一种低碳生产类胡萝卜素的方法_3

文档序号:9882334阅读:来源:国知局
层厚度2cm、105°C、干燥2min,然后浸泡在质量百分比为10%的丝胶肽溶液中lOmin,于-18°C冷冻20min后立即进行粉碎,冷冻料层厚度3cm,粉碎物粒径0.3mm,接着加入粉碎物质量I倍的水,用乳酸调节pH值为3.5,于室温下在电场强度251^/011,脉冲时间30(^8,脉冲频率200取条件下进行高压脉冲电场处理20min;然后于室温在功率150W条件下进行微波辐照提取15min,同时在功率200W,频率30KHz条件下进行超声波辅助提取;加入提取液质量3 %的混合酶,于40 0C酶解30min,过滤,得果汁;
[0060]所述混合酶为纤维素酶、蛋白酶、果胶酶、单宁酶按质量比2:2:1:1均匀混合;
[0061 ] 2)发酵培养基制备:向步骤I)制备的果汁中加入其质量5 %的保护剂、I %的蔗糖、0.5%的硫酸铵、2 %的磷酸二氢钾、0.5 %的氯化钙和0.5 %的硫酸镁得发酵培养基;
[0062]所述保护剂的制备方法,包括如下步骤:将冬黑麦、沙冬青、黄芪、党参、淫羊藿、鱼腥草分别清洗、沥干,按质量比8:5:4:3: 2:1均匀混合,加入混合物料质量0.1倍的pH值为3.8的乳酸润湿3h,于-18 °C冷冻Ih后立即进行粉碎,冷冻料层厚度3cm,粉碎物粒径0.5mm,接着加入粉碎物质量10倍的水,用乳酸调节pH值为3.5,于室温下在电场强度25kV/cm,脉冲时间300ys,脉冲频率200Hz条件下进行高压脉冲电场处理20min;然后于室温在功率150W条件下进行微波辐照提取15min,其中,微波辐照1s,间隔20s;同时在功率200W,频率30KHz条件下进行超声波辅助提取;加入提取液质量I %的复配酶,于45 V酶解30min;酶解液过滤、滤液浓缩、低温粉碎至粒径为0.1mm即得保护剂;
[0063]所述复配酶为纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、单宁酶按质量比3:2:1:1:1均匀混合;
[0064]3)发酵、均质破壁:向步骤2)发酵培养基中加入其质量0.2%的活性干红酵母粉控制温度30°C、搅拌转速50r/min,恒温发酵12h,接着以0.8°C/min的速率升温至40 V,加入发酵培养基质量0.1 %的活性干红酵母粉恒温静止发酵3h,最后以0.6°C/min的速率降温至28°C,继续静止发酵15h,发酵液依次经40目、80目双联过滤器过滤,滤液经超高压均质机于20C、145MPa均质破壁得均质液;
[0065]所述活性干红酵母粉是以海洋红酵母CCTCC No=M 2014592为出发菌按常规方法制备的;
[0066]所述活性干红酵母粉制备过程中使用的保护剂为步骤2)中制备的保护剂;
[0067]4)破乳、分离提取:将均质液置真空离心机中6000r/min真空离心lOmin,自上而下分离得到游离油、乳状液、水解液和固体残渣,将得到的乳状液控制温度为30°C,添加乳状液质量0.01%的生物破乳剂破乳40111;[11,破乳后于20001'/1]1;[11再次真空离心81]1;[11得到游离油和乳状液,合并所得的游离油另作它用,所得乳状液经提取、分离、纯化后得到成品类胡萝卜素;
[0068]所述真空离心条件为温度12°C、真空度-0.0lMPa;
[0069]所述生物破乳剂的质量组成为:糖脂类:脂肽类:胞壁结合类=3:2:1;
[0070]所述糖脂类生物破乳剂的质量组成为:鼠李糖脂:烷基糖苷=4:1。
[0071]上述方法制备的发酵液中的细胞生物量和乳状液中类胡萝卜素的进行检测:细胞生物量为51g/L;类胡萝卜素产量为58mg/L。
[0072]实施例3
[0073]—种低碳生产类胡萝卜素的方法,包括如下步骤:
[0074]I)果汁制备:首先将黄桃残次果肉切片,然后与黄桃皮按质量比3:1均匀混合,放入微波干燥机中于功率5kW、料层厚度4cm、115 °C、干燥4min,然后浸泡在质量百分比为14%的丝胶肽溶液中15min,于-22 °C冷冻40min后立即进行粉碎,冷冻料层厚度5cm,粉碎物粒径0.5mm,接着加入粉碎物质量3倍的水,用乳酸调节pH值为5.5,于室温下在电场强度35kV/cm,脉冲时间500ys,脉冲频率300Hz条件下进行高压脉冲电场处理30min;然后于室温在功率300W条件下进行微波辐照提取20min,同时在功率300W,频率40KHz条件下进行超声波辅助提取;加入提取液质量5 %的混合酶,于50°C酶解50min,过滤,得果汁;
[0075]所述混合酶为纤维素酶、蛋白酶、果胶酶、单宁酶按质量比4:4:3:3均匀混合;
[0076]2)发酵培养基制备:向步骤I)制备的果汁中加入其质量9%的保护剂、3%的蔗糖、1.5%的硫酸铵、4%的磷酸二氢钾、1.5%的氯化钙和1.5%的硫酸镁得发酵培养基;
[0077]所述保护剂的制备方法,包括如下步骤:将冬黑麦、沙冬青、黄芪、党参、淫羊藿、鱼腥草分别清洗、沥干,按质量比10:7:6:5:4:3均匀混合,加入混合物料质量I倍的pH值为4.5的乳酸润湿Sh,于_22°C冷冻2h后立即进行粉碎,冷冻料层厚度5cm,粉碎物粒径3mm,接着加入粉碎物质量20倍的水,用乳酸调节pH值为5.5,于室温下在电场强度35kV/cm,脉冲时间500ys,脉冲频率300Hz条件下进行高压脉冲电场处理30min;然后于室温在功率300W条件下进行微波辐照提取20min,其中,微波辐照10s,间隔20s;同时在功率300W,频率40KHz条件下进行超声波辅助提取;加入提取液质量2 %的复配酶,于55 °C酶解50min;酶解液过滤、滤液浓缩、低温粉碎至粒径为0.3_即得保护剂;
[0078]所述复配酶为纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、单宁酶按质量比5:4:3:3:2均匀混合;
[0079]3)发酵、均质破壁:向步骤2)发酵培养基中加入其质量0.4%的活性干红酵母粉控制温度34°C、搅拌转速100r/min,恒温发酵15h,接着以1.0 °C /min的速率升温至42 °C,加入发酵培养基质量0.3 %的活性干红酵母粉恒温静止发酵5h,最后以0.8 °C/min的速率降温至32 °C,继续静止发酵20h,发酵液依次经40目、80目双联过滤器过滤,滤液经超高压均质机于40C、155MPa均质破壁得均质液;
[0080]所述活性干红酵母粉是以海洋红酵母CCTCC No=M 2014592为出发菌按常规方法制备的;
[0081]所述活性干红酵母粉制备过程中使用的保护剂为步骤2)中制备的保护剂;
[0082]4)破乳、分离提取:将均质液置真空离心机中8000r/min真空离心15min,自上而下分离得到游离油、乳状液、水解液和固体残渣,将得到的乳状液控制温度为50°C,添加乳状液质量0.03%的生物破乳剂破乳60111;[11,破乳后于30001'/1]1;[11再次真空离心121]1;[11得到游离油和乳状液,合并所得的游离油另作它用,所得乳状液经提取、分离、纯化后得到成品类胡萝卜素;
[0083]所述真空离心条件为温度18°C、真空度_0.03MPa;
[0084]所述生物破乳剂的质量组成为:糖脂类:脂肽类:胞壁结合类=5:4:3;
[0085]所述糖脂类生物破乳剂的质量组成为:鼠李糖脂:烷基糖苷=6:2。
[0086]上述方法制备的发酵液中的细胞生物量和乳状液中类胡萝卜素的进行检测:细胞生物量为45g/L;类胡萝卜素产量为52mg/L。
[0087]实施例4
[0088]—种利用黄桃皮发酵生产类胡萝卜素的方法,包括如下步骤:
[0089]I)果汁制备:首先将黄桃皮放入微波干燥机中于功率3kW、料层厚度4cm、105°C、干燥4min,然后浸泡在质量百分比为10%的丝胶肽溶液中15min,于-18°C冷冻40min后立即进行粉碎,冷冻料层厚度3cm,粉碎物粒径0.5mm,接着加入粉碎物质量I倍的水,用乳酸调节pH值为5.5,于室温下在电场强度25kV/cm,脉冲时间500ys,脉冲频率200Hz条件下进行高压脉冲电场处理30min ;然后于室温在功率150W条件下进行微波福照提取20min,同时在功率200W,频率40KHz条件下进行超声波辅助提取;加入提取液质量3%的混合酶,于50°C酶解30min,过滤,得果汁;
[0090]所述混合酶为纤维素酶、蛋白酶、果胶酶、单宁酶按质量比2:4:1:3均匀混合;
[0091 ] 2)发酵培养基制备:向步骤I)制备的果汁中加入其质量5 %的保护剂、3 %的蔗糖、
0.5%的硫酸铵、4%的磷酸二氢钾、0.5%的氯化钙和1.5%的硫酸镁得发酵培养基;
[0092]所述保护剂的制备方法,包括如下步骤:将冬黑麦、沙冬青、黄芪、党参、淫羊藿、鱼腥草分别清洗、沥干,按质量比8:7:4:5: 2:3均匀混合,加入混合物料质量0.1倍的pH值为4.5的乳酸润湿3h,于-22°C冷冻Ih后立即进行粉碎,冷冻料层厚度3cm,粉碎物粒径3mm,接着加入粉碎物质量10倍的水,用乳酸调节pH值为5.5,于室温下在电场强度25kV/cm,脉冲时间500ys,脉冲频率200Hz条件下进行高压脉冲电场处理30min;然后于室温在功率150W条件下进行微波辐照提取20min,同时在功率200W,频率40KHz条件下进行超声波辅助提取;加入提取液质量I %的复配酶,于55 °C酶解30min;酶解液过滤、滤液浓缩、低温粉碎至粒径为
0.3_即得保护剂;
[0093]所述复配酶为纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、单宁酶按质量比3:4:1:3:1均匀混合;
[0094]3)发酵、均质破壁:向步骤2)发酵培养基中加入其质量0.2%的活性干红酵母粉控制温度34°C、搅拌转速50r/min,恒温发酵15h,接着以0.8°C/min的速率升温至42°C,加入发酵培养基质量0.1 %的活性干红酵母粉恒温静止发酵5h,最后以0.6°C/min的速率降温至280C,继续静止
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