碱、更生霉素、柔红霉素、多柔比星、依托泊巧、光辉霉素、紫杉醇、多西他赛、顺销、卡销、氣 尿喀晚、亚叶酸和依立替康。在一些实施方案中、祀向治疗剂包括但不限于贝伐单抗、曲妥 珠单抗、埃罗替尼、帕尼单抗、索拉非尼、英夫利昔单抗、阿达木单抗、己利昔单抗、达珠单抗 和奥马珠单抗。在一些实施方案中，W约40Gy至SOGy的剂量施用放射治疗剂。在一些实 施方案中，剂量为约50Gy至约70Gy，在一些实施方案中，剂量为约50Gy至约65Gy。在一些 实施方案中，W约50Gy、约55Gy、约60Gy或约65Gy的剂量施用放射治疗剂。
[0097] 施用运些和相关药物组合物的典型途径从而包括，但不限于，口服、局部、经皮肤、 吸入、胃肠外、舌下、口腔、直肠、阴道和鼻内途径。如本文中所用，术语肠胃外包括皮下注 射、静脉内、肌内、胸骨内注射或输注技术。配制根据本发明的某些实施方案的药物组合物， W允许其中包含的活性成分在向患者施用该组合物后是生物可利用的。将向受试者或患者 施用的组合物可采取1个或多个剂量单位的形式，其中例如，片剂可W是单个剂量单位，呈 气溶胶形式的本文中描述抗EGFR试剂的容器可W容纳多个剂量单位。对于本领域普通技 术人员来说，制备此类剂型的实际方法是已知，或将是显而易见的；例如，参见Remington: TheScience曰ndPractice(^?]1曰；['111曰07，第20片反（？]1；[1曰(16山]1；[曰00116邑6ofPhsrmscy andScience, 2000)。待施用的组合物将在任何情况下含有治疗有效量的抗EGFR试剂，例 如如本文中所述的抗EGFR抗体，W用于根据本文中的教义治疗目标疾病或病症。
[0098] 药物组合物可呈固体或液体形式。在一个实施方案中，载体是颗粒剂，W便组合物 呈例如片剂或粉剂形式。载体可W是液体，其中组合物是例如口服油、注射液体或气溶胶， 其用于例如吸入施用。当想要口服施用，药物组合物优选呈固体或液体形式，其中半固体、 半液体、悬浮液和凝胶形式被包含在本文中被当作为固体或液体的形式中。
[0099] 作为用于口服施用的固体组合物，可将药物组合物配制成粉剂、粒剂、压制的片段 剂、丸剂、胶囊、口香糖、晶片等。此类固体组合物将通常含有一种或多种惰性稀释剂或可 食用的载体。此外，可存在W下试剂的一种或多种：粘合剂诸如簇甲基纤维素、乙基纤维 素、微晶纤维素、黄著胶或明胶；赋形剂诸如淀粉、乳糖或糊精、崩解剂诸如藻酸、藻酸钢、 Primogel、玉米淀粉等；润滑剂诸如硬脂酸儀或Sterotex;助流剂诸如胶体二氧化娃；甜味 剂诸如薦糖或糖精；调味剂诸如薄荷、水杨酸甲醋或甜澄香精；和着色剂。当药物组合物呈 胶囊形式，例如明胶胶囊时，其可能，除了上述类型的材料W外，还含液体载体诸如聚乙二 醇或油。
[0100] 药物组合物可呈液体形式，例如，馳剂、糖浆剂、溶液、乳液或悬浮液。作为两个实 例，液体可用于口服施用或通过注射递送。当期望口服施用时，优选组合物，除了现有化合 物外，还含有甜味剂、防腐剂、染料/着色剂和风味增强剂中的一种或多种。在期望通过注 射施用的组合物中，可包含表面活性剂、防腐剂、润湿剂、分散剂、悬浮剂、缓冲剂、稳定剂和 等渗剂中的一种或多种。
[0101] 液体药物组合物，无论它们是溶液、悬浮液还是其它类似的形式，可包括W下试剂 的一种或多种：无菌稀释剂诸如注射用水、盐水溶液，优选生理盐水、林格氏溶液、等渗氯化 钢、不挥发性油诸如合成的单或二甘油醋（其可作为溶剂或悬浮介质）、聚乙二醇、甘油、丙 二醇或其它溶剂；抗微生物剂诸如苯甲醇或对径基苯甲酸甲醋；抗氧化剂诸如抗坏血酸或 亚硫酸氨钢；馨合剂诸如乙二胺四乙酸；缓冲剂诸如乙酸盐、巧樣酸盐或憐酸盐和用于调 节张力的试剂诸如氯化钢或葡萄糖。肠胃外制剂可被封装在安飯、一次性注射器或由玻璃 或塑料制成的多剂量小瓶中。在某些实施方案中，生理盐水是优选的组合物。可注射药物 组合物优选是无菌的。
[0102] 期望用于胃肠外或口服施用的液体药物组合物应当含有一定量的抗EGFR试剂， 诸如本文中描述的EGFR特异性抗体，W便可获得适当的剂量。通常地，该量为至少0.Ol% 的组合物中的抗体。当期望口服施用时，可使该量在组合物的重量的0. 1%与约70%之间 变化。某些口服药物组合物含有约4%至约75%的抗体。在某些实施方案中，制备根据本 发明的药物组合物和制剂，W使胃肠外剂量单位在稀释前含有按重量计0. 01%至10%的 抗体。
[0103] 该药物组合物可意欲用于局部施用，在运种情况下，载体可适当地包括溶液、乳 液、软膏或凝胶基剂。基质，例如，可包括W下材料的一种或多种：凡±林、羊毛脂、聚乙二 醇、蜂蜡、矿物油、稀释剂诸如水和醇，W及乳化剂和稳定剂。增稠剂可存在于用于局部施用 的药物组合物中。如果期望进行经皮施用，该组合物可包含经皮贴剂或离子电渗装置。该 药物组合物可意欲W例如栓剂的形式用于直肠施用，所述栓剂将在直肠中融化并释放出药 物。用于直肠施用的组合物可含有油性基质作为合适的无刺激性赋形剂。此类基质包括， 但不限于，羊毛脂、可可脂和聚乙二醇。
[0104] 药物组合物可包含各种材料，所述材料改变固体或液体剂量单位的物理形式。例 如，组合物可包含形成包围活性成分的涂层壳体的材料。形成涂层壳体的材料通常是惰性 的，并且可选自例如糖、虫胶W及其它肠包衣剂。或者，可将活性成分封装在明胶胶囊中。呈 固体或液体形式的药物组合物可包含结合本发明的抗体并从而帮助化合物递送的试剂。可 在该能力中发挥作用的适当试剂包括其它单克隆或多克隆抗体，一种或多种蛋白质或脂质 体。药物组合物可基本上由可作为气溶胶施用的剂量单位组成。术语气溶胶用于指范围从 具有胶体性质的系统变化至由加压包装组成的系统的多种系统。递送可W是通过液化或压 缩气体或通过分配活性成分的适当的累系统。可在单相、双相或=相系统中递送双气溶胶 W递送活性成分。气溶胶的递送包括可一起形成试剂盒的必需容器、激活剂、阀口、子容器 等。本领域普通技术人员可确定优选的气溶胶而无需过度实验。
[0105] 药物组合物可通过制药领域中公知的方法来制备。例如期望通过注射施用的药物 组合物可通过将包含抗EGFR试剂，诸如本文中描述的EGFR特异性抗体和任选的一种或多 种盐、缓冲剂和/或稳定剂的组合物与无菌蒸馈水组合W形成溶液来制备。可添加表面活 性剂W促进均一溶液或悬浮液的形成。表面活性剂是与抗体组合物非共价相互作用W促进 抗体在含水递送系统中的溶解或均匀悬浮的化合物。
[0106] 可WW治疗有效的量施用组合物，所述治疗有效量将取决于多种因素，所述因素 包括所使用的特定化合物（例如，EGFR特异性抗体）的活性；化合物代谢稳定性和作用长 度；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；施用模式和时间；排泄速率；药物组合； 特定病症或状况的严重程度；和受试者经历的治疗。
[0107] 还可将包含抗EGFR试剂诸如EGFR特异性抗体的组合物与一种或多种其它治疗剂 同时施用，在所述其它治疗剂施用之前或施用之后施用。在一个实施方案中，本发明提供 用于治疗胃肿瘤的方法，其包括向需要此种治疗的患者施用有效量的两种或更多种抗EGFR 试剂的组合，其中所述患者已被确定含有EGFR生物标志物。在运一点上，所述治疗可包含 有效量的选自西妥昔单抗、帕尼单抗、尼妥珠单抗、抗体806、Sym004、MM-151和本文中描述 的其它抗EGFR试剂的两种或更多种抗EGFR试剂的组合。
[010引在一个实施方案中，本发明提供用于治疗胃肿瘤的方法，其包括向需要此种治疗 的患者施用有效量的抗EGFR试剂，其中所述患者已被确定含有与胃癌的护理治疗的标准 组合的EGFR生物标志物。胃癌的标准治疗包括：手术、放射疗法或化学疗法，或运些治疗 的组合。手术可包括去除胃的患病部分和附近淋己结的手术或在某些情况下可包括胃切 除术。目前，对于胃癌的治疗不存在世界范围内使用的单一标准化疗治疗。然而，化疗治 疗可包括至少两种药物氣尿喀晚巧-FU，A化UCil)和顺销（Platinol)的组合。与5-FU 类似（诸如卡培他滨或Xeloda)和与顺销类似（诸如奥沙利销或乐沙定）的其它药物似 乎是等同的。通常使用的其它药物包括多西他赛（Taxotere)、紫杉醇（Taxol)、伊立替康 (Camptosar)和表柔比星巧lienee)。
[0109] 如可由本领域普通技术人员所理解的，联合治疗可包括含有抗EGFR试剂和一种 或多种另外的活性剂的单一药物剂量制剂的施用，W及在其自已的分开的剂量制剂中包含 抗EGFR试剂和每一种活性剂的组合物的施用。例如，可将如本文中描述的抗EGFR抗体和 其它活性剂在单一口服剂量组合物诸如片剂或胶囊中一起向患者施用，或每一种试剂W单 独的口服剂量制剂施用。类似地，可将如本文中描述的抗EGFR抗体和另一种活化剂在单一 胃肠外剂量组合物中诸如在盐溶液或其它生理上可接受的溶液中一起向患者施用，或每一 种试剂W单独的胃肠外剂量制剂施用。当使用单独的剂量制剂时，可在基本上相同的时间 (即同时），或在单独错开的时间（即相继地）并W任意顺序施用包含抗EGFR试剂诸如抗 体的组合物和一种或多种另外的活性剂；联合治疗被理解为包括所有运些方案。
[0110] 因此，在某些实施方案中，还设想了与一种或多种其它治疗剂组合的包含抗EGFR 试剂诸如EGFR特异性抗体的组合物的施用。此类治疗剂在本领域中可被接受为用于如本 文中描述的特定疾病状态（诸如癌症，特别地胃癌）的标准治疗。设想的示例性治疗剂包 括细胞因子、生长因子、类固醇、NSAID、DMA畑、抗炎剂、化学治疗剂、放射治疗剂或其它活性 辅助剂。
[0111] 在某些实施方案中，可将抗EGFR试剂，诸如抗EGFR抗体与任何数量的化学治疗 剂结合向被鉴定为具有EGFR生物标志物的患者施用。化学治疗剂的实例包括烧化剂，诸 如塞替派和环憐酷胺（CYTOXAN?);烷基横酸醋诸如白消安、英丙舒凡和赃泊舒凡；氮丙晚 诸如苯并多己，卡波酿、甲基多己和尿多己；乙締亚胺和甲基=聚氯胺，包括六甲蜜胺、= 乙基蜜胺、=亚乙基憐酷胺、=亚乙基硫代憐酷胺和=甲基=聚氯胺；氮芥诸如苯下酸氮 芥、糞氮芥、胆憐酷胺、雌莫司汀、异环憐酷胺、二氯甲基二乙胺、氮芥氧化物盐酸盐、关法 仑、新恩比兴、胆固醇苯乙酸氮芥、泼尼氮芥、氯乙环憐酷胺、尿喀晚氮芥；亚硝基脈诸如 卡莫司汀、氯脈菌素、福莫司汀、洛莫司汀、尼莫司汀、雷莫司汀；抗生素诸如阿克拉霉素 (aclacinomysin)、放线菌素、安曲霉素、重氮丝氨酸、博菜霉素、放线菌素C、加利车霉素、卡 拉比星（car油icin)、洋红霉素、嗜癌霉素、色霉素、放线菌素D、柔红霉素、地托比星、6-重 氮-5-氧代-k正亮氨酸、多柔比星、表柔比星、依索比星、伊达比星、麻西罗霉素、丝裂霉 素、霉酪酸、诺加霉素、橄揽霉素类、培洛霉素、泊非霉素、嚷岭霉素、立铁阿霉素、罗多比星、 链黑菌素、链佐星、杀结核菌素、乌苯关司、净司他下、佐柔比星；抗代谢产物诸如甲氨蝶岭 和5-氣尿喀晚巧-FU);叶酸类似物诸如二甲叶酸、甲氨蝶岭、蝶罗岭、S甲曲沙；嚷岭类 似物诸如氣达拉滨、6-琉基嚷岭、硫咪嚷岭、硫鸟嚷岭；喀晚类似物诸如安西他滨、阿扎胞 巧、6-阿扎尿巧、卡莫氣、阿糖胞巧、二脱氧尿巧、去氧氣尿巧、依诺他滨、氣尿巧、5-FU;雄 激素、诸如卡普睾酬、屈他雄酬丙酸、环硫雄醇、关雄烧、睾内醋；抗肾上腺素药诸如氨鲁米 特、米托坦、曲洛司坦；叶酸补充剂，诸如亚叶酸；醋葡醒内醋；醒憐酷胺糖巧；氨基乙酷丙 酸；安日丫晚；bes化油UCil;比生群；依达曲沙；地憐酷胺（defofamine);秋水仙胺；地叮 酿；依氣鸟氨酸；依利乙胺；依托格鲁；硝酸嫁；径基脈；香茹多糖；氯尼达明；米托脈腺； 米托蔥酿；莫赃达醇；硝氨丙叮晚；喷司他下；蛋氨氮芥；化柔比星；足叶草酸；2-鬼白酸 乙阱；甲基节阱；PSK.RTM巧亚胺；西左非兰；螺环错；细格抱氮杂酸己亚胺酿；2,2'， 2"氯=乙胺；氨基甲酸乙醋；长春地辛；达卡己嗦；甘露醇氮芥；二漠甘露醇；二漠卫 矛醇；赃泊漠烧；gac^osine;阿糖胞巧（"Ara-C");环憐酷胺；塞替派；紫杉烧类，诸如 紫杉酪（TAX.OL愈，Bristol-MyersSquibbOncology,Princeton,N.J.)和多西他赛 ([八-父01￡民&嚴..，|化]16斗01116]1。1?0'61'，4]11：〇]17，化日]1。6);苯下酸氮芥；吉西他滨；6-硫 代鸟嚷岭，琉嚷岭，氨甲噪岭；销类似物如顺销和卡销；奥沙利销；伊立替康；长春花碱；销； 依托泊巧（VP-16);异环憐酷胺；丝裂霉素C;米托蔥酿；长春新碱；长春瑞滨；诺维本；诺肖 林；替尼泊巧；柔红霉素；氨基蝶岭；希罗达；伊班麟酸盐；CPT-Il;拓扑异构酶抑制剂RFS 2000 ;二氣甲基鸟氨酸值MF0);视黄酸衍生物如Targretin?(贝沙罗汀）、Panretin?(阿 利维a酸）；0NTAK?(地尼白介素）；埃斯波霉素；卡培他滨；和上述任一种的药学上可接受 的盐、酸或衍生物。还包括在该定义中的是用于调节或抑制激素对肿瘤的作用的抗激素剂， 诸如抗雌激素类，包括例如他莫昔芬、雷洛昔芬、芳香酶抑制4(5)-咪挫、4-径基他莫西芬、 曲沃昔芬、雷洛昔芬、LY117018、奥那司酬和托瑞米芬（Fareston);和抗雄激素类，诸如氣 他胺、尼鲁米特、比卡鲁胺、亮丙瑞林和戈舍瑞林；和上述任一种的药学上可接受的盐、酸或 衍生物。
[0112] 可将多种其它治疗剂与本文中描述的抗EGFR试剂结合使用。在一个实施方案中， 向被鉴定为具有EGFR生物标志物的患者施用抗EGFR试剂与抗炎剂。抗炎剂或药物包括，但 不限于，类固醇和糖皮质激素类（包括倍他米松、布地奈德、地塞米松、醋酸氨化可的松、氨 化可的松、氨化可的松、甲泼尼龙、泼尼松龙、泼尼松、曲安西龙）、非酱体抗炎药（NSAID巧， 包括阿司匹林、布洛芬、糞普生、甲氨蝶岭、柳氮横胺化晚、来氣米特、抗TNF药物、环憐酷胺 和麦考酪醋。
[0113] 示例性NSAID选自由W下组成的组：布洛芬、糞普生、糞普生钢、Cox-2抑制剂诸如 VIOXX? (罗非昔布）和CELEBREXdX(塞来昔布）W及唾液酸盐（Sialylates)。示 例性镇痛药选自由W下组成的组：醋氨酪、径考酬，盐酸丙氧芬的曲马多。示例性糖皮质激 素类选自由W下组成的组：可的松、地塞米松、氨化可的松、甲泼尼龙、泼尼松龙或泼尼松。 示例性生物反应改性剂包括针对细胞表面标志物（例如，CD4XD5等）的分子、细胞因子抑 制剂诸如TNF括抗剂（例如，依那西普(ENBREL?)、阿达木单抗(HUMIRA猶)和英夫 利昔单抗(REMICAD&取)）、趋化因子抑制剂和粘附分子抑制剂。生物反应改性剂包括单 克隆抗体W及分子的重组形式。示例性DMARD包括硫挫嚷岭、环憐酷胺、环抱菌素、甲氨蝶 岭、青霉胺、来氣米特、柳氮横化晚、径氯哇、金（口服（金诺芬）和肌内注射）和米诺环素。
[0114] 包含本文中描述的抗EGFR试剂诸如EGFR特异性抗体的组合物，可用保护抗体免 受从身体快速清除的载体，诸如时间释放制剂或包衣来制备。此类载体包括控释制剂，诸 如，但不限于，埋植剂和微胶囊化递送系统，W及生物可降解的生物相容性聚合物，诸如乙 締乙酸乙締醋、聚酢、聚乙醇酸、聚原酸醋、聚乳酸和本领域普通技术人员已知的其它制剂。 [011引 实施例1
[0116] EGFR基因扩增和过表达是对胃腺癌的西妥昔单抗治疗起反应的预测性生物标志 物
[0117] 本实施例描述了为了鉴定反应者和非反应者，随后发现预测性生物标志物而在一 个组群的全分子注释的（表达和突变特征谱分析）初始亚洲胃腺癌（GC-ADC)患者来源的 异种移植物（PDX)中进行的随机西妥昔单抗试验的结果。
[011引引言和概述
[0119] 无任何体外操作的患者来源异种移植物（PD讶反映了患者的组织病理学和遗传 学特征谱9M。其作为临床前癌症模型具有提高的预测能力，并且使得能够进行真正的个体 化疗法和发现预测性生物标志物。所述模型也称为"Avatar小鼠"或"xenopatient"，并且 它们的大的集合可潜在地反映患者中的肿瘤多样性。由于癌症患者群体的广泛多样性，因 此临床试验的成功很大程度上取决于包含可能地表达期望的祀标并且具有正确的基因特 征谱的反应者，和排除非反应者。运些模型从而可用于通过建立临床试验形式的模型来检 验研究的祀向药物。
[0120] 建立称为GC-ADCHuPrime'。模型（与先前描述NS化C-HuPrime类似）IS的胃腺 癌（GC-ADC)PDX的大的集合。测试19个GCH地Prime?的组群W评价肿瘤对西妥昔单抗的 反应，并且发现一个亚组的具有EGFR基因扩增和过表达的GC-ADC对西妥昔单抗作出良好 反应。该观察表明EGFR基因拷贝和/或过表达可用作预测患者对西妥昔单抗的反应的潜 在实用单一生物标志物，运是与GC-ADC中的肥R2/HerceptinH'情形的该情况类似的情形。 使用EGFR基因拷贝数作为患者选择标准的具有前景的临床研究对于进一步确认观察是必 要的，并且可导致西妥昔单抗作为GC-ADC治疗的最终监管批准。
[0121] 发现：在测试的19个PDXGC模型中，有4个模型（21% )对西妥昔单抗起反应 (通过AT/AC> 20%定义的）。表达特征谱分析和拷贝数变异分析显示所有4个反应者 具有扩增的EGFR基因和/或相应高的EGFR表达，与15个非反应者（AT/AC> 20% )相 反。该结果与在EXTRA(其中具有EGFR扩增的所有4个患者都是反应者的II期试验）中 产生的观察一致。运些结果表明EGFR基因扩增和/或高表达是该亚组的GC-ADC的关键致 癌驱动者，运对于NSCLC和CRC是不常见的。
[0122] 解释：EGFR基因扩增和过表达可用作GC-ADC的西妥昔单抗反应的单一预测生物 标志物。
[0123] 材料和方法
[0124] 患者样本、异种移植物、西妥昔单抗治疗实验和模型表征。在按先前描述的方法 手术1°后，立即将手术取出的新鲜GC肿瘤组织用于皮下移植进6-8周龄雌性Ba化/c裸鼠 (BeijingHFKBioscienceCo.Ltd.，Beijing，Qiina)。将已建立的肿瘤模型连续地再移植 W进行传代和进行研究。患者样本的存取和使用由北京肿瘤医院伦理委员会W及来自患者 的知情同意书批准。所有程序在化ownBioscienceSFP设施中于无菌条件下进行。严格按 照美国国立卫生研究院的实验动物护理与使用指南中的推荐来进行参与我们的研究的所 有实验动物的实验。方案由CrownBioscience,Inc.(CrownBioscienceIACUCCommittee) 的动物实验伦理委员会批准。
[0125] 用于在PDX模型中评价肿瘤对西妥昔单抗的反应的方法先前已进行了详细描述 15'"。每周两次监测肿瘤生长，并且计算％AT/AC值W用于评估肿瘤对西妥昔单抗的反应 (AT=处理组的肿瘤体积变化并且AC=对照组的肿瘤体积变化）。
[0126] 模型表征，包括使用Affy肥19、SNP6、1肥、qPCR进行的表达谱分析、癌基因突变 分析，已在先前进行了详细描述1S'"。
[0127] 抗肿瘤活性的评价。当肿瘤体积达到IOO-ISOmm时，将小鼠随机分入2组，每组5 只具有相似平均肿瘤体积的小鼠。分组后立即用媒介物（PBS，每周一次腹膜内注射或IP， 进行2周）处理对照组，并且用西妥昔单抗（每周一次IP注射，持续2周，50mg/kg，Merck KGaA)注射处理组。每周2次监测肿瘤生长，计算D