面差异无统计学意义(P>〇.05)，具有可比性），分别服用不 同纯化方法制备的南天竹总生物碱提取物制成的片剂，一次2片，一日3次，3天为一个疗程， 3个疗程结束后统计疗效，疗效评定标准同实验例1。
[0073] 2、实验结果
[0074] 2.1不同纯化方法制得的南天竹总生物碱提取物
[0075] 不同纯化方法制得的南天竹总生物碱提取物的质量及纯度见表2。
[0076] 表2不同纯化方法制备的南天竹总生物碱提取物
[0078] 结果表明，本发明第（1)种纯化方法采用大孔树脂柱吸附纯化，将稠膏用2%硫酸 (体积分数)溶解，过DlOl大孔树脂柱吸附，再用95%乙醇洗脱，得到的南天竹总生物碱提取 物总量比其他纯化方法高23.3个百分点，且总生物碱纯度也较高，含总生物碱以小檗碱计 为68.9 % (即小檗碱占总生物碱提取物的质量比）。
[0079] 2.2不同纯化方法制备的南天竹总生物碱提取物治疗咽炎的效果
[0080] 临床疗效的比较结果见表3。
[0081 ]表3不同纯化方法制备的南天竹总生物碱提取物治疗咽炎的效果
[0083]结果表明，采用第（1)种纯化方法得到的南天竹总生物碱提取物治疗咽炎的效果 明显1?于另外其他纯化方法，治疗总有效率达98.0%
[0084]实验例3南天竹总生物碱提取物治疗急性咽炎
[0085]将临床诊断为急性咽炎的患者60名（主要症状：咽部粘膜充血，肿胀，粘液腺分泌 物增多等），服用实施例9制备的南天竹总生物碱提取物片剂，一次2片，一日3次，3天为一个 疗程，结果治疗3个疗程的总有效率达98.3%。
[0086]实验例4南天竹总生物碱提取物治疗急性咽炎
[0087]将临床诊断为急性咽炎的患者43名（主要症状：咽部粘膜充血，肿胀，咽痛，发热 等），服用实施例8的南天竹总生物碱提取物制备的片剂(按实施例9制备片剂），一次2片，一 日3次，3天为一个疗程，结果治疗3个疗程的总有效率达97.7%。
[0088]实验例5对氨水致慢性咽炎大鼠模型试验
[0089]将体重为150g~200g的雄性大鼠70只，随机按表5分组，每组10只，灌胃给药(其中 南天竹总生物碱提取物为实施例5制备），每天1次，连续7天。在给药后第1、3、5天，分别在各 组大鼠（对照组除外）咽部均匀涂抹15%氨水，每天1次，每次持续时间约5秒，末次灌胃给药 后24小时，处死动物，取咽部组织置于10%福尔马林中固定进行病理学观察，按表4的标准 进行打分。
[0090] 表4咽炎评分标准
[0092]南天竹总生物碱提取物对氨水致大鼠慢性咽炎的影响见表5。显微镜下可见，对照 组大鼠咽喉部粘膜上皮为复层扁平上皮，覆盖较薄的角化层，粘膜固有层内有较多的粘液 腺;未见粘膜充血、溃疡、炎细胞浸润、淋巴滤泡增生、纤维增生、粘液腺肥大等病理改变。模 型组多数标本明显可见粘膜充血、炎细胞（以浆细胞、巨噬细胞为主)浸润以及淋巴滤泡增 生现象，伴有一定程度的纤维增生及粘液腺肥大的改变，上述病变符合慢性咽炎的病理表 现。其粘膜充血、炎细胞浸润、淋巴滤泡增生以及总评分，均显著高于对照组，有统计学意 义。南天竹总生物碱提取物各剂量组可在一定上改善咽炎模型大鼠咽喉部的粘膜充血、炎 细胞浸润以及淋巴滤泡增生等现象;其中南天竹总生物碱提取物2.64g/kg和5.28g/kg的作 用较好，在减少炎细胞浸润以及总评分方面与模型组比较有统计学意义。
[0093]表5南天竹总生物碱提取物对氨水致大鼠慢性咽炎的影响(X土s)
[0095] 注：与模型组比较，*P〈0 · 05，林P〈0 · 01。
[0096] 实验例6小鼠耳廓肿胀试验
[0097]昆明种小鼠50只，雌雄各半，随机分为模型对照组，南天竹总生物碱提取物高、中、 低剂量组(其中南天竹总生物碱提取物为实施例5制备），阿司匹林阳性对照组。将药物充分 溶于双蒸水中，南天竹总生物碱提取物高、中、低剂量分别为4.92，2.46，1.23g · kg^1;阿司 匹林剂量为〇.27g · kg、模型对照组给予双蒸水。给药1次/d，连续3d。末次给药后lh，于各 小鼠右耳耳廓正反面各滴二甲苯0.05mL，Ih后颈椎脱位法处死小鼠，在左、右两耳耳廓相同 部位用4.5_打孔器取下耳片并称重，左右耳质量之差为肿胀度。
[0098]试验结果(见表6)显示，南天竹总生物碱提取物高、中剂量组可抑制二甲苯诱发的 小鼠耳廓炎性肿胀，且随药物剂量的增加，抑制作用增强，作用强于阿司匹林。
[0099]表6南天竹总生物碱提取物对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响(X土s，n = 10)
【主权项】
1. 一种南天竹总生物碱提取物，由以下制备方法制得:将南天竹原料粉碎，加入乙醇进 行提取，收集提取液，回收乙醇，即得;其特征在于:加入乙醇进行提取时，所述乙醇为体积 分数50-95 %乙醇。2. 按照权利要求1所述的南天竹总生物碱提取物，其特征在于:加入乙醇进行提取时， 所述乙醇为体积分数70-95 %乙醇;优选为体积分数75 %乙醇。3. 按照权利要求1所述的南天竹总生物碱提取物，其特征在于:所述乙醇的加入量为南 天竹原料质量的6-16倍;优选为南天竹原料质量的10倍。4. 按照权利要求1所述的南天竹总生物碱提取物，其特征在于，所述南天竹原料包括： 南天竹的根、茎、叶或果实中的任意一种或多种按照任意比例组成的混合物。5. 按照权利要求1所述的南天竹总生物碱提取物，其特征在于，所述制备方法还包括： 将回收乙醇后的提取液进行纯化;其中，所述纯化的方法选自以下（1)-(3)方法中的任意一 种： (1) 将回收乙醇后的提取液浓缩为稠膏，用体积分数0.5-5%硫酸或盐酸溶解，滤过，收 集滤液;将滤液过大孔树脂柱吸附，水洗至中性，再用体积分数70-95 %乙醇洗脱，收集洗脱 液，减压回收乙醇，真空干燥，即得； 优选的，将回收乙醇后的提取液浓缩为稠膏，用体积分数2%硫酸溶解，滤过，收集滤 液;将滤液过D101大孔树脂柱吸附，水洗至中性，再用体积分数95%乙醇洗脱，收集洗脱液， 减压回收乙醇，真空干燥，即得； (2) 将回收乙醇后的提取液浓缩为稠膏，用体积分数0.5-5%硫酸或盐酸溶解，滤过，收 集滤液;将滤液过强酸性阳离子交换树脂柱吸附，水洗除杂;取出树脂，用体积分数5-10% 氨水乙醇回流提取，减压浓缩，真空干燥，即得； 优选的，将回收乙醇后的提取液浓缩为稠膏，用体积分数0.5%硫酸溶解，滤过，收集滤 液;将滤液过强酸性阳离子交换树脂柱吸附，水洗除杂;取出树脂，用体积分数5%氨水乙醇 回流提取，减压浓缩，真空干燥，即得； (3) 将回收乙醇后的提取液浓缩为稠膏，用体积分数0.5-5%硫酸或盐酸溶解，滤过，收 集滤液;将滤液用弱碱调pH值为8-12，静置24-48小时，滤过，取滤渣，水洗至中性，再用10-16倍重量的体积分数90-100%乙醇溶解，减压回收乙醇，真空干燥，即得； 优选的，将回收乙醇后的提取液浓缩为稠膏，用体积分数3%硫酸溶解，滤过，收集滤 液;将滤液用氨水调pH值为9-11，静置24小时，滤过，取滤渣，水洗至中性，再用12倍重量的 体积分数95%乙醇溶解，减压回收乙醇，真空干燥，即得。6. 按照权利要求5所述的南天竹总生物碱提取物，其特征在于:所述稠膏在50°C时的相 对密度为1.25-1.30。7. 权利要求1至6任何一项所述的南天竹总生物碱提取物在制备治疗咽炎的药物中的 应用。8. 按照权利要求7所述的应用，其特征在于，所述药物按照中药常规制剂方法制备成适 宜的临床制剂，优选为口服制剂；更优选的，所述口服制剂包括:片剂、喷雾剂、颗粒剂、丸 剂、胶囊剂或口服液。9. 按照权利要求7所述的应用，其特征在于，所述咽炎包括：急性咽炎或慢性咽炎中的 任意一种或两种。10.-种治疗咽炎的药物组合物，其特征在于，包括:治疗上有效量的权利要求1至6任 何一项所述南天竹总生物碱提取物和药学上可接受的辅料。
【专利摘要】本发明公开了一种南天竹总生物碱提取物及其在制备治疗咽炎药物中的应用，属于南天竹总生物碱提取物的制备及应用领域。本发明首先公开了一种南天竹总生物碱提取物，通过将南天竹原料粉碎后用乙醇进行提取而制备得到。本发明优化了提取所用乙醇的浓度，优化结果表明75％乙醇提取的南天竹总生物碱提取物治疗咽炎的总有效率最高，与其它浓度相比差异显著。本发明进一步将用乙醇提取得到的南天竹总生物碱提取物进行纯化，发现用大孔树脂柱纯化得到的南天竹总生物碱提取物的质量及纯度最高，对于咽炎的疗效也最为显著。本发明南天竹总生物碱提取物对咽炎具有良好的治疗作用，能够应用于制备治疗咽炎的药物。
【IPC分类】A61K36/29, A61P11/04
【公开号】CN105641014
【申请号】
【发明人】陈仕云, 阳杰, 高雅
【申请人】合肥学院
【公开日】2016年6月8日
【申请日】2016年1月13日