一种热稳定性好的饲料添加剂的利记博彩app_3

文档序号:8949107阅读:来源:国知局
液重量的〇. 1 %,所述混合酶重量份数组成为:果胶酶4份、0 -葡聚糖酶1份、 蛋白酶2份和纤维素酶2份。酶解液灭酶、过滤,冷冻浓缩、冷冻干燥后粉碎既得杜仲提取 物。
[0077] 所述羊肚菌酶解粉的制备方法如下:
[0078] (1)羊肚菌子实体干燥粉碎至粒径1mm;
[0079] (2)水溶均质:将粉碎后的羊肚菌子实体加入不锈钢筒中,加入子实体质量5倍的 水,浸泡4小时,然后将此羊肚菌子实体液通过胶体磨,胶体磨操作条件为:调整胶体磨定 子与转子的间隙为〇. 8微米,胶体磨流量为0. 8吨/小时;
[0080] (3)升温酶解:将经过胶体磨处理的羊肚菌子实体液转移到不锈钢酶解罐中加热 到55°C,调整pH到5.0,加入羊肚菌子实体重量0.08%的纤维素酶、0.05%的葡聚糖 酶、0. 05%的蛋白酶,保温酶解1小时,酶解过程中不断搅拌;
[0081] (4)干燥:酶解后的醪液过滤后干燥获得羊肚菌酶解粉。
[0082] 灵芝菌固体发酵培养物制备方法如下:
[0083] 斜面菌种活化培养:将保藏的灵芝斜面菌种转接到斜面培养基上,25°C培养110 小时左右,至菌丝长满斜面即可;
[0084] 1.液体一级种子培养:将上述灵芝斜面菌种挑取一块接入装有100毫升培养基的 500毫升摇瓶中进行一级种子培养,培养条件:旋转式摇床150转/分,25°C培养110小时 左右;
[0085] 2.液体二级种子培养:将一级摇瓶种子以10%接种量接入装有100毫升培养基的 500毫升摇瓶中进行二级种子培养,培养条件:旋转式摇床150转/分,25°C培养110小时 左右;
[0086] 3.固体发酵培养:将二级摇瓶种子以8%接种量接入装有灭菌后固体发酵培养基 的500L固体发酵罐中,培养条件:装料量50 %,培养温度25 °C,湿度80 %,通风量0. 5 (V/ V),培养时间25天。每隔5天开启搅拌10分钟,采用SGF固体发酵罐;
[0087]4.发酵培养结束,选择流化床干燥,将物料干燥到水分含量在5%,对固体发酵物 料进行粉碎既得灵芝菌固体发酵培养物;
[0088] 所用灵芝菌种购于中国工业微生物菌种保藏中心,菌号CICC14080;
[0089] 斜面培养基组成可以为PDA斜面培养基;
[0090] 固体发酵培养基质量分数组成如下:60%麸皮、1.4%蔗糖、10%玉米粉、16%玉米 芯(粉碎后),〇. 1%蛋白胨、2%脱脂大豆蛋白粉、0. 5%酵母粉;3%粉碎后过50目的当归、 4%的粉碎后过40目的板蓝根,3%粉碎后过40目的麝香草;培养基pH自然。灭菌条件: 121°C,2 小时。
[0091] 液体发酵种子培养基组成:淀粉3%,蔗糖4%,葡萄糖2%,蛋白胨0.5%,脱脂大 豆蛋白粉2%,磷酸二氢钾0. 15%,硫酸镁0. 12%,维生素B12PPm,PH6. 5。
[0092] 所述红酵母培养物制备方法如下:
[0093] 按常规酵母培养方法进行种子培养;
[0094] 发酵培养:初始pH为8,将种子培养液按接种量5%接种于发酵培养基,摇床转速 为65r/min,26°C培养12小时后调整温度为18°C进行低温静止培养,停止搅拌,pH调整为 4,保持3小时;之后没小时升温2°C至26°C,pH调整为5,按照2. 5%的添加量添加蛋白胨, 按照2%的量添加酵母粉;摇床转速为8(^/1^11,继续发酵1211;
[0095] 发酵结束后,发酵液经孔径500ym粗滤,然后与15°C循环超滤浓缩去除水分得固 形物含量30%浓缩液,浓缩液经真空冷冻干燥、超微粉碎得红酵母培养物。
[0096] 发酵培养基质量体积比组成为:葡萄糖1%,酶解玉米粉2%,蛋白胨2. 5%,硫酸 镁0. 02 %,磷酸二氢钾0. 15 %,铜含量180mg/L,氯化钠20 %,其余为水;
[0097] 所述酶解玉米粉的制备方法为:将玉米粉配料罐中,以V:m为2:1加入纯净水,调 节pH值5,加入中温淀粉酶,酶活为30u/g玉米粉,与酶活为30u/g玉米粉的蛋白酶,边搅拌 边升温至50°C保温25min,然后缓慢升温至62°C保温25min,冷冻干燥备用。
[0098] 采用上述方法发酵培养海洋红酵母WYN1,发酵液中生物量、类胡萝卜素产量及胞 内螯合铜含量分别为32. 52g/L、40mg/L和8000yg/g干菌。
[0099] 所述饲料添加剂由以下方法制得:
[0100] 粉碎后灵芝菌培养物、抗菌肽、蜂胶、女贞子萃取物、杜仲叶提取物、羊肚菌酶解 粉、红酵母培养物按照比例混合得到饲料添加剂。
[0101] 实施例3 -种热稳定性好的饲料添加剂
[0102] 饲料添加剂重量份数组成如下:
[0103] 抗菌肽5份,蜂胶10份,女贞子萃取物15份,红酵母培养物15份,灵芝菌固体发 酵培养物45份,羊肚菌酶解粉20份,杜仲叶提取物10份;红酵母为CCTCCNo:M2014592 ;
[0104] 抗菌肽为上海楚肽生物科技有限公司销售产品;
[0105] 蜂胶为市售;
[0106] 所述女贞子萃取物制备方法如下:
[0107]女贞子粉碎,过40目筛后,添加女贞子3倍重量无水乙醇浸渍提取,控制温度 30°C,2小时后调整温度为55°C维持1小时,之后提取液浓缩、干燥得到乙醇提取物;乙醇提 取后的女贞子残渣中添加75°C热水,热水添加量为女贞子残渣重量的2倍,处理时间30分 钟,连续提取2次,将提取液真空浓缩后喷雾干燥,得到热水提取物;将上述乙醇提取物和 热水提取物合并粉碎,过60目筛,即得女贞子提取物。
[0108] 所述杜仲叶提取物的制备方法如下:
[0109] 杜仲粉碎后加入5倍软水,用粗磨研磨,并加入板蓝根,加入量以杜仲重量的1%, 混合后经胶体磨研磨,调整胶体磨定子与转子的间隙为50微米,胶体磨流量控制为0. 1吨 /小时,之后浆液加入混合酶进行酶解,PH5. 2,温度45°C,酶解时间3hr,所述混合酶用量为 浆液重量的0. 05%,所述混合酶重量份数组成为:果胶酶4份、0-葡聚糖酶1份、蛋白酶2 份和纤维素酶2份。酶解液灭酶、过滤,冷冻浓缩、冷冻干燥后粉碎既得杜仲提取物。
[0110] 所述羊肚菌酶解粉的制备方法如下:
[0111] (1)羊肚菌子实体干燥粉碎至粒径2mm;
[0112] (2)水溶均质:将粉碎后的羊肚菌子实体加入不锈钢筒中,加入子实体质量3倍的 水,浸泡3小时,然后将此羊肚菌子实体液通过胶体磨,胶体磨操作条件为:调整胶体磨定 子与转子的间隙为〇. 5微米,胶体磨流量为0. 4吨/小时;
[0113] (3)升温酶解:将经过胶体磨处理的羊肚菌子实体液转移到不锈钢酶解罐中加热 到50°C,调整pH到4. 5,加入羊肚菌子实体重量0.05%的纤维素酶、0.01 %的葡聚糖 酶、0. 01 %的蛋白酶,保温酶解0. 5小时,酶解过程中不断搅拌;
[0114] (4)干燥:酶解后的醪液过滤后干燥获得羊肚菌酶解粉。
[0115] 灵芝菌固体发酵培养物制备方法如下:
[0116] 斜面菌种活化培养:将保藏的灵芝斜面菌种转接到斜面培养基上,22°C培养96小 时左右;
[0117] 1.液体一级种子培养:将上述灵芝斜面菌种挑取一块接入装有100毫升培养基的 500毫升摇瓶中进行一级种子培养,培养条件:旋转式摇床80转/分,22°C培养96小时左 右;
[0118]2.液体二级种子培养:将一级摇瓶种子以5%接种量接入装有100毫升培养基的 500毫升摇瓶中进行二级种子培养,培养条件:旋转式摇床80转/分,22°C培养96小时左 右;
[0119] 3.固体发酵培养:将二级摇瓶种子以5%接种量接入装有灭菌后固体发酵培养基 的500L固体发酵罐中,培养条件:装料量50 %,培养温度20 °C,湿度75 %,通风量0. 3 (V/ V),培养时间15天,每隔3天开启搅拌10分钟,采用SGF固体发酵罐;
[0120]4.发酵培养结束,选择流化床干燥,将物料干燥到水分含量在4%,对固体发酵物 料进行粉碎既得灵芝菌固体发酵培养物;
[0121] 所用灵芝菌种购于中国工业微生物菌种保藏中心,菌号CICC14080;
[0122] 斜面培养基组成为PDA斜面培养基;
[0123] 固体发酵培养基组成如下:60%麸皮、1.4%葡萄糖、10%玉米粉、16%玉米芯(粉 碎后),0. 1 %花生粉饼、2 %脱脂大豆蛋白粉、0. 5 %酵母粉;3 %粉碎后过50目的当归、4% 的粉碎后过40目的板蓝根,3%粉碎后过40目的麝香草;培养基pH自然,灭菌条件:121°C, 2小时;
[0124] 液体发酵种子培养基组成:淀粉3%,蔗糖4%,葡萄糖2%,蛋白胨0.5%,脱脂大 豆蛋白粉2%,磷酸二氢钾0. 15%,硫酸镁0. 12%,维生素B12PPm,PH6 ;
[0125] 所述红酵母培养物制备方法如下:
[0126]种子培养按酵母常规培养方法进行培养
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