一种二咖啡酰亚精胺衍生物糖苷及其用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于天然药物领域，更具体的涉及一种二咖啡酰亚精胺衍生物糖苷及其作 为抗氧化剂和抗病毒剂的用途。
【背景技术】
[0002] 生命活动的许多过程都涉及到自由基的产生和清除。正常生理情况下，生物体内 自由基的产生和清除呈平衡状态。一旦平衡失调，过剩的自由基会攻击靶器官，造成细胞膜 脂质过氧化，核酸主链、蛋白质及多肽键断裂，细胞凋亡等，引起机体衰老和器官退行性变 化，导致心脑血管疾病、癌症、糖尿病及老年性痴呆等多种疾病的发生。
[0003] 目前，已有大量的抗氧化剂被用于食品、药品和化妆品行业。例如，从茶叶中提取 的茶多酚被广泛用于食品添加剂和化妆品中，其抗氧化能力高于维生素 E 10-20倍;具有显 著抗氧化能力的EGCG(epigallocatechingallate)，正被开发成治疗老年痴呆的药物 ;黄 酮类化合物，如木犀草素、芦丁和橙皮苷，均具有较好的抗氧化效果，可以用于心血管病和 肿瘤预防。因此，抗氧化剂的研究和开发在食品药品行业中越来越引起重视。0RAC分析方法 作为衡量物质抗氧化能力的标准分析方法已在业内广泛认同，受到美国农业部和美国国立 卫生院等众多科研机构的认可。0RAC值也成为了食品中抗氧化物含量的国际通用标准单 位。
[0004] 神经退行性疾病是一类慢性、进行性神经疾病，以特定区域的迟发性神经细胞退 行性病变、细胞丢失为共同特征，是由于神经元或其髓鞘的丧失导致的，并随着时间的推移 而恶化，导致功能障碍，神经退行性疾病按照其表型一般分为两类:一类是影响运动的，如 小脑性共济失调，帕金森病等，一类是影响记忆及其相关的痴呆症，目前神经退行性疾病的 治疗药物仍然较少。
[0005] 老年痴呆是退行性疾病中的一种，为多病机异质性疾病，以进行性认知功能障碍 和记忆损害为特征的中枢神经系统退行性疾病综合征，其表现为智力(包括记忆力、学习能 力、方向辨认能力、语言能力、理解能力以及判断力）上的减退。该病在多种因素(包括生物 和社会心理因素)作用下发病，可能的发病因素和假说多达30余种，如家族史、头部外伤、甲 状腺病、病毒感染等。老年痴呆一般常见的有阿尔茨海默病(Alzheimer's diseaSe，AD)、血 管性痴呆病（Vascular dementia，VA)、路易体痴呆病（Dementia with Lewy bodies，DLB) 以及额颞痴呆(Frontotemporal dementia，FTD)等。在所有的痴呆患者中，阿尔茨海默病患 者占50~70%，是老年痴呆中最常见的类型。
[0006] 对于老年痴呆的治疗目前主要分为：（1)控制伴发精神病理状态的对症治疗，用药 主要包括抗焦虑药，如阿普唑仑、奥沙西泮、三唑仑等，抗抑郁药，如百优解、帕罗西汀、舍曲 林等，抗精神病药，如利培酮、奥氮平等；（2)益智或改善认知功能，用药主要以乙酰胆碱酯 酶抑制剂、N-甲基-D-天门冬氨酸受体拮抗剂(匪DA)、雌激素类药物和促进脑代谢药物为 主。以上这些药物能在一定程度上改善患者的痴呆症状，但不能从根本上阻止病情的恶化、 逆转病情，因此寻找抗老年痴呆症药物的研制已经引起全世界的重视，并已建立许多相关 的生物活性筛选和评价体系。在现有众多整体动物模型中，果蝇是人们最为熟知的模式生 物之一，果蝇有着其它模式动物不能比拟的优势，如:个体空间占位极小（一般一个试剂瓶 中可以培养上千只果蝇）、饲养成本低、易培养、繁殖速度快且繁殖能力强(筛选通量高）、样 品消耗量少(5-50mg)、寿命周期短（约50天，活性测试周期短）、与年龄相关的神经元退化明 显，是老年痴呆症等神经退行性疾病研究和药物筛选的理想模型。
[0007] 二咖啡酰亚精胺衍生物是一类稀少的植物成分，目前研究较少。二咖啡酰亚精胺 衍生物糖苷以前未见任何报道。本发明即为从枸杞子中发现并分离了一类二咖啡酰亚精胺 衍生物糖苷，经实验证明了其具有抗氧化和抗病毒活性，并具有抗老年痴呆等神经退行性 疾病的作用。。
【发明内容】
[0008] 本发明的一个目的是提供一类二咖啡酰亚精胺衍生物糖苷或其药学上可接受的 盐，其结构式如下：
[0009]
[0010] 其中：
[0011] RiUs和R4为羟基、甲氧基或任选取代的糖基，且Ri、R2、R3和R4中至少有一个为任 选取代的糖基。R5和R6同为_CH =或-CH2-，其中所述任选取代为任选被下述糖基中的一个或 多个取代:葡萄糖基、葡萄糖醛酸基、甘露糖基、半乳糖基、阿洛糖基、果糖基、山梨糖基、夫 糖基、鼠李糖基、鸡纳糖基、阿拉伯糖基、来苏糖基、木糖基、核糖基等各种单糖基，以及由上 述单糖所形成的各种二糖基及多糖基。
[0012] 在本发明进一步地实施方案中，所述式（I)化合物优选为具有以下结构式的化合 物：
[0014] 工以丄丄丄；= = = = ^[0015] 式（ιν):κ1 = βκ?(3，Κ2 = Η，Κ3 = Η，Κ4=Η[0016] 式（ν):办=山1?2 = !1，1?3 = 11，1?4=卩-0-61。[0017] 式（71):办=山1?2 = 3-〇-61。，1?3 = 0-〇-61。，1?4=11[0018] 式（￥11):办=0-〇-61。，1?2 = 11，1?3 = 0-〇-61。，1?4=11
[0013]
[0019]
[0020] 式（νιιι) :κ1 = Η，Κ2 = β · D · G1c，R3 = P · D · G1c，R4=H
[0021]
''3
[0022] 式（ix):办=山1?2 = !1，1?3 = 11，1?4=3-0-61。
[0023] 式（χ):办=山1?2 = 3-〇-61。，1?3 = 11，1?4=11
[0024] 式（父1):办=山1?2 = !1，1?3 =卩-0-61。，1?4=11
[0025] 式（XII):办=0-〇-61。，1?2 = 11，1?3 =卩一D -G1c，R4=H
[0026] 式 = = =
[0027] 式（XIV):办=0-〇-61。，1?2 = 11，1?3 = 11，1?4=3-〇-61。
[0028]在本发明中，式（I)的二咖啡酰亚精胺衍生物糖苷的药学上可接受的盐，为式（I) 的二咖啡酰亚精胺衍生物糖苷与盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸等无机酸或三氟乙酸、乙酸、丙 酸、丙二酸、丁酸、乳酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、马来酸，苯甲酸、琥珀酸、苦味 酸、酒石酸、柠檬酸、富马酸等有机酸形成的盐。
[0029]本发明的另一个目的是提供二咖啡酰亚精胺衍生物糖苷及其药学上可接受的盐 作为抗氧化剂在制备预防或治疗神经退行性疾病药物中的应用，所述神经退行性疾病包括 但不限于老年痴呆、帕金森氏症、多发性硬化症和亨廷顿氏病中一种或几种;优选的为老年 痴呆，更优选的所述老年痴呆为阿尔茨海默病、血管性痴呆病、路易体痴呆病以及额颞痴 呆。
[0030]本发明的再一个目的是提供二咖啡酰亚精胺衍生物糖苷及其药学上可接受的盐 在制备抗病毒药物中的应用，所述病毒优选为呼吸道合胞病毒。
[0031 ] 上述二咖啡酰亚精胺衍生物糖苷是从宁夏枸杞(Lycium barbarum)的果实，枸杞 子中分离得到。枸杞子采自中国宁夏回族自治区中宁县。样品保存于暨南大学药学院中药 及天然药物研究所(编号：LYBA-2013-NX-ZN，地点：中国广州市黄埔大道西601号暨南大学 药学院，510632)。
[0032]上述二咖啡酰亚精胺衍生物糖苷及其药学上可接受的盐的制备方法具体包括以 下步骤：
[0033] (1)枸杞子用体积比60:40的乙醇-水加热回流提取3次，每次2小时，过滤后，滤液 经减压浓缩得浓缩液；
[0034] (2)浓缩液经大孔树脂柱层析，依次用体积比为0:100、30:70、50:50、70:30和95:5 的乙醇-水洗脱，得到5个馏分FI、F2、F3、F4、F5;
[0035] (3)将体积比为30:70的乙醇-水洗脱得到的馏分F2,进行常压硅胶柱层析，依次用 体积比为 95:5:0、90:10:1、85:15:1.5、80:20:2、70:30:3、60:40:4、50:50:5、40:60:6和0: 100:0的氯仿-甲醇-水洗脱，得到卩2.1、？2.2、？2.3、？2.4、？2.5、？2.6、？2.7、？2.8、？2.9和 F2.10共10个子馏分；
[0036] (4)将体积比50: 50: 5氯仿-甲醇-水洗脱得到的子馏分F2.8,过中低压液相0DS柱 层析，依次用体积比为 10 :90:0 · 1、15:85:0 · 1、20 :80:0 · 1、25: 75:0 · 1、30 :70 :0 · 1、40:60: 0.1和100:0:0的甲醇-水-三氟乙酸洗脱，得到卩2.8.1、卩2.8.2、卩2.8.3、卩2.8.4、卩2.8.5、 F2.8.6、F2.8.7和F2.8.8共8个子馏分；
[0037] (5)将体积比为10:90:0.1的甲醇-水-三氟乙酸洗脱得到的子馏分F2.8.1，经过反 相制备级即]^制备(&381]1〇8；[1?301^(1(]18(3〇1111]111)，使用流速为811117/111；[11的体积比为20:80: 0· 1的甲醇-水-三氟乙酸进行洗脱，得到F2.8.1 · 1、F2.8.1.2、F2.8.1.3、F2.8.1.4和 F2.8.1.5共5个子馈分；
[0038] (6)将子馈分F2.8.1.3经反相制备级HPLC制备(Cosmosil Packed C18column)，使 用流速为8mL/min的体积比10:90:0.1的乙腈-水-三氟乙酸进行洗脱，得到式(XI)化合物的 三氟乙酸盐；
[0039] (7)将子馈分F2.8.1.4经反相制备级HPLC制备(Phenomex Gemini C18column)，使 用流速为8mL/min的体积比为20:80:0.1的甲醇-水-三氟乙酸进行洗脱，得到式（II)化合物 的三氟乙酸盐；
[0040] (8)将子馈分F2.8.1.5经反相制备级HPLC制备(Cosmosil Packed C18column)，使 用流速为8mL/min的体积比为10:90:0.1的乙腈-水-三氟乙酸进行洗脱，得到式（III)化合 物和式（IV)化合物的三氟乙酸盐；
[0041] (9)将体积比40:60:6氯仿-甲醇-水洗脱得到的子馏分F2.9,过中低压液相0DS柱 层析，依次用体积比为5 :95 :0 · 1、10 :90 :0 · 1、15: 85:0 · 1、20 :80 :0 · 1、25: 75: 0 · 1、30 : 70 : 0.1、40:60:0.1和100:0:0的甲醇-水-三氟乙酸洗脱，得到卩2.9.1小2.9.2、卩2.9.3、卩2.9.4、 F2 · 9 · 5、F2 · 9 · 6、F2 · 9 · 7、F2 · 9 · 8和F2 · 9 · 9共9个子馏分；
[0042] (10)将体积比为10:90:0.1的甲醇-水-三氟乙酸洗脱得到的子馏分F2.9.2,经过 反相制备级HPLC制备(Cosmosil Packed C18column)，使用流速为8mL/min的体积比为18: 82 : 0 · 1 的甲醇-水-三氟乙酸进行洗脱，得到F2.9.2.1