，频率30-40KHZ条件下进行超声波辅助提取;加入提取液质量1-2 %的复配酶，于45-55 °C酶解30-50min;酶解液过滤、滤液浓缩、低温粉碎至粒径为0.1-0.3_即得保护剂；
[0023]所述复配酶为纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、单宁酶按质量比3-5:2-4:1-3:1-3:1-2均匀混合；
[0024]更优选地，所述微波辐照提取为间歇式提取，即微波辐照1s，间隔20s;
[0025]3)发酵、均质破壁:向步骤2)发酵培养基中加入其质量0.2-0.4%的活性干红酵母粉控制温度30-34°C、搅拌转速50-100r/min，恒温发酵12-15h，接着以0.8-1.0°C/min的速率升温至40-420C，加入发酵培养基质量0.1-0.3%的活性干红酵母粉恒温静止发酵3-5h，最后以0.6-0.8°C/min的速率降温至28-32°C，继续静止发酵15-20h，发酵液依次经40目、80目双联过滤器过滤，滤液经超高压均质机于2-4°(:、145-15510^均质破壁得均质液；
[0026]进一步地，所述活性干红酵母粉是以中国专利CN105039484 A公开的海洋红酵母CCTCC No = M 2014592为出发菌按常规方法制备的；
[0027]优选地，活性干红酵母粉制备过程中使用的保护剂为步骤2)中制备的保护剂；
[0028]4)破乳、分离提取:将均质液置真空离心机中6000-8000r/min真空离心10-15min，自上而下分离得到游离油、乳状液、水解液和固体残渣，将得到的乳状液控制温度为30-500C，添加乳状液质量0.01-0.03%的生物破乳剂破乳40-60min，破乳后于2000_3000r/min再次真空离心8-12min得到游离油和乳状液，合并所得的游离油另作它用，所得乳状液经提取、分离、纯化后得到成品类胡萝卜素。
[0029]进一步地，所述真空离心条件为温度12_18°C、真空度-0.01—0.03MPa;
[0030]进一步地，所述生物破乳剂为糖脂类、脂肽类、胞壁结合类生物破乳剂中的一种或几种组合；
[0031 ]优选地，所述生物破乳剂的质量组成为:糖脂类:脂肽类:胞壁结合类=3-5: 2-4:1-3;
[0032]优选地，所述糖脂类生物破乳剂为鼠李糖脂、烷基糖苷中的一种或两种组合；
[0033]更优选地，所述糖脂类生物破乳剂的质量组成为:鼠李糖脂:烷基糖苷=4-6:1-2;
[0034]按照中国专利CN105039484A所公开的细胞生物量的检测方法及类胡萝卜素的测定方法对上述制备的发酵液中的细胞生物量和乳状液中类胡萝卜素的进行检测:细胞生物量为38-52g/L;类胡萝卜素产量为47-61mg/L。
[0035]有益效果:
[0036]本发明以黄桃罐头下脚料为原料，首先采用微波干燥在使得下脚料膨化干燥的同时主要是灭酶、固色，最大限度地保留了下脚料的天然色泽和类胡萝卜素的含量，经微波固色后的下脚料天然色泽在后续的加工过程中非常稳定，不会变色、褪色，类胡萝卜素含量相当稳定，损失极低;在含有丝胶肽的水溶液中浸泡复水，可最大限度地减少经冷冻而造成的下脚料活性物质的损失，提高了下脚料有效成分的提取率，同时也为后续变温活性干红酵母发酵奠定了坚实基础;将高压脉冲电场、微波、超声、生物酶解等低温提取技术有机结合，可最大限度地保留下脚料的类胡萝素等生物活性成分含量和营养成分，有效防止加工过程杂菌污染;在发酵培养基中科学复配保护剂，可显著提高海洋红酵母抗冷、热应激性、抗病性和免疫力，使其快速活化、复壮，实现红酵母数量和质量最大化，进而实现类胡萝素的高产化；以高产类胡萝卜素的海洋红酵母为发酵剂，采用变温发酵和分次接种方式可有效缩短延滞期和衰老期时间，大大延长了对数生长期和稳定期，最大限度地获取海洋红酵母增殖和类胡萝卜素的最大积累，提高其增殖能力和活菌存活率;通过超高压均质破壁海洋红酵母细胞，破壁率高，类胡萝素释放量大;将采用真空离心和生物破乳有机结合，显著提高了类胡萝卜素的提取率，提高了原料利用率，降低了提取成本。在提高产品质量和提取率的同时增加了微生物油脂等提取后副产物的种类、产量和附加值，进一步降低了类胡萝卜素的提取成本，杜绝了“三废”的排放，保护了环境，真正实现了低碳生产。
[0037]按照中国专利CN105039484A所公开的细胞生物量的检测方法及类胡萝卜素的测定方法对本发明制备的发酵液中的细胞生物量和乳状液中类胡萝卜素的进行检测:细胞生物量为38-52g/L;类胡萝卜素产量为47-61mg/L。
[0038]本发明的制备方法简单，周期短、效率高、节省能源、对环境友好，全程采用低温、生物加工技术，有效避免了下脚料中类胡萝卜素、维生素等热敏性营养物质的损失，提高了类胡萝卜素的提取率及生物活性和营养物质含量，提高了产品的产量和质量，降低了生产成本，同时本发明还提供了一种分离得到微生物油脂的方法，具有较好的实用性和先进性。
[0039]需要说明的是本发明的技术效果是各个步骤技术特征协同作用的总和，各步骤之间具有一定的内在相关性，并非单个技术特征效果的简单叠加。
[0040]还需要说明的是本发明以黄桃罐头下脚料为原料制备类胡萝素，为黄桃的深加工开辟了一条新的捷径，有效减轻了加工企业的负担，显著降低了生产成本，增加了产品的附加值，消除了环境污染隐患，为黄桃的深加工技术领域的可持续发展奠定了坚实的基础，具有积极的经济和社会发展意义。
【具体实施方式】
[0041]下面通过具体的实施方案叙述本发明。除非特别说明，本发明中所用的技术手段均为本领域技术人员所公知的方法。另外，实施方案应理解为说明性的，而非限制本发明的范围，本发明的实质和范围仅由权利要求书所限定。对于本领域技术人员而言，在不背离本发明实质和范围的前提下，对这些实施方案中的物料成分和用量进行的各种改变或改动也属于本发明的保护范围。
[0042]实施例1
[0043]—种利用黄桃皮发酵生产类胡萝卜素的方法，包括如下步骤:
[0044]I)果汁制备:首先将黄桃皮放入微波干燥机中于功率4kW、料层厚度3cm、110°C、干燥3min，然后浸泡在质量百分比为12%的丝胶肽溶液中12min，于-20°C冷冻30min后立即进行粉碎，冷冻料层厚度4cm，粉碎物粒径0.4mm，接着加入粉碎物质量2倍的水，用乳酸调节pH值为4.5，于室温下在电场强度30kV/cm，脉冲时间400ys，脉冲频率250Hz条件下进行高压脉冲电场处理25min;然后于室温在功率200W条件下进行微波辐照提取18min，同时在功率250W，频率35KHz条件下进行超声波辅助提取；加入提取液质量4%的混合酶，于45°C酶解40m in，过滤，得果汁；
[0045]所述混合酶为纤维素酶、蛋白酶、果胶酶、单宁酶按质量比3:3:2:2均匀混合；
[0046]2)发酵培养基制备:向步骤I)制备的果汁中加入其质量7 %的保护剂、2 %的蔗糖、I %的硫酸铵、3 %的磷酸二氢钾、I %的氯化钙和I %的硫酸镁得发酵培养基；
[0047]所述保护剂的制备方法，包括如下步骤:将冬黑麦、沙冬青、黄芪、党参、淫羊藿、鱼腥草分别清洗、沥干，按质量比9:6:5:4:3: 2均匀混合，加入混合物料质量0.5倍的pH值为
4.2的乳酸润湿5h，于-20 °C冷冻1.5h后立即进行粉碎，冷冻料层厚度4cm，粉碎物粒径2mm，接着加入粉碎物质量15倍的水，用乳酸调节pH值为4.5，于室温下在电场强度30kV/cm，脉冲时间400ys，脉冲频率250Hz条件下进行高压脉冲电场处理25min;然后于室温在功率200W条件下进行微波辐照提取18min，其中，微波辐照10s，间隔20s;同时在功率250W，频率35KHz条件下进行超声波辅助提取;加入提取液质量I.5 %的复配酶，于50 °C酶解40min;酶解液过滤、滤液浓缩、低温粉碎至粒径为0.2_即得保护剂；
[0048]所述复配酶为纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、单宁酶按质量比4:3:2:2:1.5均匀混合；
[0049]3)发酵、均质破壁:向步骤2)发酵培养基中加入其质量0.3%的活性干红酵母粉控制温度32 °C、搅拌转速80r/min，恒温发酵13h，接着以0.9 V /min的速率升温至41°C，加入发酵培养基质量0.2 %的活性干红酵母粉恒温静止发酵4h，最后以0.7 °C/min的速率降温至30°C，继续静止发酵18h，发酵液依次经40目、80目双联过滤器过滤，滤液经超高压均质机于30C、150MPa均质破壁得均质液；
[0050]所述活性干红酵母粉是以海洋红酵母CCTCC No=M 2014592为出发菌按常规方法制备的；
[0051]所述活性干红酵母粉制备过程中使用的保护剂为步骤2)中制备的保护剂；
[0052]4)破乳、分离提取:将均质液置真空离心机中7000r/min真空离心12min，自上而下分离得到游离油、乳状液、水解液和固体残渣，将得到的乳状液控制温度为40°C，添加乳状液质量0.02%的生物破乳剂破乳50111；[11，破乳后于25001'/1]1；[11再次真空离心101]1；[11得到游离油和乳状液，合并所得的游离油另作它用，所得乳状液经提取、分离、纯化后得到成品类胡萝卜素；
[0053]所述真空离心条件为温度15°C、真空度_0.02MPa;
[0054]所述生物破乳剂的质量组成为:糖脂类:脂肽类:胞壁结合类=4:3:2;
[0055]所述糖脂类生物破乳剂的质量组成为:鼠李糖脂:烷基糖苷=5:1.5。
[0056]上述方法制备的发酵液中的细胞生物量和乳状液中类胡萝卜素的进行检测:细胞生物量为52g/L;类胡萝卜素产量为61mg/L。
[0057]实施例2
[0058]一种利用残次黄桃果肉发酵生产类胡萝卜素的方法，包括如下步骤:
[0059]I)果汁制备:首先将残次黄桃果肉切片，放入微波干燥机中于功率3kW、料