一种哺乳类动物胶原蛋白的提取方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种胶原蛋白的提取方法，特别涉及一种哺乳类动物胶原蛋白的提取 方法。
【背景技术】
[0002] 胶原蛋白，是一种功能性蛋白，其具有很强的生物活性和生物功能，因此被广泛应 用于医药、食品、日用化工、生物合成等工业领域。
[0003] Jj父原蛋白是动物体内含量最多的蛋白质，约占人体蛋白质的25%_35%，相当于人 体重量的6%，分布遍及全身各个组织器官，如骨骼、软骨、韧带、皮肤、角膜、各种内膜和筋 膜等，尤其在人体的皮肤和结缔组织中，含有大量的胶原蛋白。
[0004] 通常，胶原蛋白的制造工艺较为复杂，主要应用于医疗和生物医学材料方面，如人 工皮肤、止血剂、人工血管以及护肤化妆品等，因此价位较高。
[0005] 目前市售的某些水解性胶原蛋白几乎与蛋白质水解产物一样，不仅纯度较低，且 其原有的生理活性也已经被破坏，这都是由于现有的提取方式导致的。这也极大限制了胶 原蛋白的使用范围和使用效果。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的是:提出一种哺乳类动物胶原蛋白的提取方法，其不仅大大提高了 胶原蛋白的纯度，还能够100%的保留胶原蛋白的活性。
[0007] 本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：
[0008] -种哺乳类动物胶原蛋白的提取方法，包括如下步骤：
[0009] a、原料处理:将原料清洗干净，去除脂肪和筋膜后，放入碳酸钠溶液中浸泡3-6个 小时，然后再用蒸馏水漂洗3-4次后，晾干；
[0010] b、酶解处理:在步骤a处理后原料中加入质量配比为0.2WT % -0.3WT %的蛋白水解 酶，再加入浓度为〇.2mol/L乙酸溶液，并缓慢搅拌3-5天，然后离心取出沉淀，制得粗提胶原 蛋白溶液；
[0011] c、胶原蛋白的提纯:在制得的粗提胶原蛋白溶液中加入质量分数为0.5%-1.5% 的H202溶液，混合均匀后静置3-6小时，之后，再用柠檬酸三钠溶液调节PH值到5-6，离心后， 再进行盐析处理，再将沉淀物装入透析袋中，用〇.2mol/L的乙酸溶液透析1-1.5天，再用蒸 馏水透析3-4天，且每天换透析液2-3次，最终得到胶原蛋白水液；
[0012] d、活性保存处理:在胶原蛋白水液中加入90-1 lOppm的复合酶，然后在-50 °C真空 超低温状态下冷冻干燥处理，制得哺乳类动物胶原蛋白。
[0013] 进一步，所述原理处理中除脂肪和筋膜后，先在2_3°C的温度下冷冻后，再放入碳 酸钠溶液中。
[0014] 进一步，所述碳酸钠溶液为0.05 % -0.1 %。
[0015] 进一步，所述乙酸溶液的浓度为0.3mol/L，PH值为2-3。
[0016]进一步，所述酶解处理中缓慢搅拌在8-10°C的条件下进行。
[0017]进一步，所述盐析处理为在PH值在4-6的酸性条件下，用浓度为0.3mol/L的氯化钠 的浓度对离心后的胶原蛋白溶液进行处理。
[0018] 进一步，所述活性保存处理中复合酶包括纤维素酶、海藻糖酶、出芽短梗酶和甘露 聚糖酶，该复合酶能有效减少胶原流失，100%保留胶原蛋白活性以及天然活性的功能。
[0019] 本发明的有益效果是:本发明的提取方案不仅解决现有胶原蛋白纯度低的问题， 而且还能够保持着胶原分子的完整三螺旋结构，做到了 100%的保留胶原蛋白的生理活性， 从而使提取出来的胶原蛋白的使用效果更好，通过本方法提取的胶原蛋白具备超强修复能 力，强化角质修复角质层的功效，减少皮脂膜流失，促进肌肤自身保湿生理成分的合成，对 于敏感肌有强大的修复力，皮肤红肿、脱皮、痘痘、皮炎甚至于疤痕都可以使用生胶原来修 复，并且其超强的活性成分可以促使皮肤再生，增强肌肤抵抗力;改善粉刺、痘痘，生胶原在 被皮肤吸收后可在痘痘周围形成一个微酸的环境，这个环境具有抗菌抗炎症的作用，帮助 舒缓痘痘肌和皮炎的炎症恶化，同时帮助疏通毛孔达到促进皮脂正常分泌效果，提升皮肤 抗氧化力和抗菌力，并可改善痤疮愈合后的早期色素沉淀，早期浅性疤痕;抗衰老淡化细纹 提亮肤色，长期使用可以帮助肌肤恢复自身代谢功能，抑制黑色素生成和沉淀，提亮肤色， 源源不断为肌肤补充流失的胶原，令角质更加健康。
【具体实施方式】
[0020] 下面结合实施例对本发明作进一步描述。
[0021] 实施例1:
[0022] -种哺乳类动物胶原蛋白的提取方法，包括如下步骤：
[0023] a、原料处理:将原料清洗干净，去除脂肪和筋膜后，在2°C的温度下冷冻处理，再放 入0.07%碳酸钠溶液中浸泡4个小时，然后再用蒸馏水漂洗3次后，晾干。
[0024] b、酶解处理:在晾干后的原料中加入质量配比为0.3WT %的蛋白水解酶，再加入浓 度为0.2mol/L的乙酸溶液(PH为2)，并在8°C的条件下，缓慢搅拌4天，然后离心取出沉淀，制 得粗提胶原蛋白溶液。
[0025] c、胶原蛋白的提纯:在制得的粗提胶原蛋白溶液中加入质量分数为1.2%的H2〇2溶 液，混合均匀后静置5小时，之后，再用柠檬酸三钠溶液调节PH值到5,离心后，在PH值在5的 酸性条件下，放入浓度为〇. 3mol/L的氯化钠溶液进行沉淀处理，再将沉淀物装入透析袋中， 用0.2mol/L的乙酸溶液透析1天，再用蒸馏水透析3天，且每天换透析液2次，最终得到胶原 蛋白水液。
[0026] d、活性保存处理:在胶原蛋白水液中加入lOOppm的复合酶，所述复合酶包括纤维 素酶、海藻糖酶、出芽短梗酶和甘露聚糖酶，然后在-50 °C真空超低温状态下冷冻干燥处理， 制得哺乳类动物胶原蛋白。
[0027] 实施例2:
[0028] -种哺乳类动物胶原蛋白的提取方法，包括如下步骤：
[0029] a、原料处理:将原料清洗干净，去除脂肪和筋膜后，在:TC的温度下冷冻处理，再放 入0.1 %碳酸钠溶液中浸泡6个小时，然后再用蒸馏水漂洗4次后，晾干。
[0030] b、酶解处理:在晾干后