益骨口服液、益骨的化合物单体以及口服液的医药应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物技术领域，具体涉及一种益骨口服液及其制备方法和医药用途。
【背景技术】
[0002] 骨质疏松症是一种以骨质减少，骨组织微细结构破坏，导致骨质脆性增加和易于 发生骨折的全身性骨代谢疾病，属于中医"骨痹"、"骨痿"范畴。中医学认为，肾为先天之本， 肾主骨生髓。《医学精义》指出"肾藏精，精生髓，髓生骨，故骨者肾之所主也；髓者，肾精所 生，精足则髓足，髓足者则骨强"。绝经后骨质疏松症发生与肾的关系密切，肾虚是骨质疏松 症的主要病机。脾为后天之本，气血生化之源，肾精依赖于脾精的滋养才能源源不断得以充 盈。若脾失健运，脾精不足，肾精乏源，骨髓空虚，势必导致骨质疏松症的发生，故脾虚也是 骨质疏松症的重要病机之一。"气虚则血不行"，绝经后妇女与年老者多气虚、血瘀，血瘀则 加速了骨质疏松症腰背疼痛的病理进程。
【发明内容】
[0003] 为了进一步挖掘、优化现有的益骨口服液，本发明旨在提供一种治疗效果更优的 益骨口服液，同时还提供了一种从自然界补骨脂草药中首次分离出来的益骨化合物单体以 及它的制备方法，另外，还提供了一种上述益骨口服液的医药用途。
[0004] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
[0005] -种益骨口服液，药用成分包括处方比例的生药和化合物单体，口服液总重量为 所述生药重量的4~6倍，化合物单体的浓度为80~120yg/mL;所述处方比例的生药包括淫 羊藿、骨碎补、生地、茯苓、仙灵脾和红花，它们的重量比为10~14:10~14:10~14:20~30: 10~14:20~30;所述的化合物单体为一种结构新颖的黄酮化合物(I )，化学结构式如下，
[0006] I X ； 〇
[0007] 进一步地，口服液总重量为生药重量的5倍，化合物单体的浓度为lOOyg/mL;所述 处方比例的生药包括淫羊藿、骨碎补、生地、茯苓、仙灵脾和红花，重量比为12:12:12:25: 12：25〇
[0008] 进一步地，所述黄酮化合物（I)的制备方法包括如下步骤：
[0009] a、将干燥的生药补骨脂粉碎，用80~90%乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无 醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯 萃取物和正丁醇萃取物；
[0010] b、步骤a中正丁醇提取物用大孔树脂除杂，先用5~15 %乙醇洗脱6~10个柱体积， 再用70~80 %乙醇洗脱8~12个柱体积，收集70~80 %洗脱液，减压浓缩得70~80 %乙醇洗 脱浓缩物；
[0011] C、步骤b中乙醇洗脱浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为65 :1、30:1、15:1和 8:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到4个组分；
[0012] d、步骤C中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为15:1、8:1和5:1的二氯 甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；
[0013] e、步骤d中组分2(即按照洗脱次序得到的第二个组分）用十八烷基硅烷键合的反 相硅胶分离，用体积百分浓度为70~80 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~12个柱体积洗脱 液，洗脱液减压浓缩得到纯的黄酮化合物(I)。
[0014] 进一步地，步骤a中，用85%乙醇热回流提取，合并提取液。
[0015] 进一步地，步骤b中，正丁醇提取物用AB-8型大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱8个 柱体积，再用75%乙醇洗脱10个柱体积，收集75%洗脱液，减压浓缩得75%乙醇洗脱浓缩 物。
[0016]进一步地，步骤e中，组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度 为75 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~12个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的黄酮 化合物(I)。
[0017] -种益骨的化合物单体，所述益骨的化合物单体为黄酮化合物，化学结构式如（I)
所示：
[0018]
[0019]
[0020] 一种上述益骨的化合物单体的制备方法，包括如下步骤：
[0021] a将干燥的生药补骨脂粉碎，用80~90%乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无 醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯 萃取物和正丁醇萃取物；
[0022] b步骤a中正丁醇提取物用大孔树脂除杂，先用5~15 %乙醇洗脱6~10个柱体积， 再用70~80 %乙醇洗脱8~12个柱体积，收集70~80 %洗脱液，减压浓缩得70~80 %乙醇洗 脱浓缩物；c步骤b中乙醇洗脱浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为65:1、30:1、15:1和 8:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到4个组分；
[0023] d步骤c中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为15:1、8:1和5:1的二氯甲 烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；
[0024] e步骤d中组分2(即按照洗脱次序得到的第二个组分）用十八烷基硅烷键合的反相 硅胶分离，用体积百分浓度为70~80 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~12个柱体积洗脱 液，洗脱液减压浓缩得到纯的黄酮化合物(I)。
[0025] 上述益骨口服液在制备防治骨质疏松症的药物中的应用。
[0026] 所述益骨的化合物单体在制备防治骨质疏松症的药物中的应用。
[0027] 与现有技术相比，本发明的优点:本发明通过在改进现有的益骨口服液的配方，并 在新的益骨口服液的配方的基础上，加入一种从补骨脂中分离纯化到的结构新颖的黄酮化 合物，显著提高了现有的益骨口服液的疗效，是对现有益骨口服液配方的一次重大升级。
[0028] 同时，从补骨脂中分离纯化到的结构新颖的黄酮化合物单体属于首次分离的新化 合物，也具有很好的益骨作用，另外由于其单体纯粹，单位含量的有效性更好，因此不仅具 有直接的药用价值，而且配上上述益骨口服液，因提取了其有效成分，进而大大提高了治疗 的有效性。可见，本发明的益骨口服液可以在相同疗效的情况下，大大降低了原来中药煎煮 的药用量，这样不仅能节省用药成本，而且还降低了用药副作用。实验结果也表明，本发明 提供的益骨口服液比现有技术中的益骨口服液更能增加去势大鼠脊柱与股骨上端骨密度。
【附图说明】
[0029]图1为化合物（I)结构式；
[0030] 图2为化合物（I)计算E⑶和实验E⑶图。
【具体实施方式】
[0031]下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0032] 主要材料、试剂来源及仪器类型：
[0033]乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷为分析纯，购自上海凌峰化学试剂有限 公司；甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司；乙醇为药用级别乙醇，所述浓度为体 积百分浓度。
[0034]实施例1:化合物(I)分离制备及结构确证
[0035] (a)将干燥的生药补骨脂(8kg)粉碎，用85%乙醇热回流提取(25LX 3次），合并提 取液，浓缩至无醇味(3L)，依次用石油醚(3L X 3次）、乙酸乙酯(3L X 3次)和水饱和的正丁醇 (3LX3次)萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物(375g);(b)步骤 (a)中正丁醇萃取物用AB-8大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱8个柱体积，再用75%乙醇洗 脱10个柱体积，收集75%洗脱液，减压浓缩得75%乙醇洗脱浓缩物（I29g);(c)步骤(b)中 75%乙醇洗脱浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为65:1 (10个柱体积）、30:1 (10个柱体 积）、15:1(8个柱体积)和8:1(10个柱体积）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到4个组分；（d)步 骤(c)中组分4(27g)用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为12:1(8个柱体积）、8:1(10个 柱体积)和5:1(8个柱体积）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2 (15g)