例1 丁酸氯倍他松制剂中8种工艺杂质的色谱图
[0056] 杂质A-G和I对照品溶液的配制:分别取杂质A-G和I对照品约65mg，置25ml量瓶中， 加乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀，即得杂质A-G和I储备液。再精密量取储备液1.0ml置100ml 量瓶中，加乙腈稀释至刻度，摇匀，即得杂质A-G和I浓度为26μg/ml的对照品混合液。
[0057] 混合溶液的配制:称取供试品约26mg，置10ml量瓶中，精密移取杂质A-G和I对照品 混合溶液适量使溶液并定量稀释至刻度，摇匀，即得。
[0058]分别取稀释剂及混合溶液按上述色谱条件进样，记录色谱图，测定结果见表2。结 果见图1、图2。
[0059]表2试验测定结果
[0060]
[0061]
[0062]结论:空白稀释剂不干扰样品测定；主峰与邻近杂质峰间分离度大于1.5;各已知 杂质峰间的分离度大于1.5;上述试验证明主峰与杂质峰分离良好，专属性强。
[0063] 对比实施例
[0064]在该对比实施例中，除了采用的流动相A、B不同，其余条件均与实施例1相同。 [0065] 流动相A:无机相:0.1 %甲酸水溶液
[0066]流动相B:有机相:0 · 1 %甲酸乙腈溶液。
[0067] 在该对比实施例中，采用了0.1 %甲酸水溶液为流动相A，以0.1 %甲酸乙腈溶液为 流动相B，色谱柱采用WatersXTerra?:RP18 3.5um，其余条件均与实施例1相同，按下表梯 度程序进行洗脱：
[0068]
[0069] 取实施例1中混合溶液进样，记录色谱图，结果见图3。
[0070]结论:在对比实施例中的色谱条件下，杂质A与杂质F、杂质C与杂质D不能有效分 离，且丁酸氯倍他松主峰与相邻杂质也不能很好的分离。对比实施例结果显示:本发明能够 更好地分离检测丁酸氯倍他松及其制剂中的8种工艺杂质。
[0071 ]实施例2 丁酸氯倍他松乳膏辅料对丁酸氯倍他松测定的影响 [0072]取丁酸氯倍他松乳膏1支(含丁酸氯倍他松7.5mg)，作为供试品溶液。
[0073] 取供试品溶液，按上述色谱条件进样，记录色谱图，并同法进行空白辅料试验，结 果见图4、图5。
[0074] 结论:空白辅料不干扰本品的测定，说明本发明的方法可以用于丁酸氯倍他松乳 膏的质量检测。
[0075] 实施例3在流动相中加入少量酸性试剂对丁酸氯倍他松及8种工艺杂质进行分离
[0076] 在流动相中加入0.1 %的甲酸(或者磷酸），其他色谱条件与实施例1中同，取实施 例1中混合溶液进样，记录色谱图，试验结果如下：
[0077] 表3在流动相中加入酸性试剂条件下混合溶液的测定结果
[0078]
[0079] 结论:在流动相中加入酸性试剂（甲酸、磷酸)均能很好的分离丁酸氯倍他松及其8 中工艺杂质。
[0080] 实施例4 丁酸氯倍他松降解产物的测定
[0081 ] 取本品65mg，精密称定，置于25ml量瓶中，加5ml乙腈使溶解后加0. lmol/1的氢氧 化钠0.4ml，放置3分钟后，加0. lmol/1的盐酸0.4ml中和，加稀释剂稀释至刻度，摇匀，作为 碱降解产物测定用溶液。
[0082] 取本品适量，置强度为4500Lx ± 500Lx的光照箱中约30cm处，放置15天（总照度〉 1.2X106LX)后取样65.38mg，精密称定，置25ml量瓶中，加乙腈溶解并用稀释剂稀释至刻 度，摇匀，作为光降解产物测定用溶液。
[0083] 取上述降解产物测定用溶液进样，记录色谱图，同时做空白试验，记录色谱图，如 图6、图7所示，按面积归一化法计算各杂质含量，并分析试验结果。
[0084] 结论:该色谱系统可将样品所有杂质和碱、光照的剧烈降解条件下产生的杂质均 能很好分离，表明本方法的灵敏度及专属性好。
[0085] 实施例5色谱系统对丁酸氯倍他松及杂质A-G和I的检测限、定量限基础研究
[0086] 定量限溶液:精密称取各杂质对照品，配成一定浓度的溶液，并逐级稀释得定量限 溶液，如表4所示。
[0087] 检测限溶液:精密移取定量限溶液7.0ml，置20ml量瓶中，加稀释剂稀释至刻度，摇 匀，即得检测限溶液，如表5所示。
[0088]测定方法：
[0089] 取上述定量限溶液连续进样3次，检测限溶液连续进样2次，计算主峰峰高与噪声 的比值(信噪比）。记录色谱图，试验结果见表4和表5。
[0092] 表4定量限测定结果
[0090]
[0091]
[0093]
[0094]
[0095] 表5检测限测定结果
[0096]
[0097]
[0098] 结论：从上表试验数据可知，本色谱系统下，丁酸氯倍他松及杂质A-G和I的检测 限、定量限分别符合要求。
[0099]最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较 佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技 术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本 发明的权利要求范围当中。
【主权项】
1. 分离测定下酸氯倍他松及其制剂中工艺杂质的方法，其特征在于，W十八烷基硅烷 键合硅胶为固定相，W流动相A和流动相B为流动相梯度洗脱进行固液分离，所述制剂中工 艺杂质为A-G和I的一种或多种，具体结构式如下所示：所述流动相A为无机相，所述的流动相B为有机溶剂。2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述梯度洗脱设置如下：所述流动相A为水，所述流动相B为乙腊。3. 利用高效液相色谱法分离测定下酸氯倍他松及其制剂中工艺杂质的方法，其特征在 于，采用的色谱柱是W十八烷基硅烷键合硅胶为填料，W流动相A和流动相B为流动相进行 梯度洗脱，进入检测器进行检测;所述的流动相A为水，所述的流动相B为乙腊;所述制剂中 工艺杂质包括A-G和I的一种或多种。4. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述制剂中工艺杂质为A-G和I，包括W下 步骤： 1)分别取待测样品下酸氯倍他松及其制剂中工艺杂质A-G和I的对照品，用稀释剂溶解 制成待测样品及所述各杂质的对照品溶液，分别取待测样品下酸氯倍他松及其各工艺杂质 对照品溶液进样，进行高效液相色谱分析，确定待测样品下酸氯倍他松及其各杂质的保留 时间； 2)取供试品加稀释剂制成供试品溶液，再取稀释剂作为空白溶液，分别取供试品溶液 及空白溶液进样，进行高效液相色谱分析，记录色谱图，按限度法根据供试品溶液与对照品 溶液中杂质的峰面积比较杂质A-G和I的含量。5. 根据权利要求1或3所述的方法，其特征在于，在分离测定之前，采用乙腊溶解待测样 品，配制的待测样品浓度为：1. 〇mg/m：L-3. Omg/ml。6. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述色谱柱的规格为150X4.6mm，3皿。7. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述流动相流速为0.5-2. OmVmin。8. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述检测器为紫外检测器，所述检测器的 检测波长为210-280nm。9. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述色谱柱柱箱溫度为25-45 °C。10. 根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述稀释剂为乙腊。
【专利摘要】本发明属于分析化学领域，具体涉及一种分离测定丁酸氯倍他松及其制剂中工艺杂质的方法。本方法以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，以流动相A和流动相B为流动相梯度洗脱进行固液分离，所述制剂中工艺杂质为A-G和I的一种或多种。本方法可同时实现丁酸氯倍他松及A-G和I的分离和检测，可在44分钟内将丁酸氯倍他松及其制剂中工艺杂质A-G和I完全分离并进行检测，且准确度高，灵敏度好；本发明解决了丁酸氯倍他松及其制剂的8种工艺杂质的分离测定问题，从而确保了丁酸氯倍他松及其制剂的质量可控，并最终确定产品的安全有效，从根本上保证了产品质量。该方法分离度好，专属性强；且操作简单，具有简便、快速的优点。
【IPC分类】G01N30/02
【公开号】CN105651900
【申请号】
【发明人】周书荣, 张波
【申请人】重庆华邦制药有限公司
【公开日】2016年6月8日
【申请日】2016年4月8日