，30%吡唑醚菌酯悬浮剂对蚯蚓急性毒性的LC5Q(14d)为 26.8mga. i ./kg社，大于lO.Omg a. i ./kg社，毒性等级为"低毒"。
[0046] 实施例2
[0047] -种本发明的赤子爱胜蚯蚓测定农药悬浮剂毒性的方法，包括以下步骤：
[0048] 1、试验液配制
[0049]称取20%呋虫胺悬浮剂0.2500g，用蒸馏水溶解并定容至50mL容量瓶中，得到浓度 为l.OOmg a.i./mL的储备液。
[0050] 实验组:取5份1500g的人工土壤(干重），用移液器向1500g人工土壤(干重）中分别 移取 0.150、0.300、0.600、1.200、2.400、4.80011^上述储备液得到混合物(标号为1、2、3、4、 5)。再分别向混合物1~5中加入450、450、449、449、448、44511^的蒸馏水，充分搅拌使药液、 土壤和水混合均匀，得到浓度分别为0.100、0.200、0.400、0.800、1.60、3.20mga. i . /kg社的 试验液。将上述每组试验液平均分为三份，作为平行样，分别盛装于1L的标本瓶中。
[0051 ] 空白对照组(CK):称取1500g的人工土壤(干重），用量筒向1500g人工土壤(干重） 中加入450mL的蒸馏水，充分搅拌后平均分为三份，分别盛装于1L的标本瓶中。
[0052] 2、染毒
[0053] 挑选体重0.30~0.60g有生殖带的健康赤子爱胜蚯蚓于试验开始前1天在人工土 壤中清肠，然后随机加入到标本瓶中，每个标本瓶中加入1 〇条赤子爱胜蚯蚓。
[0054] 3、试验数据记录
[0055] 在染毒开始时及染毒开始后14d内每天测定并记录环境的温度、湿度、光照强度 等。测得试验期间环境的温度为：19.5°C~20.6°C，湿度为81.3%~82.7%，光照强度为 639Lux~663Lux，并在该光照强度下连续光照。
[0056] 于染毒后7d、14d观察并记录赤子爱胜蚯蚓的中毒症状和死亡数，将观察结果记录 于表3中。
[0057]表3:20 %呋虫胺悬浮剂对蚯蚓急性毒性试验数据记录表
[0058]
[0059] 同时，在14d的试验期间，赤子爱胜蚯蚓出现了蠕动能力减弱，尸体腐烂，死亡等生 物效应。
[0060] 4、数据处理
[00611采用统计软件SPSS12.0，以处理浓度的对数值为自变量X，以（校正)死亡率的机率 值为因变量y，建立毒力回归方程。计算20%呋虫胺悬浮剂对蚯蚓的半数致死浓度LC50和 95%置信限，具体的计算结果参见表4。
[0062]表4:20 %呋虫胺悬浮剂对蚯蚓急性毒性试验结果表
[0063]
[0064] 通过上述方法计算得到20%呋虫胺悬浮剂对蚯蚓急性毒性1^(：5()(14(1)为1.6411^ 8.;[./1^社，95%置信限为1.17~2.7411^3.;[./1^社。
[0065] 5、结果评价
[0066] 根据LC5Q值判断农药毒级。毒性分级标准为:低毒(LC5Q> 10.Omg a. i ./kg#)，中 毒（l.OOmg a.i./kg社<LC5〇<10.0mg a.i./kg社），高毒（O.lOOmg a.i./kg社<LC5〇< l.OOmg a.i./kg社），剧毒（LC5〇<0.100mg a.i./kg社）〇
[0067] 在本实施例的试验条件下，20%呋虫胺悬浮剂悬浮剂对蚯蚓急性毒性的LC5Q(14d) 为1.64mg a.i./kg社，处于1.00~lO.Omg a.i./kg社之间，毒性等级为"中毒"。
[0068] 以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制。虽 然本发明已以较佳实施例揭示如上，然而并非用以限定本发明。任何熟悉本领域的技术人 员，在不脱离本发明的精神实质和技术方案的情况下，都可利用上述揭示的方法和技术内 容对本发明技术方案做出许多可能的变动和修饰，或修改为等同变化的等效实施例。因此， 凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所做的任何简单 修改、等同替换、等效变化及修饰，均仍属于本发明技术方案保护的范围内。
【主权项】
1. 一种赤子爱胜蚯蚓测定农药悬浮剂毒性的方法，其特征在于，包括以下步骤： 51、 将农药悬浮剂溶解，配制成农药储备液； 52、 将步骤S1中的所述农药储备液加入到土壤和水的混合物中配制成梯度浓度的试验 液； 53、 挑选有生殖带的赤子爱胜蚯蚓，随机加入到步骤S2中所述的试验液中，持续培养 14d，于第7d、14d记录赤子爱胜蚯蚓的生物效应参数； 54、 根据赤子爱胜蚯蚓的生物效应参数计算农药悬浮剂对赤子爱胜蚯蚓的半数致死浓 度LC5Q值，判断农药悬浮剂的毒性。2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤S3中挑选的所述赤子爱胜蚯蚓的 体重为0 · 30g~0 · 60g。3. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤S3中所述生物效应参数为赤子爱 胜蚯蚓的死亡率和中毒症状。4. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于，赤子爱胜蚯蚓的死亡的标准为：用针轻触 赤子爱胜蚯蚓尾部无反应;所述中毒症状为:赤子爱胜蚯蚓出现了蠕动能力减弱。5. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤S3中，所述持续培养14d的培养条 件为:温度20 ± 1°C、湿度80 %~85 %、400Lux~800Lux光强连续光照。6. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤S3中所述赤子爱胜蚯蚓在加入所 述试验液的前1天，将所述赤子爱胜蚯蚓在人工土壤中清肠。7. 根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤S4中，采用统计软件 SPSS，以处理浓度的对数值为自变量X，以死亡率的机率值为因变量y，计算农药制剂对赤子 爱胜蚯蚓的半数致死浓度LC5Q和95 %置信限。8. 根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其特征在于，所述农药毒级判断标准为低 毒（LC5〇>10.0mg a.i./kg社），中毒（l.OOmg a.i./kg社<LC5〇<10.0mg a.i./kg社），高毒 (O.lOOmg a.i./kg社<LC5〇<1.00mg a.i./kg社），剧毒（LC5〇<0.100mg a.i./kg社）〇9. 根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其特征在于，所述赤子爱胜蚯蚓筛选农药 悬浮剂毒性的方法还设有空白对照组，所述空白对照组以土壤和水的混合物作为试验液培 养赤子爱胜蚯蚓，所述空白对照组死亡率不超过10 %则证明实验结果可信。
【专利摘要】本发明公开了一种赤子爱胜蚯蚓测定农药悬浮剂毒性的方法，包括以下步骤：将农药悬浮剂溶解，配制成农药储备液；将农药储备液加入到土壤和水的混合物中配制成梯度浓度的试验液；挑选有生殖带的赤子爱胜蚯蚓，随机加入到试验液中，持续培养14d，于第7d、14d记录赤子爱胜蚯蚓的生物效应参数；根据赤子爱胜蚯蚓的生物效应参数计算农药悬浮剂对赤子爱胜蚯蚓的半数致死浓度LC50值，判断农药悬浮剂的毒性，具有易操作、实用性强、速度快、精确度高等优势，可初步判断出农药悬浮剂的毒性。
【IPC分类】G01N33/00
【公开号】CN105651946
【申请号】
【发明人】刘勇, 张德咏, 陈昂, 奚庆, 罗源华, 罗香文, 刘志邦, 严清平, 何安頔, 刘建宇
【申请人】湖南省植物保护研究所
【公开日】2016年6月8日
【申请日】2016年3月29日