污染具有重要意义。
[0162] 试验方案
[0163] 评估原料：实施例三生产出的蛋白为50%的自溶单细胞蛋白，普通未自溶蛋白含 量同为50%的单细胞蛋白。
[0164] 试验饲料由"70%基础饲料+30%待测原料"组成。试验饲料中加入0. 01 %氧化 钇作为指示剂，采用逐级扩散法均匀混合于饲料粉料中。配制试验饲料时，所有原料均过40 目，用制粒机制成粒径3mm的颗粒饲料。
[0165] 试验在145升塑料水族箱中进行，水源为曝气自来水，水族箱使用充氧栗充气， 每个水族箱使用加热棒控温。每天换水2/3,保持水质清洁。试验期间水温15土1°C， pH6. 5-7. 5,溶氧> 4. Omg/1。试验鱼为虹鳟鱼。
[0166] 基础饲料及2种试验饲料共3个试验组，每组3个重复，共9个水族箱。每箱放50 尾鱼。
[0167] 试验鱼投入水族箱驯化7天后，投喂试验饲料，7天后开始正式试验。试验期间，每 天饱食投喂2次（8:30 ; 15:30)，每次投饵0. 5小时后用虹吸管将残饵吸出。每天在试验鱼 排粪高峰期收集粪便，每次用密抄网将粪便及时捞出，然后用镊子将包膜完整的粪便颗粒 挑于培养皿中，于70°C烘箱中烘干至恒重，然后将粪便放入干燥器中待以分析，直至粪便够 检测为止。
[0168] 结果计算
[0169] 试验饲料和基础饲料干物质、蛋白质表观消化率的计算公式为：
[0170] 干物质表观消化率（％ ) = 100X (1 - B/B'）
[0171] 营养成分表观消化率（％ ) = [1_(A' /A) X (B/B'）] X 100
[0172] 其中，A、B分别为饲料中某营养成分和氧化纪含量，A'、B'分别为奠便中某相应营 养成分和氧化钇含量。
[0173] 原料干物质、蛋白质及氨基酸的表观消化率计算公式为[1'2' 3]:
[0175] 式中：DT和DR分别为试验饲料和基础饲料营养成分的消化率
[0177] 结果
[0178] 从表8以看出，使用自溶工艺的单细胞蛋白的干物质及蛋白消化率得到了显著提 高，说明在自溶后细菌的细胞壁得到充分破壁，核苷酸、蛋白等营养物质游离到细胞外，从 而更易被动物所吸收。
[0179] 表 8
[0181] 实施例4:采食量试验
[0182] 通过仔猪的双料槽偏好性试验评估使用自溶工艺的菌体蛋白与普通菌体蛋白在 诱食及采食量方面的差异。仔猪的双料槽模型试验可以测定仔猪对特定原料风味的偏好， 对于仔猪来说采食其偏好的饲料可以提高采食量，进而提高生长速度。
[0183] 试验方案
[0184] 评估原料：实施例三生产出的蛋白为50%的自溶单细胞蛋白，普通未自溶蛋白含 量同为50%的单细胞蛋白。试验饲料，基础日粮为市售断奶仔猪饲料，试验饲料配比见下 表。
[0185] 试验动物：选择断奶日龄、体重接近，采食正常、健康的断奶仔猪45头，随机分成3 组。 CN 105176850 A 说明书 12/12 页
[0187] 试验方法：
[0188] 在同一栏内放入料位和规格型号相同的料槽2个（要求每个料槽的料位必须与试 验猪数量一致），分别在料槽内加入一定数量的试验饲料（要求饲料的数量必须充足，保证 2小时内不会出现饲料不够的情况），A料槽加 A料，B料槽加 B料，让猪自由采食2小时后 收集料槽中剩余的饲料并计量，然后在A料槽中加 B料，B料槽中加 A料进行上述相同的试 验。
[0189] 在试验期间观察两个料槽采食饲料猪的数量，并用摄像机和照相机跟踪拍摄两个 料槽猪采食情况和猪数量变化情况。要求：试验连续进行3~4次，每次3~4个重复。共 3~5天，或某一饲料采食结束为止。
[0190] 结果计算
[0191] 测定指标：采食量和偏嗜指数：
[0192] A日粮偏食指数=A组总采食量/B组总采食量
[0194] 试验结果显示，在实施例试验条件下，断奶仔猪对于自溶单细胞蛋白具有偏好性， 对于含有其成本饲料采食量更高，自溶出的游离核苷酸表现出了诱食效果。
【主权项】
1. 一种使用酶解罐自溶工艺生产好氧型单细胞蛋白的方法，包括沉淀浓缩步骤、干燥 步骤、灭菌步骤和粉碎包装步骤，其特征在于将生物反应器产生的菌体蛋白通过管道排入 沉淀浓缩池，菌体蛋白在锥形的浓缩池底部沉淀，底部物料含水率降低至97~98%，使用 抽料栗将浓缩池底部物料输送至自溶设备，进行自溶步骤，所述的自溶步骤如下： a) 所述自溶设备是立式酶解反应罐，向酶解罐夹层内通入蒸汽的方式进行快速升温， 升温后改为注入低压蒸汽进行保温自溶反应； b) 所述自溶设备使用框式、桨叶式或推进式的桨叶进行搅拌并保持罐内温度一致； c) 自溶的温度要求为：加热后的物料温度保持在65%~95°C; d) 自溶的时间要求为：加热段将物料升温至目标温度的时间应小于30分钟，保温段的 自溶时间应在30分钟~360分钟； 所述的灭菌步骤采用微波灭菌。2. 如权利要求1所述的一种使用酶解罐自溶工艺生产好氧型单细胞蛋白的方法，其特 征在于所述的加热后的物料温度保持在65%~80°C，自溶时间为60~180分钟。3. 如权利要求1所述的一种使用酶解罐自溶工艺生产好氧型单细胞蛋白的方法，其特 征在于所述的自溶步骤自溶时添加酶制剂以促进自溶并提高自溶产物的含量，酶制剂为蛋 白酶，添加量为酶解罐物料干物质的0. 5%~2. 0%。4. 如权利要求1所述的一种使用酶解罐自溶工艺生产好氧型单细胞蛋白的方法，其特 征在于所述的具体方法步骤的顺序如下： (1) .沉淀浓缩：将生物反应器产生的菌体蛋白通过管道排入沉淀浓缩池，菌体蛋白在 锥形的浓缩池底部沉淀，底部物料含水率降低至97~98%，可进行后续自溶工序； (2) .使用抽料栗将浓缩池底部物料输送至自溶设备； ⑶?自溶： a) 自溶设备是立式酶解反应罐，向酶解罐夹层内通入蒸汽的方式进行快速升温，升温 后改为注入低压蒸汽进行保温自溶反应； b) 所述自溶设备使用框式、桨叶式或推进式的桨叶进行搅拌并保持罐内温度一致； c) 自溶的温度要求为：加热后的物料温度保持在65%~95°C; d) 自溶的时间要求为：加热段将物料升温至目标温度的时间应小于30分钟，保温段的 自溶时间应在30分钟~360分钟； (4) .干燥：自溶后的物料通过输送栗输送至干燥设备进行干燥，所述干燥设备可为喷 雾干燥设备，所述干燥后的物料的含水率为10~20% ; (5) .灭菌：经干燥后的物料通过气流提升设备输送至隧道式微波干燥灭菌设备进行 灭菌，所述微波灭菌后物料含水率为5%~10% ; (6) .粉碎包装：灭菌后的物料经粉碎后包装成成品。5. -种采用权利要求1所述的方法制得的好氧型单细胞蛋白，其特征在于采用蛋白含 量为33% -60%的菌体蛋白制得的好氧型单细胞蛋白；蛋白含量33. 0% -60. 0%;单位蛋白 的游离核苷酸含量不低于1.40% ;单位蛋白的游离碱基含量不高于0.90% ;，游离碱基与 游离核苷酸比值范围应在〇-〇. 60。
【专利摘要】本发明涉及单细胞蛋白加工技术领域，特别是涉及一种使用酶解罐自溶工艺生产好氧型单细胞蛋白的方法，包括沉淀浓缩步骤、干燥步骤、灭菌步骤和粉碎包装步骤，使用抽料泵将浓缩池底部物料输送至自溶设备,进行自溶步骤，本发明工艺及其制成的产品使用了自溶工艺，自溶过程中自溶酶充分分解大分子营养物及细胞壁，通过自溶可以产生较高含量的游离氨基酸、游离核苷酸，同时使得细胞壁多糖被分解，使细胞产生通透性从而确保活性物质可以流出细胞外，从而可以被动物直接吸收利用。
【IPC分类】C12N1/16, A23K1/00
【公开号】CN105176850
【申请号】
【发明人】许建刚, 宋建华, 赵维韦, 张鑫杰
【申请人】台州艾希尔生物科技有限公司
【公开日】2015年12月23日
【申请日】2015年3月31日