍，处理时间50分钟，连 续提取3次，将提取液真空浓缩后喷雾干燥，得到热水提取物；将上述乙醇提取物和热水提 取物合并粉碎，过60目筛，即得女贞子提取物。
[0141] 所述杜仲叶提取物的制备方法如下：
[0142] 杜仲粉碎后加入8倍软水，用粗磨研磨，并加入板蓝根，加入量以杜仲重量的2%， 混合后经胶体磨研磨，调整胶体磨定子与转子的间隙为100微米，胶体磨流量控制为0. 5吨 /小时，之后浆液加入混合酶进行酶解，PH5. 5,温度50°C，酶解时间4hr，所述混合酶用量为 浆液重量的0. 2%，所述混合酶重量份数组成为：果胶酶4份、0-葡聚糖酶1份、蛋白酶2 份和纤维素酶2份。酶解液灭酶、过滤，冷冻浓缩、冷冻干燥后粉碎既得杜仲提取物。
[0143] 所述羊肚菌酶解粉的制备方法如下：
[0144] (1)羊肚菌子实体干燥粉碎至粒径2mm;
[0145](2)水溶均质：将粉碎后的羊肚菌子实体加入不锈钢筒中，加入子实体质量6倍的 水，浸泡5小时，然后将此羊肚菌子实体液通过胶体磨，胶体磨操作条件为：调整胶体磨定 子与转子的间隙为1微米，胶体磨流量为1吨/小时；
[0146] (3)升温酶解：将经过胶体磨处理的羊肚菌子实体液转移到不锈钢酶解罐中加热 到60°C，调整pH到6.0,加入羊肚菌子实体重量0. 1%的纤维素酶、0. 1%的葡聚糖酶、 0. 1 %的蛋白酶，保温酶解1. 5小时，酶解过程中不断搅拌；
[0147] (4)干燥：酶解后的醪液过滤后干燥获得羊肚菌酶解粉。灵芝菌固体发酵培养物 制备方法如下：
[0148] 斜面菌种活化培养：将保藏的灵芝斜面菌种转接到斜面培养基上，28°C培养120 小时左右；
[0149] 1.液体一级种子培养：将上述灵芝斜面菌种挑取一块接入装有100毫升培养基的 500毫升摇瓶中进行一级种子培养，培养条件：旋转式摇床180转/分，28°C培养130小时 左右；
[0150] 2.液体二级种子培养：将一级摇瓶种子以20%接种量接入装有100毫升培养基的 500毫升摇瓶中进行二级种子培养，培养条件：旋转式摇床180转/分，28°C培养130小时 左右；
[0151] 3.固体发酵培养：将二级摇瓶种子以10%接种量接入装有灭菌后固体发酵培养 基的500L固体发酵罐中，培养条件：装料量50%，培养温度27°C，湿度90%，通风量1. 0 (V/ V)，培养时间40天。每隔10天开启搅拌10分钟，采用SGF固体发酵罐；
[0152]4.发酵培养结束，选择流化床等多种干燥方法，将物料干燥到水分含量在6 %，对 固体发酵物料进行粉碎既得灵芝菌固体发酵培养物；
[0153] 所用灵芝菌种购于中国工业微生物菌种保藏中心，菌号CICC14080;
[0154] 斜面培养基组成可以为PDA斜面培养基。
[0155] 固体发酵培养基质量比组成如下：60%麸皮、1.4%蔗糖、10%玉米粉、16%玉米芯 (粉碎后），〇. 1%花生粉饼、2%脱脂大豆蛋白粉、0. 5%酵母粉；3%粉碎后过50目的当归、 4%的粉碎后过40目的板蓝根，3%粉碎后过40目的麝香草；培养基pH自然，灭菌条件： 121°C，2 小时。
[0156] 液体发酵种子培养基组成：淀粉3%，蔗糖4%，葡萄糖2%，蛋白胨0.5%，脱脂大 豆蛋白粉2
[0157] 所述红酵母培养物制备方法如下：
[0158] 种子培养按酵母常规培养方法进行培养；
[0159] 发酵培养：初始pH为8,将种子培养液按接种量8%接种于发酵培养基，摇床转速 为80r/min，28°C培养15小时后调整温度为20°C进行低温静止培养，停止搅拌，pH调整为 5,保持4小时；之后每小时3°C升温到30°C，pH调整为5. 5,按照2. 5%的添加量添加蛋白 胨，按照2%的量添加酵母粉；摇床转速为10(^/1^11，继续发酵1511。
[0160] 发酵结束后，发酵液经孔径1000ym粗滤，然后与20°C循环超滤浓缩去除水分得 固形物含量40%浓缩液，浓缩液经真空冷冻干燥、超微粉碎得红酵母培养物。
[0161] 发酵培养基质量体积比组成为：葡萄糖1%，酶解玉米粉3%，蛋白胨2. 5%，硫酸 镁0. 02 %，磷酸二氢钾0. 15 %，铜含量200mg/L，氯化钠20 %，其余为水；
[0162]所述酶解玉米粉的制备方法为：将玉米粉配料罐中，以V:m为2:1加入纯净水，调 节pH值7,加入中温淀粉酶，酶活为30u/g玉米粉，与酶活为30u/g玉米粉的蛋白酶，边搅拌 边升温至55°C保温30min，然后缓慢升温至65°C保温30min，冷冻干燥备用。
[0163] 采用上述方法发酵培养海洋红酵母WYN1，发酵液中生物量、类胡萝卜素产量及胞 内螯合铜含量分别为28. 76g/L、38mg/L和7580yg/g干菌。
[0164] 所述饲料添加剂由以下方法制得：
[0165] 粉碎后灵芝菌培养物、抗菌肽、蜂胶、女贞子萃取物、杜仲叶提取物、羊肚菌酶解 粉、红酵母培养物按照比例混合得到饲料添加剂。
[0166] 实施例5实施例2所得饲料添加剂在断奶仔猪中的使用效果试验
[0167] 试验方法：
[0168] 选取120头断奶仔猪，按体重、血统及性别无差异分为实验组和对照组，每组3个 重复，每个重复20头猪。实验期为28天，实验组每吨饲料添加本实施例2所述添加剂120g， 对照组不添加添加剂，于试验期的始末日早晨空腹称重，计算饲料转化率、日增重、料肉比、 腹泻率和死淘率。实验结果如下表所示：
[0169]
[0170] 由实验结果可知，添加有本发明所述添加剂的饲料可使断奶仔猪日增重提高 49. 41%，料肉比提高14. 7%，腹泻率减少10%，死淘率提高3. 7%
[0171] 实施例6本发明例2饲料添加剂在哺乳母猪中的使用效果试验
[0172] 试验采用单因素对比设计，随机选取30头健康的、产仔头数与出生均重相近的、 胎次均为2或3胎的哺乳母猪，随机分为2组（即试验组和对照组），每组15个重复，进行 为期21天的饲喂试验。其中：试验组日粮添加由实施例2制备得的添加剂，对照组不添加。 记录仔猪断奶重、腹泻率、死亡率。
[0173]
[0174]
[0175] 试验表明：试验组比对照组断奶窝重可以提高59. 3%，仔猪头日增重提高 43. 3 %，腹泻率减少54. 1 %。
[0176] 上述结果表明本发明产品可改善母猪和仔猪机体免疫能力，减少抗生素用量，增 加养殖质量和效益。
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