之功效，再佐以具有改善脑代谢提高记忆力的核桃酶解提取物、 提高细胞膜流动性增强可塑性的功能因子磷脂酰丝氨酸和改善记忆力的牛磺酸，共同达到 改善记忆力的目的，各种原料均为药食同源和新资源食品，安全无毒副作用可长期作为保 健食品食用。
【具体实施方式】
[0033] 本发明公开了一种具有改善记忆力功能的组合物及其制备方法和应用，本领域技 术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和 改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明所述组合 物及其制备方法和应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明 内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用 本发明技术。
[0034] 以下就本发明所提供的一种具有改善记忆力功能的组合物及其制备方法和应用 做进一步说明。
[0035] 实施例1:本发明组合物
[0036] 1、原料
[0037] 龙眼肉400份、莲子600份、茯苓500份、核桃酶解提取物50份、磷脂酰丝氨酸30 份、牛磺酸10份。
[0038] 2、制备方法
[0039] (1)核桃酶解提取物的制备
[0040] 按重量向1份核桃柏中加入10-15份的水，过胶体磨得到核桃柏浆液，加入NaOH 溶液（lmol/L)调整核桃柏浆液pH至8. 0-9. 0,在40-50°C下搅拌60-90min，然后在3500r/ min下离心lOmin，过滤得到上清液；往上清液加入占核桃柏总重1 %的a-淀粉酶和占核 桃柏总重0. 5%纤维素酶进行进行酶法除杂，之后加入HC1溶液（lmol/L)将pH调至4. 2， 搅拌30-60min，离心分离，得到沉淀物，采用一定浓度乙醇进行搅拌，并用水进行清洗，喷雾 干燥，得到核桃蛋白。
[0041] 核桃蛋白加水搅拌，以2000_3000U/g蛋白计量加入碱性内切蛋白酶Alcalase 2. 4L(购于诺维信）、以1200-2500U/g蛋白计量加入复合蛋白酶Protamex(购于诺维信）， 于50-55°C下水解至水解度8-12%，灭酶，离心后收集上清液为核桃蛋白酶解液。
[0042] 将核桃蛋白酶解液过100目滤布，然后通过膜通量lOOOODa的超滤膜，收集透过 液，再通过膜通量l〇〇〇Da的超滤膜，收集截留液，得到核桃多肽溶液，真空浓缩至固形物 30-40 %，进行喷雾干燥，获得核桃酶解提取物。
[0043] (2)将原料药龙眼肉、茯苓、莲子经水煮提取浓缩喷雾干燥后，加入牛磺酸、磷脂酰 丝氨酸和核桃酶解提取物混合均匀，获得所述组合物。
[0044] 实施例2 :本发明中药组合物
[0045] 1、原料
[0046] 龙眼肉600份、莲子500份、茯苓600份、核桃酶解提取物80份、磷脂酰丝氨酸100 份、牛磺酸40份。
[0047] 2、制备方法
[0048] 同实施例1。
[0049] 实施例3 :本发明中药组合物
[0050] 1、原料
[0051] 女龙眼肉200份、莲子800份、茯苓200份、核桃酶解提取物150份、磷脂酰丝氨酸 10份、牛磺酸50份。
[0052] 2、制备方法
[0053] 同实施例1。
[0054] 实施例4:本发明中药组合物
[0055]1、原料
[0056] 龙眼肉800份、莲子200份、茯苓800份、核桃酶解提取物10份、磷脂酰丝氨酸150 份、牛磺酸3份。
[0057]2、制备方法
[0058] 同实施例1。
[0059] 实施例5:本发明所述组合物对大鼠长期毒性实验研究
[0060]1、受试样品：实施例1组合物；
[0061] 2、受试动物：SPF级wistar大鼠，体重：100-150g，140只，雌雄各半，由广州中山 大学实验动物中心提供；
[0062] 3、实验设计依据《保健食品检验与评价技术规范实施手册》（2003版）中"食品安 全性毒理学评价程序规定"进行；
[0063] 4、剂量设计及分组设空白对照组，AS1322-02保健食品低、中、高剂量组。取检疫合 格的动物称重，每组20只，雌雄各半。具体剂量为（1. 33g?kg\4. 0g?kg\8. 0g?kg4， 相当于人推荐用量的（10倍、30倍、60倍）。
[0064] 5、给药方法受试样品以蒸馏水溶解并稀释至设定剂量浓度，经口灌胃喂食。每日 同一时段灌胃喂食1次，灌胃体积为2ml每100g体重。试验期间，每周称体重1次，按体重 调整灌胃体积，连续喂食90天。末次喂食后各组动物空腹15h，第二天取材。
[0065] 6、组合物对大鼠一般状态及体重的影响
[0066] 各组雌性和雄性动物的精神状态均良好，毛色光洁，活动自如，呼吸均匀，摄食量 及粪便未见明显异常，口鼻内无异常分泌物。与空白对照组比较，各受试样品组动物体重无 显著差异（P均>〇. 05)，增重均匀，详见表1。
[0067] 表1组合物对大鼠体重的影响（g，n= 20,s )
[0068]
[0069] 注：组间比较无显著性差异。
[0070] 7、组合物对大鼠脏器系数的影响
[0071] 如表2所示，与空白对照组比较，受试品各剂量组大鼠的心脏、肝、脾脏、肺、脑、肾 脏系数无显著差异（P均>〇. 05)。
[0072] 表2组合物对大鼠脏器系数的影响（n= 20, [士s )
[0073]
[0074] 注：组间比较无显著性差异。
[0075] 8、组合物对大鼠血常规的影响
[0076] 如表3所示，与空白对照组比较，受试品各剂量组的红细胞计数（RBC)、血红蛋白 含量（HGB)、血小板计数（PLT)、（BA)、白细胞计数（WBC)、淋巴细胞相对计数（LY)、单核细胞 相对计数（MO)、中性粒细胞相对计数（NE)、嗜酸性粒细胞（E0)无显著差异（P均>0. 05)。
[0077] 表3组合物对大鼠血常规的影响
[0078]
[0080] 注：组间比较无显著性差异。
[0081] 9、组合物对大鼠血生化的影响
[0082] 如表4所示，与空白对照组比较，受试品各剂量组的碱性磷酸酶（ALP)、血糖 (GLU)、尿素氮（BUN)、肌酐（CREA)、丙氨酸转氨酶（ALT)、门冬氨酸转氨酶（AST)、总胆红素 (TBIL)、总蛋白质（TP)、白蛋白（ALB)、总胆固醇（CH0L)无显著差异（P均>0.05)。
[0083] 表4对大鼠血生化的影响
[0084]
[0085] 注：组间比较无显著性差异。
[0086] 综合上述结果，在本实验条件及剂量范围内，长期给予本发明组合物未影响实受 试大鼠的一般状态及体重，未对主要脏器、及血液系统造成明显的毒性，导致任何毒性反 应，提示按推荐剂量长期服用组合物的安全性较高。
[0087] 实施例6 :本发明所述组合物对记忆障碍的保护作用动物实验
[0088] 1、动物分组
[0089] 小鼠随机均分为5组，即正常对照组、模型组、低剂量组、高剂量组、阳性对照药哈 伯因组（石杉碱甲，0.lmg/kg)。每天灌胃给药一次（0.2mL/10g)，连续30d后，除正常对照 组外，采用东莨菪碱分别复制小鼠记忆获得障碍模型，用Morris水迷宫（东莨菪碱所致定 位航行以及空间记忆实验）测试测定小鼠学习成绩。<