一种用于治疗痛风性关节炎的土瓜提取物的利记博彩app
【技术领域】
[0001] 本发明涉及中药提取物领域，具体涉及一种土瓜提取物及含有该提取物的药物制 剂，该提取物可以应用于制备治疗痛风性关节炎的药物。
【背景技术】
[0002] 药材土瓜为旋花科鱼黄草属植物山土瓜的块根。又名土蛋（《遵义府志》）、滇土瓜 (《植物名实图考》）、山土瓜（《中药形性经验鉴别法》）、红土瓜（《滇南本草》整理本)、土附、 山红沼等。
[0003] 原植物山土瓜(学名：Merremiahungaiensis)为旋花科鱼黄草属的植物，为中国 的特有植物，分布在中国大陆的贵州、四川、云南等地。该植物为多年生缠绕草本，地下具 块根，球形或卵状，有时2-3个串生，表皮红褐色、暗褐色或肉白色，含淀粉并有乳状粘液。 茎细长，圆柱形，有细棱，大多旋扭，无毛。叶椭圆形、卵形或长圆形，长2. 5-11. 5厘米，宽 1. 2-5厘米，顶端钝，微凹，渐尖或锐尖，具小短尖头，基部钝圆或楔形或微呈心形，边缘微啮 蚀状或近全缘，两面无毛，仅叶片基部被少数缘毛，有侧脉5-6 (-7)对，脉有时带紫色；叶 柄长0. 8-3. 5厘米，被短柔毛。聚伞花序腋生，花序梗长2-6厘米，无毛，着生2-3或数朵 花，或单花生叶腋；苞片小，鳞片状，长约1毫米；花梗长0. 5-2厘米，比花序梗粗壮，无毛； 萼片等长，或外方2片稍短，椭圆形，顶端钝，边缘干膜质，外萼片长0. 7-1. 4厘米，内萼片长 1. 2-1. 5厘米，均无毛；花冠黄色，漏斗状，长3. 5-6厘米，瓣中带顶端被淡黄色短柔毛，其余 无毛；雄蕊稍不等长，花丝基部扩大，被毛；花盘环状；子房圆锥状，2室，无毛，柱头2球形。 蒴果长圆形，高1-1. 3厘米，4瓣裂。种子长5. 5-7毫米，极密被黑褐色茸毛。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供一种土瓜提取物，其制备方法和液相分析方法，含有该提 取物的药物制剂及利用该提取物制备治疗痛风性关节炎的药物的用途。
[0005] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的： 一种土瓜提取物，该提取物由以下方法制备： (a)以重量计，每1〇〇份药材包含干燥的土瓜80~90份和干燥的菊花10~20份，混合粉 碎，用55%乙醇溶液热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液；（b)将步 骤（a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，减 压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用水 溶解，过滤，用大孔树脂富集活性成分，先用10%乙醇冲洗8个柱体积除去大极性成分，再用 70%乙醇洗脱12个柱体积，收集70%洗脱液，减压浓缩即得。
[0006] 为了能够通过建立HPLC指纹图谱的方法控制不同批次制备的提取物的批间差 异，所述提取物的液相分析方法为： 色谱柱：AgilentZorbaxExtent_C18 柱（4.6mmX250mm，5iim); 流动相：A为乙腈，B为0. 5%磷酸溶液； 梯度洗脱程序：〇? 〇l~5min，A10% - 15% ;5~10min，A15% - 48% ;10~25min，A48% - 78% ;25~30min，A78% - 10% ; 流动相流速：1.OmL?min%检测波长：270nm;柱温：35°C;进样量：10yL。
[0007] 药物制剂，含有治疗有效量的所述提取物和药学上可接受的载体。
[0008] 所述的提取物在制备治疗痛风性关节炎的药物中的应用。
[0009] 所述的药物制剂在制备治疗痛风性关节炎的药物中的应用。
[0010] 本发明提取物用作药物时，可以直接使用，或者以药物制剂的形式使用。
[0011] 所述药物制剂含有治疗有效量的本发明土瓜提取物，其余为药物学上可接受的、 对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。
[0012] 所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料 以及药物制品辅剂。将本发明的药物制剂以单位体重服用量的形式使用。本发明提取物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等；用于注射时，可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。
[0013] 本发明的优点：本发明通过对干燥的土瓜和菊花进行提取、除杂、富集处理，能得 到具有治疗痛风性关节炎的提取物；本发明提供的液相分析方法可以用于建立该提取物的 指纹图谱，用于控制不同批次制备的提取物的批间差异。
【附图说明】
[0014] 图1为土瓜提取物HPLC液相图谱。
【具体实施方式】
[0015] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0016] 实施例1:土瓜提取物①制备（85份土瓜，15份菊花） 药材来源：土瓜和菊花购自安徽亳州中药材市场。
[0017] 主要试剂：食品级乙醇购自上海凌峰化学试剂有限公司；医药级AB-8大孔树脂购 自天津波鸿树脂有限公司；乙腈为HPLC级，购于TEDIA;85%磷酸为HPLC级，购于TEDIA;色 谱用纯净水为哇哈哈纯净水。
[0018] 制备方法：将8. 5kg干燥土瓜根茎和1. 5kg干燥菊花混合粉碎，用55%乙醇溶液热 回流提取（25LX3次)，合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液（2L);将所得乙醇提 取浓缩液用水稀释至3L，依次用石油醚（3LX3次)、乙酸乙酯（3LX3次)和水饱和的正丁醇 (3LX3次)萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物232g; (c)正丁醇萃取物用1. 5L水溶解，医用脱脂棉过滤，用AB-8大孔树脂（2kg，柱体积1. 5L) 富集活性成分，先用10%乙醇冲洗8个柱体积（12L)除去大极性成分，再用70%乙醇洗脱12 个柱体积（18L)，收集70%洗脱液，减压浓缩，即得土瓜提取物约150g。
[0019] 实施例2:土瓜提取物②制备（80份土瓜，20份菊花） 制备方法：将8.Okg干燥土瓜根茎和2.Okg干燥菊花混合粉碎，用55%乙醇溶液热回 流提取（25LX3次)，合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液（2L);将所得乙醇提取 浓缩液用水稀释至3L，依次用石油醚（3LX3次)、乙酸乙酯（3LX3次）和水饱和的正丁醇 (3LX3次)萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物232g; (c)正丁醇萃取物用1. 5L水溶解，医用脱脂棉过滤，用AB-8大孔树脂（2kg，柱体积1. 5L) 富集活性成分，先用10%乙醇冲洗8个柱体积（12L)除去大极性成分，再用70%乙醇洗脱12 个柱体积（18L)，收集70%洗脱液，减压浓缩，即得土瓜提取物约150g。
[0020] 实施例3:土瓜提取物③制备（90份土瓜，10份菊花） 制备方法：将9. 0kg干燥土瓜根茎和1. 0kg干燥菊花混合粉碎，用55%乙醇溶液热回 流提取（25LX3次)，合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液（2L);将所得乙醇提取 浓缩液用水稀释至3L，依次用石油醚（3LX3次)、乙酸乙酯（3LX3次）和水饱和的正丁醇 (3LX3次)萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物232g; (c)正丁醇萃取物用1. 5L水溶解，医用脱脂棉过滤，用AB-8大孔树脂（2kg，柱体积1. 5L) 富集活性成分，先用10%乙醇冲洗8个柱体积（12L)除去大极性成分，再用70%乙醇洗脱12 个柱体积（18L)，收集70%洗脱液，减压浓缩，即得土瓜提取物约150g。
[0021] 实施例4:土瓜提取物④制备（75份土瓜，25份菊花） 制备方法：将7. 5kg干燥土瓜根茎和2. 5kg干燥菊花混合粉碎，用55%乙醇溶液热回 流提取（25LX3次)，合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液（2L);将所得乙醇提取 浓缩液用水稀释至3L，依次用石油醚（3LX3次)、乙酸乙酯（3LX3次）和水饱和的正丁醇 (3LX3次)萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物232g; (c)正丁醇萃取物用1. 5L水溶解，医用脱脂棉过滤，用AB-8大孔树脂（2kg，柱体积1. 5L) 富集活性成分，先用10%乙醇冲洗8个柱体积（12L)除去大极性成分，再用70%乙醇洗脱12 个柱体积（18L)，收集70%洗脱液，减压浓缩，即得土瓜提取物约150g。
[0022] 实施例5 :土瓜提取物⑤制备（95份土瓜，5份菊花） 制备方法：将9. 5kg干燥土瓜根茎和0. 5kg干燥菊花混合粉碎，用55%乙醇溶液热回 流提取（25LX3次)，合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液（2L);将所得乙醇提取 浓缩液用水稀释至3L，依次用石油醚（3LX3次)、乙酸乙酯（3LX3次）和水饱和的正丁醇 (3LX3次)萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物232g; (c)正丁醇萃取物用1. 5L水溶解，医用脱脂棉过滤，用AB-8大孔树脂（2kg，柱体积1. 5L) 富集活性成分，先用10%乙醇冲洗8个柱体积（12L)除去大极性成分，再用70%乙醇洗脱12 个柱体积（18L)，收集70%洗脱液，减压浓缩，即得土瓜提取物约150g。
[0023] 实施例6 :液相色谱分析 供试品溶液配制：取实施例1方法制得的提取物5mg至50mL棕色容量瓶中，加30mL10%乙腈水溶液超声溶解，冷却至室温后，继续加10%乙腈水溶液定容。分析方法如下： 高效液相色谱仪：Agilent1260,二元栗； 色谱柱：AgilentZorbaxExtent_C18 柱（4.6mmX250mm，5iim); 流动相：A为乙腈，B为0. 5%磷酸溶液； 梯度洗脱程序：〇? 〇l~5min，A10% - 15% ;5~10min，A15% - 48% ;10~25min，A48% - 78% ;25~30min，A78% - 10% ; 流动相流速：1.OmL?min%检测波长：270nm;柱温：35°C;进样量：10yL。
[0024] 用制备的10批次的土瓜提取物进行分析，进行色谱峰匹配，结果1~12号峰在10 批样品色谱图中均出现。因此标定12个峰为共有色谱峰，据此建立该提取物的HPLC质量 控制图谱，结果见图1。该10批次的土瓜提取