养基的制备
[0052] 该培养基每升中包含市售平板计数琼脂23. 5g，蔗糖脂肪酸酯 (SE-ll)0.00 5g-0. 015g，2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑（TTC)0.00 5g-0. 015g ;
[0053] 按上述各组分称量后，无先后顺序溶于蒸馏水中，煮沸溶解，调节pH值为 7. 0±0. 2,高压灭菌后备用，高压灭菌条件为：115°C，15min。
[0054] 实施例3 :
[0055] 对照组培养基（也即国标GB4789. 2-2010《食品安全国家标准食品微生物学检 验菌落总数测定》中所规定使用的平板计数琼脂培养基）：将市售平板计数琼脂23. 5g溶 于1000 mL蒸馏水中，加热溶解，调节pH为7. 0±0. 2,高压灭菌后备用，高压灭菌条件为： 115。。，15min〇
[0056] 实验组：实施例2所得。
[0057] 样品稀释：称取25. Og黄原胶（食品添加剂单体，胶体，粉末状）置盛有225mL生 理盐水的无菌均质杯内，l〇〇〇〇r/min均质lmin，制成1:10重量体积比的样品勾液。用ImL 无菌微量移液器吸取所得样品匀液lmL，沿管壁缓慢注于盛有9mL稀释液的无菌试管中（注 意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其混合 均匀，制成1:100的样品匀液。以此类推，制成相应10倍系列稀释样品匀液。
[0058] 倒平板：根据样品的物理性质（如粘度）、污染程度等来选择样品的稀释度。本实 验由于样品粘度较高，有一定污染，所以选择1:100稀释度的样品匀液，做成对照组和试验 组。吸取ImL样品匀液于相应组别的无菌平皿内，及时将15mL~20mL冷却至46°C的培养 基（可放置于46°C ±1°C恒温水浴箱中保温）倾注到相应的平皿中，对照组内倾注对照组 培养基0,实验组倾注实施例1所得培养基；并转动平皿使其混合均匀。每组做二十个平 行测定，每组都有空白对照。
[0059] 培养：待琼脂凝固后，将平皿翻转，于36°C ±1°C下培养48h±2h。
[0060] 计数、结果：依据国标GB4789. 2-2010《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落 总数测定》中6. 3菌落计数和7结果与报告进行计数与报告。两组琼脂组检测结果和数据 比对分别如下表3、表4所示：
[0061] 表3 :两组琼脂组的检测结果表
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[0064] 表4 :两组琼脂组的数据比对结果表
[0066] 备注：采用数理统计学中的成组数据t检验对试验均值进行显著性差异检验，首 先进行方差齐性 F 检验，= 9X10)/ (1. 0X10 )=1. 836<Fltim_ij I =2. 464,说明两 组数据方差具备齐性；在α = 5%的水平下，t = 0. 613〈t3S/2，Q.Q5= 2. 024,所以两组数据 (即菌落报告数）在95%置信度下差异不显著。
[0067] 从表3和表4可以看出，本发明的菌落显色培养基在原有的市售平板计数琼脂中 加入了蔗糖脂肪酸酯SE-11，2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑（TTC)后，在运用中所得的菌落总数 结果与国标GB4789. 2-2010《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》中所规 定使用的平板计数琼脂培养基（对照组）所得的结果差异不显著，其菌落显色为红色或浅 红色，边界清晰，菌落显色明显，易于计数。
[0068] 实施例4 :
[0069] 对照组培养基（也即国标GB4789. 2-2010《食品安全国家标准食品微生物学检 验菌落总数测定》中所规定使用的平板计数琼脂培养基）：将市售平板计数琼脂23. 5g溶 于1000 mL蒸馏水中，加热溶解，调节pH为7. 0±0. 2,高压灭菌后备用，高压灭菌条件为： 115。。，15min〇
[0070] 实验组：实施例2所得。
[0071] 样品稀释：称取25. Og蔗糖脂肪酸酯（SE-11，食品添加剂单体，乳化剂，粉末状） 置盛有225mL生理盐水的无菌均质杯内，10000r/min均质lmin，制成1:10重量体积比的样 品匀液。用ImL无菌微量移液器吸取所得样品匀液lmL，沿管壁缓慢注于盛有9mL稀释液的 无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管或换用1支无菌吸管反复 吹打使其混合均匀，制成1:100的样品匀液。以此类推，制成相应10倍系列稀释样品匀液。
[0072] 倒平板：根据样品的物理性质（如粘度）、污染程度等来选择样品的稀释度。本实 验由于样品粘度较高，有一定污染，所以选择1:100稀释度的样品匀液，做成对照组和试验 组。吸取ImL样品匀液于相应组别的无菌平皿内，及时将15mL~20mL冷却至46°C的培养 基（可放置于46°C ±1°C恒温水浴箱中保温）倾注到相应的平皿中，对照组内倾注对照组 培养基，实验组倾注实施例1所得培养基；并转动平皿使其混合均匀。每组做二十个平行测 定，每组都有空白对照。
[0073] 培养：待琼脂凝固后，将平皿翻转，于36°C ±1°C下培养48h±2h。
[0074] 计数、结果：依据国标GB4789. 2-2010《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落 总数测定》中6. 3菌落计数和7结果与报告进行计数与报告。两组琼脂组检测结果和数据 比对分别如下表5、表6所不：
[0075] 表5 :两组琼脂组的检测结果表
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[0078] 表6 :两组琼脂组的数据比对结果表
[0080] 备注：采用数理统计学中的成组数据t检验对试验均值进行显著性差异检验，首 先进行方差齐性 F 检验，F=I^ = (I. 9X IO4) Al. 6 X IO4M. 215<F 11?, 1.9, 0；,05 ' ^ffiJ ' =2. 464,说明两 组数据方差具备齐性；在α = 5%的水平下，t = 4. 7X 10 4〈t3S/2iQ.Q5= 2. 024,所以两组数 据（即菌落报告数）在95%置信度下差异不显著。
[0081] 从表5和表6可以看出，本发明的菌落显色培养基在原有的市售平板计数琼脂中 加入了蔗糖脂肪酸酯SE-11，2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑（TTC)后，在运用中所得的菌落总数 结果与国标GB4789. 2-2010《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》中所规 定使用的平板计数琼脂培养基（对照组）所得的结果差异不显著，其菌落显色为红色或浅 红色，边界清晰，菌落显色明显，易于计数。而本实施例的样品为蔗糖脂肪酸酯SE-Il与培 养基中的蔗糖脂肪酸酯为同一型号，根据本实施例的结果对比可知，本发明的菌落显色培 养基虽然加入蔗糖脂肪酸酯但也不影响对试样蔗糖脂肪酸酯中菌落总数的检测。
[0082] 实施例5 :
[0083] 对照组培养基（也即国标GB4789. 2-2010《食品安全国家标准食品微生物学检 验菌落总数测定》中所规定使用的平板计数琼脂培养基）：将市售平板计数琼脂23. 5g溶 于1000 mL蒸馏水中，加热溶解，调节pH为7. 0±0. 2,高压灭菌后备用，高压灭菌条件为： 115。。，15min〇
[0084] 实验组：实施例2所得。
[0085] 样品稀释：称取25. Og复配蛋白饮料稳定剂（复配食品添加剂，粉末状）置盛有 225mL生理盐水的无菌均质杯内，10000r/min均质lmin，制成1:10重量体积比的样品勾液。 用ImL无菌微量移液器吸取所得样品匀液lmL，沿管壁缓慢注于盛有9mL稀释液的无菌试管 中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其 混合均匀，制成1:100的样品匀液。以此类推，制成相应10倍系列稀释样品匀液。
[0086] 倒平板：根据样品的物理性质（如粘度）、污染程度