一种防治卵巢癌的药物组合物的利记博彩app_2

文档序号:8950882阅读:来源:国知局
片剂、胶囊剂、滴丸。
[0018] -种防治卵巢癌的药物组合物,按本发明的技术方案制备后与化学药或中药组成 的防治卵巢癌药物。
[0019] 本发明药物组合物可以下调SK0V-3细胞Bcl-2蛋白表达、上调SK0V-3细胞Bax 蛋白表达,首次揭示了 Bax/Bcl-2蛋白在药物组合物诱导SK0V-3细胞凋亡中的作用,治疗 卵巢癌疗效显著。
【具体实施方式】
[0020] 实施例1 :防治卵巢癌的药物组合物及其制备方法 防治卵巢癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为: 臭蒿55重量份阿氏蒿105重量份铃铃香35重量份螺庵25重量份原百部碱7 重量份血竭红素4重量份; 制备方法: (1) 按原料药配比取阿氏蒿、铃铃香,混匀,先用重量百分比浓度60%乙醇作为溶剂,在 50°C温浸提取,提取次数为4次,每次提取时间为4小时,每次溶剂用量为阿氏蒿、铃铃香药 材总重量的20倍,滤过,得药渣A和提取液,提取液回收乙醇,浓缩,干燥,即得提取物A ; (2) 按原料药配比取臭蒿,并与步骤(1)得到药渣A混匀,用重量百分比浓度35%乙醇 为溶剂,在70°C温浸提取,提取次数为3次,每次提取时间为3小时,每次溶剂用量为上述药 材总重量的15倍,滤过,提取液回收乙醇,浓缩至相对密度1. 12,滤过,药液通过NKA-9大 孔吸附树脂柱,先用水洗脱,再用重量百分比浓度75%的乙醇溶液洗脱NKA-9大孔吸附树脂 柱,收集重量百分比浓度75%乙醇洗脱液,回收乙醇,浓缩干燥,即得提取物B ; (3) 按原料药配比取螺厣,超微粉碎至80微米,即得超微粉C ; (4) 按原料药配比取原百部碱、血竭红素,混匀,依次加入提取物A、提取物B、超微粉C, 混匀,即得药物组合物。
[0021] 实施例2 :防治卵巢癌的药物组合物及其制备方法 防治卵巢癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为: 臭蒿60重量份阿氏蒿100重量份铃铃香40重量份螺庵20重量份原百部碱8 重量份血竭红素3重量份; 制备方法: (1) 按原料药配比取阿氏蒿、铃铃香,混匀,先用重量百分比浓度60%乙醇作为溶剂,在 50°C温浸提取,提取次数为4次,每次提取时间为4小时,每次溶剂用量为阿氏蒿、铃铃香药 材总重量的20倍,滤过,得药渣A和提取液,提取液回收乙醇,浓缩,干燥,即得提取物A ; (2) 按原料药配比取臭蒿,并与步骤(1)得到药渣A混匀,用重量百分比浓度35%乙醇 为溶剂,在70°C温浸提取,提取次数为3次,每次提取时间为3小时,每次溶剂用量为上述药 材总重量的15倍,滤过,提取液回收乙醇,浓缩至相对密度1. 12,滤过,药液通过NKA-9大 孔吸附树脂柱,先用水洗脱,再用重量百分比浓度75%的乙醇溶液洗脱NKA-9大孔吸附树脂 柱,收集重量百分比浓度75%乙醇洗脱液,回收乙醇,浓缩干燥,即得提取物B ; (3) 按原料药配比取螺厣,超微粉碎至80微米,即得超微粉C ; (4) 按原料药配比取原百部碱、血竭红素,混匀,依次加入提取物A、提取物B、超微粉C, 混匀,即得药物组合物。
[0022] 实施例3 :防治卵巢癌的药物组合物及其制备方法 防治卵巢癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为: 臭蒿50重量份阿氏蒿110重量份铃铃香30重量份螺庵30重量份原百部碱6 重量份血竭红素5重量份; 制备方法: (1) 按原料药配比取阿氏蒿、铃铃香,混匀,先用重量百分比浓度60%乙醇作为溶剂,在 50°C温浸提取,提取次数为4次,每次提取时间为4小时,每次溶剂用量为阿氏蒿、铃铃香药 材总重量的20倍,滤过,得药渣A和提取液,提取液回收乙醇,浓缩,干燥,即得提取物A ; (2) 按原料药配比取臭蒿,并与步骤(1)得到药渣A混匀,用重量百分比浓度35%乙醇 为溶剂,在70°C温浸提取,提取次数为3次,每次提取时间为3小时,每次溶剂用量为上述药 材总重量的15倍,滤过,提取液回收乙醇,浓缩至相对密度1. 12,滤过,药液通过NKA-9大 孔吸附树脂柱,先用水洗脱,再用重量百分比浓度75%的乙醇溶液洗脱NKA-9大孔吸附树脂 柱,收集重量百分比浓度75%乙醇洗脱液,回收乙醇,浓缩干燥,即得提取物B ; (3) 按原料药配比取螺厣,超微粉碎至80微米,即得超微粉C ; (4) 按原料药配比取原百部碱、血竭红素,混匀,依次加入提取物A、提取物B、超微粉C, 混匀,即得药物组合物。
[0023] 实施例4 :片剂的制备 取实施例1组合物118g,加入淀粉32g,混匀,制粒,干燥,加微晶纤维素12g,硬脂酸镁 lg,混匀,压制成1000片,即得本发明组合物片剂。
[0024] 实施例5:胶囊的制备 取实施例2组合物126g,加入淀粉26g,混匀,制粒,干燥,整粒,加入适量硬脂酸镁,混 匀,装胶囊1000粒,即得本发明组合物胶囊。
[0025] 实施例6 :滴丸的制备 称取聚乙二醇6000 166g水浴(80°C )加热煮熔,加入实施例3组合物16g,充分 搅拌均匀,以液体石蜡为冷却剂,置玻璃管(4*80cm)中,冷却温度为9°C,滴口内外径为 7. 0/2. 0 (mm/mm),滴口距液面为2cm,滴速以每分45滴为最佳条件,用棉布吸干滴丸表面的 冷凝剂,即得本发明组合物滴丸。
[0026] 实施例7 :防治卵巢癌的药物组合物 防治卵巢癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为: 臭蒿80重量份螺庵25重量份原百部碱5. 5重量份血竭红素3. 5重量份。
[0027] 实施例8:防治卵巢癌的药物组合物 防治卵巢癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为: 臭蒿65重量份螺庵20重量份原百部碱4重量份血竭红素8重量份 实施例9 :防治卵巢癌的药物组合物 防治卵巢癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为: 臭蒿70重量份螺庵25重量份原百部碱2重量份血竭红素4重量份 实验例1 :对卵巢癌SK0V-3细胞Bcl-2和Bax蛋白表达的影响试验研究 1材料与方法 1. 1材料与仪器 人卵巢癌SK0V-3细胞购自吉林省肿瘤研究所;RPMI1640培养基和胰蛋白酶购自美国 Gibco公司;鼠抗人Bcl-2抗体、鼠抗人Bax抗体购自Cell Signaling Technology公司; SP试剂盒、二氨基联苯胺(DAB)显色试剂盒购自福州迈新生物技术公司;药物组合物为实 施例1药物组合物批号20120523 ;流式细胞仪为美国BD公司产品。
[0028] 1. 2方法 1.2. 1 SK0V-3细胞培养和分组:将SK0V-3细胞接种培养于含10%小牛血清的RPMI 1640培养基中,置于37°C,体积分数为5% C02培养。胰酶消化传代,选用对数生长期细胞。 实验组加入药物组合物溶液,终浓度为50 y g/ml,对照组加入RPMI-1640培养液,继续培养 24 h〇
[0029] 1. 2. 3流式细胞术检测SK0V-3细胞凋亡:分别收集实验组和对照组的SK0V-3细 胞,用磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤2次。加入预冷的70%乙醇,边加边摇匀,于4°C固定24 h。1000r/min离心5min,用PBS缓冲液洗涤2次。用PBS缓冲液配成lml SK0V-3细胞悬 液。加入20 U/ml Rnase,于37°C水浴1 h。加入100iig/ml碘化丙啶染液,于4°C避光染 色30min。将SK0V-3细胞悬液过400目的尼龙膜,然后用流式细胞仪检测,每组重复3次。 用Cell-Quest-Modifit 3. 0软件进行细胞凋亡分析。
[0030] 1.2. 4免疫组织化学检测SK0V-3细胞Bcl-2和Bax蛋白的表达:收集实验组和 对照组的SK0V-3细胞,涂片,固定。滴加3%H 202溶液,室温孵育15min。滴加正常山羊血 清,
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