认知功能 障碍疾病(特别是轻度认知功能障碍及阿尔茨海默病)的检测精度。
[0051] 本发明中，非认知功能障碍受试者(NDC)包括健康人，是指可W罹患某种疾病、但 没有罹患认知功能障碍疾病的受试者(非痴呆对照(non-demented control))。
[0052] 另外，本发明中，总称为认知功能障碍疾病时，包括轻度认知功能障碍(MCI)、阿尔 茨海默病(AD)及痴呆型神经疾病。本发明中，能够适当地检测轻度认知功能障碍(MCI)、阿 尔茨海默病(AD)。
[0053] 本发明中发现的该肤不仅是在血清中，在血液、血清、血浆、脑脊髓液、尿等其他生 物体试样中被检出的情况下，也具有作为生物标记物的意义。同时，作为运些肤的起源的蛋 白质下称为"完整蛋白质"）或肤也具有作为生物标记物的意义。
[0054] 目P，本发明提供一种用于检测认知功能障碍疾病的生物标记物，所述生物标记物 选自下述(a)、（b)及(C)中的1种或巧中W上。
[0055] (a)由包含序列号1所表示的氨基酸序列的载脂蛋白A1的完整蛋白质或其部分肤 形成的用于检测认知功能障碍疾病的生物标记物
[0056] (b)由包含序列号2所表示的氨基酸序列的甲状腺素运载蛋白的完整蛋白质或其 部分肤形成的用于检测认知功能障碍疾病的生物标记物
[0057] (C)由包含序列号3所表示的氨基酸序列的补体C3的完整蛋白质或其部分肤形成 的用于检测认知功能障碍疾病的生物标记物
[0058] 本发明提供一种认知功能障碍疾病的检测方法，所述检测方同时或分别测定生物 体试样中的、选自上述(a)生物标记物、（b)生物标记物及(C)生物标记物的1种或巧巾W上的 用于检测认知功能障碍疾病的生物标记物。
[0059] 本发明提供一种认知功能障碍疾病的检测试剂盒，所述检测试剂盒用于测定选自 上述(a)生物标记物、（b)生物标记物及(C)生物标记物中的1种或巧巾W上的用于检测认知 功能障碍疾病的生物标记物。
[0060] 本发明提供一种准确率高的多个认知功能障碍疾病检测用生物标记物的组合选 定方法，包括:对受试者的生物体试样中的认知功能障碍疾病的巧巾W上生物标记物分别进 行测定，通过逻辑回归分析对上述巧巾W上的生物标记物各自的测定结果进行解析，基于上 述解析结果选定认知功能障碍疾病的准确率高的生物标记物的组合。
[0061 ]根据本发明，能够提供一种生物标记物及使用该生物标记物的认知功能障碍疾病 的检测方法。
【附图说明】
[0062] 图1是序列号3;C3的标记物蛋白质的差异解析和R0C曲线的结果。给出NDC VS.MCI 和NDC VS.AD。
[0063] 图2是序列号l;ApoAl的标记物蛋白质的差异解析和R0C曲线的结果。给出NDC VS.MCI和NDC VS.AD。
[0064] 图3是序列号2; TTR的标记物蛋白质的差异解析和R0C曲线的结果。给出NDC VS.MCI和NDC VS.AD。
【具体实施方式】
[0065] 本发明中，能够将选自下述的(a)~(C)所述的完整蛋白质及/或其部分肤的巧中W 上生物标记物用于检测认知功能障碍疾病。
[0066] (a)由包含序列号1所表示的氨基酸序列的载脂蛋白A1的完整蛋白质或其部分肤 形成的用于检测认知功能障碍疾病的生物标记物
[0067] (b)由包含序列号2所表示的氨基酸序列的甲状腺素运载蛋白的完整蛋白质或其 部分肤形成的用于检测认知功能障碍疾病的生物标记物
[0068] (C)由包含序列号3所表示的氨基酸序列的补体C3的完整蛋白质或其部分肤形成 的用于检测认知功能障碍疾病的生物标记物
[0069] 本发明，在受试者罹患认知功能障碍疾病时，能够分别检测出生物体试样中的、上 述(a)~(C)中记载的至少1个完整蛋白质及/或其部分肤的种类及量。
[0070] 进而，本发明能够在检测生物体试样中的上述(a)~(C)中的至少1个或2个W上完 整蛋白质和其部分肤的同时，对它们的种类和量的变化进行测定，由此能够精度更良好地 诊断受试者是否罹患认知功能障碍疾病。
[0071] 本发明能够提供一种系统，所述系统通过对选自生物体试样中的上述(a)~(C)的 生物标记物中的1种或巧中W上进行测定，W极高的精度及特异性进行诊断等。由此，能够对 认知功能障碍疾病进行高精度的诊断等。进而，本发明的生物标记物对药剂效果判定的有 用性也很高。
[0072] 另外，本发明通过测定上述(a)~（C)中的各生物标记物的量，在受试者的生物体 试样中的上述(a)~（C)的完整蛋白质及/或其部分肤出现或增加的情况下，能够对该受试 者罹患包括轻度的认知障碍或阿尔茨海默病的认知功能障碍疾病进行检测、评价、判断、诊 断或检查等。另外，本发明通过进一步与非认知功能障碍受试者的生物体试样进行比较，能 够精度更良好地诊断受试者是否罹患认知功能障碍疾病等。
[0073] 优选的是将上述(a)~（C)的生物标记物中的巧巾或3种W上组合来检测认知功能 障碍疾病，因为对认知功能障碍疾病的检测精度提高，所W是优选的。检测出多个生物标记 物的情况下，能够精度良好地检测或诊断为认知功能障碍疾病。
[0074] 更优选的是对上述(C)生物标记物(C3)和、上述(a)生物标记物(ApoAl)或上述(b) 生物标记物(TTR)中的巧巾进行测定，因为认知功能障碍疾病(MCI及AD)的检测精度提高，所 W是优选的。在检测出运巧巾生物标记物的情况下，认知功能障碍疾病(MCI及AD)的检测精 度进一步提高，所w在上述认知功能障碍疾病的检测为轻度认知障碍的检测的情况下，更 优选对上述k)生物标记物(C3)及上述(a)生物标记物(ApoAl)运巧巾进行测定，或者在上述 认知功能障碍疾病的检测为阿尔茨海默病的检测的情况下，更优选对上述(C)生物标记物 (C3)及上述(b)生物标记物(TTR)运巧巾进行测定。
[0075] 此处，本发明中的"完整蛋白质的部分肤"的"肤"的含义中包括"多肤"和"低聚 口丄，， 月太。
[0076] 该"低聚肤"一般是指分子量1万W下的氨基酸结合而成的肤、或氨基酸残基的数 量为几个~50个W下程度的肤。
[0077] 该"多肤"是指分子量1万W上的氨基酸结合而成的肤、或氨基酸残基的数量为50 个W上程度的肤。
[0078] 本发明中，完整蛋白质的部分肤是指具有完整蛋白质所具有的氨基酸序列的一部 分的部分氨基酸序列的肤。
[0079] 该完整蛋白质的部分肤有在利用转录?翻译的表达合成过程中作为部分肤被生 成的情况，和在被合成为完整蛋白质后，在生物体内被消化分解而作为消化分解产物肤被 生成的情况。究其原因，可W举出生物体处于认知功能障碍疾病等非正常状态时，蛋白质的 合成及控制机制失控。
[0080] 本发明能够W生物体内蛋白质的表达合成及/或消化分解为指标对受试者是处于 正常状态还是罹患认知功能障碍疾病进行评价、判别等，另外还能够对罹患认知功能障碍 疾病时的进行度进行评价、判别等。
[0081] 本发明中的"认知功能障碍疾病的检测"是指受试者是否罹患认知功能障碍疾病 的检测，除此之外，还可W为评价、判别、诊断或检查等。另外，本发明的认知功能障碍疾病 的检测也可包括对受试者罹患更为严重的认知功能障碍的风险的评价等。
[0082] 本发明中，作为能够用作认知功能障碍疾病检测用生物标记物的完整蛋白质，可 W举出包含序列号1所表示的氨基酸序列的载脂蛋白A1、包含序列号2所表示的氨基酸序列 的甲状腺素运载蛋白、包含序列号3所表示的氨基酸序列的补体C3。
[0083] 另外，运些完整蛋白质的部分肤也可用作认知功能障碍疾病检测用生物标记物。
[0084] 本发明中的"完整蛋白质的部分肤"的含义中也包括由完整蛋白质及在其合成. 分解过程中生成的肤产生的5个W上氨基酸残基的肤片断。
[0085] 另外，作为能够用作认知功能障碍疾病检测用生物标记物的完整蛋白质的部分 肤，例如可W举出由序列号1所表示的氨基酸序列形成的多肤(优选来自载脂蛋白A1的多 肤）、由序列号2所表示的氨基酸序列形成的多肤(优选来自甲状腺素运载蛋白的多肤）、由 序列号3所表示的氨基酸序列形成的多肤(来自补体C3的多肤）。
[0086] 本发明能够将由在上述(a)~（C)中记载的蛋白质及其部分肤的各氨基酸序列中 缺失、取代、加成1个或几个氨基酸得到的氨基酸序列形成的蛋白质或肤用作生物标记物。
[0087] 此处，"1个或几个"是指"1~3个V'l个或2个V'l个'。
[0088] 本发明中生物标记物中使用的部分肤的含义中包括:包含序列号1~3所表示的氨 基酸序列的蛋白质或肤、及由它们产生的5个W上氨基酸残基的肤片断。
[0089] 应予说明，本发明中的"5个W上氨基酸残基的肤片断"中设定为"5个W上氨基酸 残基"的理由依据非专利文献2的记载。该非专利文献巧良告称，对于组蛋白册的(：端（130~ 135)的氨基酸残基序列IRGERA，将R取代成Κ得到的肤W及使IR缺失、代之W使CGG结合在 GERA上而得的肤CGGGERA被W肤IRGERA为免疫原得到的抗体识别。运表示抗原性的识别是 通过由4个W上氨基酸残基形成的肤而进行的。
[0090] 本发明中，虽然为了使组蛋白册的C端W外也具有一般性，增加 1个残基，使残基数 达到5个W上，但是将运样的低分子肤也作为对象在采用使用免疫印迹法、ELISA法、 immunoMS法等免疫学方法进行检测及分离的方法时是重要的。
[0091] 应予说明，在完整蛋白质或其部分肤上加成有糖链。运些加成有糖链的蛋白质及 部分肤也能够用作认知功能障碍疾病检测用生物标记物。
[0092] 应予说明，在本发明中，可W对生物标记物进行定量，也可W通过定性确定存在或 不存在。此时，生物标记物浓度在规定的测定值W上的情况下或在非认知功能疾病患者组 的基准值W上的情况下，能够检测、诊断为认知功能障碍疾病等。另外，通过生物标记物定 性，能够检测、诊断为阳性一阴性等，例如与生物标记物反应而显色等时，认定为阳性。
[0093] 本发明中，作为将血清等生物体试样中的生物标记物分离的方法，可W使用二维 电泳或二维色谱法(2D-LC)。二维色谱法中使用的色谱法只要从离子交换色谱法、反相色谱 法、凝胶过滤色谱法等公知的色谱法中选择即可。
[0094] 另外，本发明中，作为将生物标记物分离的方法，也可W通过使用组合了色谱法 化C)和Ξ级四极质谱仪的LC-MS的SRM/MRM法进行定量。此时使用的LC可W为一维的LC。 [00%]进而，本发明中，作为将生物标记物分离的方法，只要使用使本发明人开发的珠 (包括磁珠)结合针对作为对象的蛋白质或肤的抗体、由此捕捉想要测定的蛋白质或肤后、 从珠中溶出而通过质谱分析进行测定的immunoMS法(参见专利文献1)，就不用使用二维电 泳或色谱法，能够简便地对作为目标的蛋白质、蛋白质片断、肤的有无或者量进行评价。
[0096] 生物体试样中的1种或巧中W上蛋白质的种类及量可通过各种方法同时或分别进 行测定。鉴定有