br>[0090] 2、受试物制备
[0091] 根据临床拟用日用量，按照《保健食品检验与评价技术规范》等技术要求，通过体 表面积折算得。每个样品对小鼠喂食均设低、高剂量约分别相当于成人拟日用量的10、20 倍，口服。即为：低剂量组（1. 3g/kg)、高剂量组（2. 6g/kg)。
[0092] 阳性对照药哈伯因，临床成人用量约为0. 4mg/天，通过体表面积换算得小鼠剂量 为 0? 06mg/kg，本实验采用 0?lmg/kg。
[0093]每天灌胃给药一次（0. 2mL/10g)，连续30d后，除正常对照组外，采用东莨菪碱分 别复制小鼠记忆获得障碍模型，用Morris水迷宫（东莨菪碱所致定位航行以及空间记忆实 验）测试测定小鼠学习成绩。
[0094] 3、检测指标
[0095] Morris水迷宫实验参照文献方法进行，从第25天开始进行定位航行实验，连续测 试4d，记录小鼠在90s内寻找到平台的时间即逃避潜伏期、游泳路程，在原平台所在象限的 游泳时间比例、跨原平台所在位置的次数（即穿梭次数）和第一次到达原平台的时间。
[0096] 4、实验方法
[0097] 对记忆障碍的保护作用研究实验-水迷宫实验
[0098] 小鼠随机均分为5组，即正常对照组，模型组，低剂量组（1. 3g/kg)、高剂量组 (2. 6g/kg)、阳性对照药哈伯因组（石杉碱甲，0?lmg/kg)。每天灌胃给药一次（0? 2mL/10g)， 连续30d后，除正常对照组外，采用东莨菪碱分别复制小鼠记忆获得障碍模型，用Morris水 迷宫（东莨菪碱所致定位航行以及空间记忆实验）测试测定小鼠学习成绩。
[0099] 5、统计学分析
[0100] 所有实验数据均以I赶表示，采用方差分析，先进行方差齐性检验，计算F值，F值 <匕。5，结论：各组均数间差异无显著性；F值彡匕。5,P< 0. 05,用多个实验组和一个对照 组间均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待 满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正态或方差 齐的目的，改用秩和检验进行统计。
[0101] 6、结果判定
[0102] 根据《保健食品检验与评价技术规范》（2003年版），根据以下标准判定受试样品 具有改善记忆障碍的作用。
[0103] 本发明组合物对记忆障碍的保护作用研究实验结果具有统计学意义，结果如下表 5-表7中所示：
[0104] 表5对小鼠水迷宫游泳潜伏期（s)的影响（定位航行试验）（$士S,n= 12)
[0105]
[0106] 注：与正常对照组相比，Ap〈0. 05,AAp〈0. 01 ;与模型组相比，*p〈0. 05, #p〈0. 01。
[0107] 表6对小鼠水迷宫游泳路程（cm)的影响（定位航行试验）（I士n= 12)
[0108]
[0109] 注：与正常对照组相比，Ap〈0. 05,AAp〈0. 01 ;与模型组相比，*p〈0. 05, #p〈0. 01。
[0110] 由表5、6可以看出，在为期4天的认知训练中，随着训练时间的延长，各组小鼠的 游泳潜伏期和游泳路程均逐渐缩短，说明小鼠记忆障碍模型成功建立。与模型组相比，产品 各剂量组小鼠的潜伏期均有缩短，但未见统计学差异。
[0111] 表7对氢溴酸东莨菪碱所致小鼠记忆获得障碍的影响（空间探索试验）（5士S，n =12)
[0112]
[0113] 注：与正常对照组相比，"^〈0. 05，"^〈0. 01;与模型组相比，*p〈0. 05, #p〈0. 01。
[0114] 由表7可以得出，与正常对照组小鼠相比，模型对照组小鼠在原平台所在象限的 游泳时间明显缩短（P〈〇. 05)，第1次达平台的时间明显延长（p〈0. 01)，小鼠穿越原平台 所在位置的次数明显减少（P〈〇. 01)。与模型对照组相比，产品低、高剂量组小鼠在原平台 所在象限的游泳时间有延长的趋势（P>〇. 05);产品低、高剂量组小鼠第1次达平台的时间 明显缩短（P〈〇. 05);小鼠穿越原平台的次数明显增加（p>0. 05)。阳性药哈伯因组则能使 小鼠第1次达平台的时间明显延长（P〈〇. 05)，小鼠穿越原平台所在位置的次数明显减少 (p〈0. 05)。提示东莨菪碱损伤了小鼠的空间记忆能力，而产品可翻转东莨菪碱对小鼠空间 记忆功能的损伤。说明本实验中检测样品对东莨菪碱模型小鼠的记忆障碍均有一定的改善 作用，实验组动物给药剂量与中毒存活时间呈现剂量-效应关系，高剂量组存活时间升高 显著。
[0115] 在本实施例中，各组动物适应性喂养3d后，灌胃给药，正常对照组和模型对照组 分别灌胃给予等体积〇. 5 %CMCNA，每日给药1次，灌胃体积0. 2mL/10g体重，连续给药30 天。Morris水迷宫实验参照文献方法进行，从第25天开始进行定位航行实验，连续测试4d， 记录小鼠在90s内寻找到平台的时间即逃避潜伏期、游泳路程，在原平台所在象限的游泳 时间比例、跨原平台所在位置的次数（即穿梭次数）和第一次到达原平台的时间。各组有 显著性差异，呈现较明显的剂量-效应关系，且以高剂量组效果显著。
[0116] 根据《保健食品检验与评价技术规范》（2003年版），本动物实验研究结论为受试 样品具有改善记忆的作用。
[0117] 实施例7 :本发明所述组合物对记忆获得的保护作用动物实验
[0118] 记忆力减退的主要症状是学习记忆障碍，现代研究常借助学习记忆障碍动物模 型，并通过益智学指标测定检验一种药物治疗记忆力减退的效果。
[0119] 根据《保健食品检验与评价技术规范》（2003年版），对实验动物进行记忆获得障 碍模型，跳台法测定其学习成绩。各组之间结果具有显著性差异，判定受试样品具有改善记 忆力的功效。
[0120] 本发明组合物的两个剂量组在小鼠跳台实验中各组指标有显著性差异，呈现较明 显的剂量-效应关系，且以高剂量组效果显著。本动物实验研究结论为受试样品具有改善 记忆的功效。
[0121] 1、动物分组
[0122] 小鼠随机均分为5组，即正常对照组，模型组，低剂量组、高剂量组、阳性对照药哈 伯因组（石杉碱甲，0.lmg/kg)。每天灌胃给药一次（0.2mL/10g)，连续30d后，除正常对照 组外，采用5mg/kg的氢溴酸东莨菪碱分别复制小鼠记忆获得障碍模型，跳台法测定小鼠学 习成绩。
[0123] 2、受试物制备
[0124] 根据临床拟用日用量，按照《保健食品检验与评价技术规范》等技术要求，通过体 表面积折算得。每个样品对小鼠喂食均设低、高剂量约分别相当于成人拟日用量的10、20 倍，口服。即为：低剂量组（1. 3g/kg)、高剂量组（2. 6g/kg)。
[0125] 阳性对照药哈伯因，临床成人用量约为0. 4mg/天，通过体表面积换算得小鼠剂量 为 0? 06mg/kg，本实验采用 0?lmg/kg。
[0126] 3、检测指标
[0127] 以跳台仪测试记录小鼠第一次跳下时间（即潜伏期）及小鼠5min内跳下次数（即 错误次数），以潜伏期及错误次数作为该实验的考察指标。
[0128] 4、实验方法
[0129] 经筛选过的健康成年昆明小鼠60只，体重（20-24)g，雄性，每组12只。小鼠 随机均分为5组，即正常对照组（C)，模型组（M)，低剂量组（1.3g/kg)、高剂量组（2.6g/ kg)、阳性对照药哈伯因组（石杉碱甲，0.lmg/kg)。除