续 7d。随机分为模型组、UM404(50mg ? kg 3、UM404(200mg ? kg 3、SUM404(50mg ? kg 3、 SUM404 (200mg ? kg ^、阳性组，模型组和正常组灌胃0. 9%的生理盐水，阳性组灌胃左旋咪 唑（25mg ? kg ^，灌胃给药量为0. 2mL/只，1次/d，连续给药30d。末次给药后小鼠禁食不 禁水12h。测定脾和胸腺指数、碳粒廓清吞噬指数及其它各项指标。
[0032] (5)相关指标测定：
[0033] 1.小鼠体重增长量和免疫器官指数测定
[0034] 末次给药后第2天，称小鼠体重，然后将小鼠脱颈处死。小鼠取血后处死，取其肝 脏、脾脏及胸腺并称重，分别计算脏器指数。脏器指数=脏器质量/体质量X100。
[0035] 2. SUM404对免疫低下小鼠巨噬细胞吞噬功能影响
[0036] 昆明小鼠末次给药后禁食不禁水，12h后分别称重，同时按0. lmL/10g体重的剂量 在小鼠尾静脉注射稀释3倍的印度墨汁，lmin和10min后，分别从小鼠的眼眶静脉丛取血 20 y L，用2. OmL的0. 01 % Na2C03溶液稀释摇匀，以Na 20)3溶液作空白对照，在600nm波长 处测吸光度值（Ap A1Q)。计算碳粒廓清指数K，K = (logAi logA1Q) / (t1Q _ h)。
[0037] 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力测定，昆明小鼠末次给药后禁食12h，不禁水，每鼠腹 腔注射2%鸡红细胞悬液lmL，30min后脱颈椎处死。经腹腔注入生理盐水2mL，轻揉腹部 lmin。然后，各吸2mL腹腔洗液，分滴于2片载玻片上，于37°C培养箱温育30min。孵毕，用 生理盐水漂洗，吹干，以丙酮：甲醇（v/v, 1:1)溶液固定，用4% Giemsa-磷酸缓冲液（v/v) 染色，蒸馏水漂洗晾干。油镜下阅片计数，计算吞噬百分率和吞噬指数。
[0038] 吞噬百分率（％ )=[吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数/计数的巨噬细胞数]X 100%;
[0039] 吞噬指数=被吞噬的鸡红细胞总数/计数的巨噬细胞数。
[0040] 3. SUM404对免疫低下小鼠体液免疫功能影响
[0041] 昆明小鼠于首次灌胃后第26d，每只小鼠腹腔注射0.2mL 10% (v/v)SRBC致敏离 血清，免疫4d后，第30d末次给药后禁食不禁水12h，分别摘眼球，收集血液，4°C冰箱内放 置2h后，3500r/min离心15min，分离血清，按血清：生理盐水=1:100 (v/v)稀释后，测定 血清溶血素含量，计算绵羊红细胞半数溶血值（HC50)。
[0042] HC50 =(样品的吸收度值/SRBC半数溶血时的吸收度值）X稀释倍数
[0043] 小鼠抗体生成细胞测定，小鼠被采血后，迅速摘取其脾脏，用冰生理盐水冲洗干 净，配制成15mg/mL的脾细胞悬液。在试管中依次加入2%绵羊红细胞悬液和10%豚鼠血 清各0. 5mL。另设不加补体的空白对照管，于37°C水浴lh，3000r/min离心10min，取其上清 液于413nm处测定A od〇
[0044] 4. SUM404对免疫低下小鼠细胞免疫功能的影响
[0045] 末次给药后禁食不禁水12h，脱颈椎处死昆明小鼠。无菌取脾，制备脾细胞悬液，以 RPMI-1640完全培养基调整细胞浓度为5 X 106个/mL。将脾细胞悬液分2孔加入24孔培养 板，每孔lmL。其中，一孔加ConA液（终浓度为2. 5ug/mL)，另一孔作为对照，温度为37°C， 于5 % C02培养箱内培养68h，再加入MTT继续培养4h，以酸化异丙醇溶解活细水溶性紫色 结晶，570nm处测定A值。淋巴细胞的增殖能力（AA) =AGcinA-A对照。
[0046] 同批昆明小鼠，同2. 3. 3法，免疫4d后，再次给药后用0. 2mL 10% (v/v)SRBC，于 末次给药后，将小鼠禁食不禁水24h后，在同一部位将左后及右后足剪下称重，计算两只后 足的重量差
[0047] 5.小鼠血清、肝、肾和脾组织匀浆中抗氧化物酶活等指标测定
[0048] 小鼠被迷晕后摘眼球取血，5000r/min离心5min，取血清放于-20°C备用，同时取 出小鼠肝、肾、脾组织，分别加0. 9%的生理盐水，制备10%的组织匀浆（m/v)，5000rpm离心 lOmin取上清液。室温（25°C)下，按照试剂盒说明书进行操作，测定超氧化物歧化酶（SOD) 活力、GSH-PX酶活、丙二醛（MDA)含量。
[0049] (6)药理实验结果：
[0050] 1. SUM404对小鼠免疫器官指数和体重的影响
[0051] 与正常对照组相比，注射环磷酰胺的模型对照组小鼠的免疫器官指数显著下降 (p〈0. 01)，饲养过程中小鼠皮毛稀疏、无光泽，小鼠体重明显低于正常组，说明环磷酰胺注 射液可造成小鼠的免疫器官萎缩，抑制小鼠体重增加，成功地建立了小鼠的免疫低下模型。
[0052] 如表1所述，与模型组小鼠相比，各剂量组小鼠毛色光滑，脾、胸腺/体重和体重比 值均有不同程度的提高，其中高剂量SUM404组的脏器指数提高了 11. 76%和39. 8%，具有 显著差异（P〈〇. 05)，表明一定剂量的粒毛盘菌黑色素对免疫机能低下模型小鼠的免疫器官 重量有促进作用，能有效恢复胸腺器官的发育。
[0053] 表1. SUM404对小鼠免疫器官指数和体重的影响
[0054]
[0055] 注：#P〈0.05,与模型组相比，##P〈0.01，与模型组相比；*P〈0.05,与正常对照组相 比TP〈0.01，与正常对照组相比?
[0056] 2. SUM404对小鼠非特异性免疫影响
[0057] 与正常组小鼠相比，环磷酰胺模型组小鼠碳廓清指数降低了 38. 95%。与模型组相 比，各剂量药物组均可提小鼠高碳廓清指数，揭示一定剂量的SUM404能显著促进免疫低 下模型小鼠的非特异性吞噬功能。
[0058] 如表2所示，模型组小鼠腹腔巨噬细胞率和吞噬指数分别为21. 33±0. 98和 0. 502±0. 03,均极显著低于正常小鼠的水平（p〈0. 01)，说明模型组小鼠的非特异性免疫功 能低下。各给药组均可不同程度地升高环磷酰胺致免疫低下小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬百分 率和吞噬指数。
[0059] 表2. SUM404对小鼠非特异性免疫影响
[0060]
[0061] 注：#P〈0. 05,与正常组相比，P〈0. 01，与正常组相比；>〈0. 05,与模型对照组相 比TP〈0. 01，与模型对照组相比.
[0062] 3. SUM404对小鼠体液免疫的影响
[0063] 与正常组小鼠相比，环磷酰胺模型组小鼠HC5。降低了 12. 2%，表明小鼠体液免疫 机能下降。与模型组相比，高剂量SUM404组可显著提高小鼠HC5。值（p〈0. 05)。表明粒毛 盘菌黑色素具有促进B细胞分裂增殖和分化及分泌绵羊红细胞抗体的作用。
[0064] 如表3所示，抗体生成细胞由正常值0. 67降低至模型组的0. 48,表明环磷酰胺 模型组小鼠抗体生成细胞含量明显下降，与正常组相比差异极显著（P〈〇. 01)。各剂量 SUM404组均能够不同程度地促进小鼠抗体生成细胞，揭示粒毛盘菌黑色素对小鼠B细胞 介导的体液免疫作用具有增强作用。
[0065] 表3. SUM404对小鼠体液免疫的影响
[0066]
[0068] 注：#P〈0. 05,与正常组相比，P〈0. 01，与正常组相比；>〈0. 05,与模型对照组相 比Tp〈o.oi，与模型对照组相比。
[0069] 4. SUM404对小鼠细胞免疫的影响
[0070] 腹腔注射环磷酰胺后，模型小鼠淋巴细胞转化率为0.054±0. 001，均极显著低于 正常小鼠的水平（p〈o. 01)，说明模型组小鼠的淋巴细胞转化率较低。各给药组小鼠淋巴细 胞转化率均可不同程度地提高，说明SUM404可提高免疫低下小鼠的细胞免疫水平。
[0071] 如表4所述，与模型组小鼠相比，正常组小鼠的足跖重量显著升高（p〈0. 05)， SUM404的低、高剂量组足跖增重值分别增加了（％ ) 7. 18、42. 87,表明SUM404对T细胞介 导的免疫应答反应具有促进作用。
[0072] 表4. SUM404对小鼠细胞免疫的影响
[0073]
[0075] 注：#P〈0.05,与正常组相比；##P〈0.01，与正常组相比；*P〈0.05,与模型对照组相 比TP〈0.01，与模型对照组相比.
[0076] 5. SUM404对小鼠体内各组织内抗氧化酶活性的影响
[0077] 如表5所示，与正常组小鼠细胞，模型组小鼠