浓度在一个较宽的范围内调节，活 性化合物的含量范围为药物组合物的1 %~90 % (重量）。
[0034] 有益效果：
[0035]本发明相对于现有技术，具有以下的优点和有益效果:本发明所示的二咖啡酰亚 精胺环化衍生物是新的二咖啡酰亚精胺环化衍生物，本发明通过生物活性测试实验表明本 发明的二咖啡酰亚精胺环化衍生物具有抗老年痴呆活性和抗氧化活性，其活性甚至还优于 阳性对照药物或与阳性对照药物相当，可显著改善老年痴呆患者的认知功能，适合用于老 年痴呆及神经退行性疾病的预防及治疗。
【具体实施方式】
[0036]以下实施例旨在说明本发明而不是本发明进一步的限定，本发明可以按
【发明内容】
所述的任一方式实施。
[0037] 下列实施例中，质谱仪为德国Finnigan公司生产的LCQ Advantage MAX质谱仪。超 导核磁共振仪为Bruker AV-600。柱色谱HP-20大孔树脂为日本Mitsubishi公司产品。薄层 色谱用硅胶GF254和柱色谱硅胶(200-300目）均为青岛海洋化工厂产品。反相0DS填料(50μ m)为日本YMC公司产品。中低压液相色谱仪为上海利穗电子科技有限公司产品。液相分离所 使用制备级色谱柱为Cosmosil Packed Ci8C〇lumn(20 ·0 X 250mm，5μηι)。液相色谱用甲醇为 色谱纯，水为双重蒸馏水，其他试剂均为分析纯。
[0038]实施例1式(II)和式(III)化合物的制备
[0039] 19.5kg枸杞子用100L乙醇-水(60:40，v/v)加热回流提取3次，每次2小时。过滤后， 滤液经减压浓缩得浓缩液。浓缩液经大孔树脂柱层析，依次用体积比为0:100、30:70、50: 50、70:30和95:5的乙醇-水洗脱，得到5个馏分FI、F2、F3、F4、F5。接下来对体积比为30:70的 乙醇-水洗脱得到的馏分F2，取70.0克F2进行常压硅胶柱层析，依次用体积比为95:5:0、90: 10:1、85:15:1.5、80:20:2、70:30:3、60:40:4、50:50:5、40:60:6 和0:100:0 的氯仿-甲醇-水 洗脱，得到？2.1小2.2、？2.3小2.4、？2.5小2.6、？2.7小2.8、？2.9和?2.10共10个子馏分。然 后将体积比40:60:6氯仿-甲醇-水洗脱得到的子馏分F2.9(3.8g)过中低压液相0DS柱层析， 依次用体积比为5:95:0 · 1、10:90:0 · 1、15:85:0 · 1、20:80:0 · 1、25:75:0 · 1、30:70:0 · 1、40: 60:0 · 1和100:0:0的甲醇-水-三氟乙酸洗脱，得到 F2 · 9 · 1、F2 · 9 · 2、F2 · 9 · 3、F2 · 9 · 4、F2 · 9 · 5、 F2.9.6、F2.9.7、F2.9.8和F2.9.9共9个子馏分。将体积比为15:85:0.1的甲醇-水-三氟乙酸 洗脱得到的子馏分F2.9.6(105.5mg)经过反相制备级HPLC制备，使用流速为8mL/min的甲 醇-水-三氟乙酸(20:80:0.1，v/v/v)进行洗脱，得到式（II)化合物(tR: 24.5min，12.3mg，纯 度95% )和式（III)化合物(tR: 29· 2min，5 · lmg，纯度95% )的三氟乙酸盐。
[0040] 理化常数如下：
[0041 ] 式（II)化合物的三氟乙酸盐：绿色油状液体；[a ] f -23. S (c0.50，MeOH) ;UV (MeOH)Amax(l〇ge)204(4.33),294(3.95),320(3.92)nm；IR(KBr)vmax 3375,2933,2873, 1679,1508,1432,1287,1200,1132,1077,801,722cm _1；ESIMS(positive)m/z 632.6；ESIMS (negative)m/z 630.4；HRESIMS(positive)m/z 632.2820(caled.for C31H42N3O11, 632.2819)，确定该化合物（II)的分子式为C31H4iN30n; 13C和1H NMR见表1。
[0042] 式（III)化合物的三氟乙酸盐：绿色油状液体；[-25. 0 (c0.50，Me0H);UV (MeOH)Amax(l0ge)204(4.29),293(3.85),319(3.82)nm；IR(KBr)vmax 3347,2935,2874, 1678,1508,1432,1282,1199,1132,1073,801,722cm_1；ESIMS(positive)m/z 794.7；ESIMS (negative)m/z 792.6；HRESIMS(positive)m/z 794.3362(calcd. for C37H52N3O16, 794.3348)，确定该化合物（III)的分子式为C37H51N 3016; 13C和1H NMR见表1。
[0043] 表1式(II)和式(III)化合物的13C NMR及1H NMR数据和归属
[0044]
[0045]
[0046] aSin ppm，J in Hz，1!! NMR(600MHz)，13C NMR(150MHz)，in DMS〇-d6.
[0047] *Assignment may be interchanged.
[0048] 实施例2二咖啡酰亚精胺环化衍生物提高老年痴呆果蝇学习记忆活性测试方法
[0049] (1)老年痴呆果蝇的培育
[0050] w1118(iS〇CJl)作为实验的对照组背景果蝇，简记为"2U"。成功转入致病性Αβ 42蛋白 的果蝇为(UAS-Ai342;简记为"Η29.3"）。该品系果蝇通过与全脑表达Gal4启动子果蝇进行杂 交，获得携带elav-GAL4Gl55(P35)与Αβ42的果蝇品系。
[0051 ] (2)老年痴呆果蝇的给药
[0052] 试验设置健康果蝇无药对照、疾病果蝇无药对照和疾病果蝇给药的三种组别。
[0053] 所有测试果绳的亲本均在恒温24°C，恒湿42%RH(Relative humidity)的绳房饲 养和繁殖。果蝇羽化后的第一天将对照组果蝇及疾病组果蝇和待喂药组果蝇通过二氧化碳 麻醉之后，挑选正确性状的果蝇在含有食物的玻璃管中。在给药阶段，所有测试果蝇在28 °C恒温和42%恒湿的保温箱内饲养，以保证果蝇吃药的效率。每日果蝇喂药4小时，从挑出 果蝇的第二天一直喂药到第8天。
[0054] 所喂药物在挑蝇第二天配制并与配制当天给果蝇喂药。100%DMS0溶解使其浓度 为10mM。在配制工作液时，利用含有4%的蔗糖将10mM母液稀释至100μΜ。另外，对照组果蝇 喂含有1%DMS0的糖水。对于每个行为指数(Performance Index)，需要有2管果绳组，每管 中含有约100只果蝇。
[0055] 实验在恒温25°C、恒湿70%，避光的行为房中进行，方法可见参考文献[1^3]。
[0056] 1)在训练阶段，将100只左右的果蝇装入安置有铜网交叉电极的训练管，先后通入 辛醇(0CT)和甲基环己醇(MCH)两种气味各60s，中间间隔45s的新鲜空气。在通入第一种气 味(CS+)的同时给予果蝇60V的脉冲电击刺激(US，脉冲时长1.5s，间隔3.5s)。通入第二种气 味(CS-)时不给予电击。如此完成一个训练周期。
[0057] 2)在瞬时记忆(学习）能力测试中，完成一个训练周期的果蝇被立即转移到T-Maze 的选择点，同时从相对的两个方向通入CS+和CS-。经过2min的选择后两侧的果蝇被分别收 集，麻醉或处死后进行计数。行为指数(Performance index，PI)的计算公式如下：PI = [(CS-)-(CS+)]/[(CS-)+(CS+)]XIOOo
[0058]分别使用OCT和MCH作为CS+进行训练和测试，得到的两个PI的平均值作为一次实 验的PI使用。PI = 〇表示测试中果蝇对于两种气味的选择为50:50,即没有形成记忆;PI = 100表示测试中果蝇全部逃避伴随电击的气味，即完美记忆。进行活性测试时，同时进行不 喂药的同遗传背景健康蝇(2U*H29.3)、不喂药的老年痴呆疾病蝇(P35*H29.3)、喂测试药的 老年痴呆疾病蝇的嗅觉短期记忆缺陷测试，分别计算它们的总学习记忆行为指数(PI)。将 喂测试药的老年痴呆疾病蝇学习记忆行为指数与不喂药的同遗传背景健康蝇（2U*H29.3) 行为指数、不喂药的老年痴呆疾