制成 除臭剂组合物。
[0077] 参照W下实施例进一步描述了本发明。应当理解,运些实施例并非旨在W任何方 式对权利要求书所保护的本发明进行限制。
[0078] 技术人员将认识到运些实施例的多种变型形式,W涵盖各种各样的配方、配料、工 序和混合物,W针对多种应用合理调整本发明化合物的天然存在水平。
[0079] 实施例1:富含葡糖胺的植物组合物(植物水浸提取物)的制备
[0080] 将200g市售干菊宦根切块(0.5 X 0.5 X 0.5cm)浸泡在0.5M硫酸锭溶液中3小时。排 出溶液后,将切块放在容器中,容器正上方放置封盖。然后,将运个密闭容器放入溫度为75 °C的烘箱(宾德公司(Binder))中48小时。
[0081] 然后打开容器,将切块铺展开(IOcm切块层)W在同一烘箱中进行干燥,溫度保持 在 75°C。
[0082] 室溫下用200mL水提取2g粉末状的经加工的菊宦根30分钟。离屯、后,冷冻干燥上清 液。
[0083] 所得的富含葡糖胺的植物组合物即为植物水浸提取物(在下文中称为化合物A)。
[0084] 实施例2:富含葡糖胺的植物组合物(植物水醇提取物)的制备
[0085] 将200g市售干菊宦根切块(0.5 X 0.5 X 0.5cm)浸泡在0.5M硫酸锭溶液中3小时。排 出溶液后,将切块放在容器中,容器正上方放置封盖。然后,将运个密闭容器放入溫度为75 °C的烘箱(宾德公司(Binder))中48小时。
[0086] 然后打开容器,将切块铺展开(IOcm切块层)W在同一烘箱中进行干燥,溫度保持 在 75°C。
[0087] 室溫下用IOOmL水:乙醇(50:50)提取20g粉末状的经加工的菊宦根60分钟。离屯、 后,使用旋转蒸发仪除去液相中的乙醇,所得的水溶液进行冷冻干燥。
[0088] 所得的富含葡糖胺的植物组合物即为植物水醇提取物(在下文中称为化合物B)。 [00例实施例3:植物水浸提取物和/或植物水醇提取物的杀生物活性的测定
[0090]使用实施例1和实施例2中获得的干燥植物提取物(即分别为植物水浸提取物和植 物水醇提取物)制备W下测试化合物:
[0091 ]-化合物A:实施例1所得的富含葡糖胺的植物组合物,其为植物水浸提取物,有扣 g/mL和50yg/mL两种浓度;
[0092] -化合物B:实施例2所得的富含葡糖胺的植物组合物,其为植物水醇提取物,有扣 g/mL和50]ig/mL两种浓度。
[0093] W所述两种浓度(即扣g/mL或50yg/mL)将每种测试化合物单独或组合施用给在37 °C、5%C02条件下进行体外培养的正常人表皮角质形成细胞(NHEK)24小时。
[0094] 随后除去培养上清液,用憐酸盐缓冲液(PBS)漂洗细胞层,然后将细胞放入无菌无 RNA酶的管中并立即在-80 °C下冷冻。
[00M]使用从每个处理条件下的细胞中提取的信使RNA,通过RT-Q-PCR(反转录定量聚合 酶链反应)评估所关注蛋白质(即S100A7)的合成前体的表达。
[0096] 结果通过与相应的未处理对照条件对比来显示。
[0097] 反转录:
[0098] -根据供应商推荐的方案使用化iPure Isolationi?eagew^提取每个样品的总 RNA ;
[0099] -通过用无DNA的体系(Ambion公司)处理来消除痕量的潜在污染性DNA;
[0100] -在oligo(dT)和Superscript II酶(G;Lbco公司)存在的情况下进行mRNA反转录反 应。
[0101] 定量 PCR:
[0102] 通过使用"Light切cler"体系(罗氏分子系统公司(Roche Molecular Systems Inc.))的定量PCR并根据制造商推荐的程序进行PCR反应。
[0103] 本研究中所用的生物标志物为SlOO巧结合蛋白A7(即S100A7),它被认为是一种代 表性的抗微生物蛋白(AMP),它在皮肤中的表达受损会造成皮肤感染的敏感性提高( Gl&er et al.,The Antimicrobial Protein Psoriasin (S100A7)Is Upregulated in Atopic Dermatitis and after Eperimental Skin Barrier Disruption,J. Invest Dermatol. (2009) 129,64^649( G巧ser等人/'在特应性皮炎中W及实验性皮肤屏障破坏后,牛皮癖素 (S100A7)运种抗微生物蛋白被上调",《皮肤病学研究杂志》,2009年,第129卷,第641-649 页))。
[0104] 根据下式,从两个独立PCR循环的值计算得到相对表达量的平均值,W任意单位表 示:
[0105] (1/2欄'数)Xl〇6。
[0106] 生物标志物S100A7相对于未处理对照条件的差异表达的结果如下:
[0108] 因此,如上表所示,响应于单独或组合的两种不同浓度(即扣g/mL和50iig/mL)的化 合物A和化合物B的富含葡糖胺的植物组合物,在所有条件下在N皿K中均明显观察到编码 S100A7(其存在与杀生物效果相关)的mRNA的诱导。
[0109] 还注意到,在50yg/mL浓度下,与水浸提取物(即化合物A)相比,化合物B(水醇提取 物)的富含葡糖胺的植物组合物取得了更好的效果。
【主权项】
1. 用作杀生物剂的富含葡糖胺的植物组合物。2. 根据权利要求1使用的富含葡糖胺的植物组合物,所述富含葡糖胺的植物组合物用 于皮肤病和/或粘膜病的治疗或预防。3. 根据权利要求1或2使用的富含葡糖胺的植物组合物,所述富含葡糖胺的植物组合物 用于刺激皮肤和/或粘膜的抗微生物肽或蛋白的合成。4. 根据权利要求1至3中任一项使用的富含葡糖胺的植物组合物,所述富含葡糖胺的植 物组合物用于痤疮和/或头皮肩的治疗和/或预防。5. 根据权利要求1至4中任一项使用的富含葡糖胺的植物组合物,其中所述富含葡糖胺 的植物组合物包含至少5g葡糖胺/kg干物质。6. 根据权利要求1至5中任一项使用的富含葡糖胺的植物组合物,其中所述植物为植物 部分,所述植物部分选自叶、块茎、果实、种子、根、谷粒或细胞培养物。7. 根据权利要求1至6中任一项使用的富含葡糖胺的植物组合物,其中所述富含葡糖胺 的植物组合物为植物水醇提取物。8. 根据权利要求1至7中任一项使用的富含葡糖胺的植物组合物,其中所述富含葡糖胺 的植物组合物为植物根部水醇提取物。9. 根据权利要求1或8使用的富含葡糖胺的植物组合物,其中所述富含葡糖胺的植物组 合物的形式为颗粒剂、粉剂、片剂、包衣片剂、胶囊剂、栓剂、糖浆剂、乳剂、凝胶剂、软膏剂、 混悬剂、霜剂、气雾剂、滴剂或可注射形式。10. 根据权利要求1或9使用的富含葡糖胺的植物组合物,所述富含葡糖胺的植物组合 物用于局部使用。11. 根据权利要求1或9使用的富含葡糖胺的植物组合物,所述富含葡糖胺的植物组合 物用于口服。12. 根据权利要求9使用的富含葡糖胺的植物组合物,其中所述富含葡糖胺的植物组合 物还包含非病原性微生物。13. 根据权利要求1至12中任一项使用的富含葡糖胺的植物组合物,其中所述植物为菊 苣。14. 富含葡糖胺的植物组合物用于预防和/或减少体臭的用途。15. 根据权利要求14所述的用途,其中所述富含葡糖胺的植物组合物包含至少5g葡糖 胺/kg干物质。
【专利摘要】本发明涉及富含葡糖胺的植物组合物,以及所述富含葡糖胺的植物组合物在例如皮肤病和/或粘膜病的治疗中作为杀生物剂的用途。本发明还涉及富含葡糖胺的植物组合物用于预防和/或减少体臭的用途。
【IPC分类】A61P17/00, A61K31/7008, A61Q19/00, A61K8/97
【公开号】CN105682638
【申请号】
【发明人】Y·马埃, P·E·布朗, J·哈森, D·库尔图瓦
【申请人】雀巢产品技术援助有限公司
【公开日】2016年6月15日
【申请日】2014年11月4日