0036] 实施例3
[0037] 取8.5kg牛皮清洗，加入蒸煮锅中，加适量水，用氢氧化钙将PH值调整至8。升温至 65°C保温，按照9xl06U/kg底物的比例加入复合酶(木瓜蛋白酶:胰蛋白酶:枯草芽孢杆菌碱 性蛋白酶= 3:2:1)，进行10小时的水解。酶解中和，酶解完成后，在料液的表面，去掉可看见 的油漂。升温至90°C保温5分钟。放出初道胶液，打入脱色脱苦罐中，加入0.085kg活性炭进 行脱色脱苦，升温至90°C保温1小时。将料液，通过板框过滤机进行过滤后进入贮料罐。将贮 料罐中的料液降温至60°C后，料液才可进入离子交换器，进行离子交换。进胶速度控制在 3m 3/h以下控制温度55°C的。处理后的料液打入双效浓缩器中进行浓缩，料液浓度浓缩至 35%。浓缩完成的料液，进行高压灭菌，温度控制在100°C，保持1小时。用高压栗，将料液打 入干燥塔中，控制热风进风温度在170°C以上，出风温度在80°C之间，使用18目不锈钢丝网 进行过筛。水解后得到牛皮胶原蛋白5.47kg，胶原蛋白中蛋白质含量为97.1%，其平均分子 量为3150Da，测定水解蛋白的苦味值约为2,降低2个苦味值。
[0038] 对照例1
[0039] 取8.5kg牛皮清洗，加入蒸煮锅中，加适量水，用氢氧化钙将PH值调整至8。升温至 65°C保温，按照9xl06U/kg底物的比例加入复合酶(木瓜蛋白酶:胰蛋白酶:枯草芽孢杆菌碱 性蛋白酶= 1:2:1)，进行10小时的水解。酶解中和，酶解完成后，在料液的表面，去掉可看见 的油漂。升温至90°C保温5分钟。放出初道胶液，打入脱色脱苦罐中，加入牛皮干物质重量的 0.085kg活性炭进行脱色脱苦，升温至90°C保温1小时。将料液，通过板框过滤机进行过滤后 进入贮料罐。将贮料罐中的料液降温至60°C后，料液才可进入离子交换器，进行离子交换。 进胶速度控制在3m 3/h以下控制温度55 °C的。处理后的料液打入双效浓缩器中进行浓缩，料 液浓度浓缩至35%。浓缩完成的料液，进行高压灭菌，温度控制在100°C，保持1小时。用高压 栗，将料液打入干燥塔中，控制热风进风温度在170°C以上，出风温度在80°C之间，使用18目 不锈钢丝网进行过筛。水解后得到牛皮胶原蛋白4.26kg，胶原蛋白中蛋白质含量为88.1%， 其平均分子量为3450Da，测定水解蛋白的苦味值约为3,降低1个苦味值。
[0040] 对照例2
[0041]取5kg牛皮清洗，加入蒸煮锅中，加适量水，用氢氧化钙将PH值调整至8。升温至65 °C保温，按照8xl06U/kg底物的比例加入复合酶(木瓜蛋白酶:胰蛋白酶:枯草芽孢杆菌碱性 蛋白酶= 2:3:2)，进行2小时的水解。酶解中和，酶解完成后，在料液的表面，去掉可看见的 油漂。升温至90°C保温5分钟。放出初道胶液，打入脱色脱苦罐中，加入牛皮干物质重量的 0.05kg活性炭进行脱色脱苦，升温至90°C保温30分钟。将料液，通过板框过滤机进行过滤后 进入贮料罐。将贮料罐中的料液降温至60°C后，料液才可进入离子交换器，进行离子交换。 进胶速度控制在2m 3/h以下控制温度50 °C的。处理后的料液打入双效浓缩器中进行浓缩，料 液浓度浓缩至35%。浓缩完成的料液，进行高压灭菌，温度控制在100°C，保持1小时。用高压 栗，将料液打入干燥塔中，控制热风进风温度在170°C以上，出风温度在70°C之间，使用18目 不锈钢丝网进行过筛。水解后得到牛皮胶原蛋白的2.74kg，胶原蛋白中蛋白质含量为89%， 其平均分子量为3500Da，测定水解蛋白的苦味值约为2,降低2个苦味值。
[0042] 对照例3
[0043] 将市售明胶溶液，升温至65°C保温，按照10xl06U/kg底物的比例加入复合酶(木瓜 蛋白酶:胰蛋白酶:枯草芽孢杆菌碱性蛋白酶= 3:2:1)，进行10小时的水解。酶解中和，升温 至90°C保温5分钟。放出初道胶液，打入脱色脱苦罐中，加入0. lkg活性炭进行脱色脱苦，升 温至90°C保温1小时。将料液，通过板框过滤机进行过滤后进入贮料罐。将贮料罐中的料液 降温至60°C后，料液才可进入离子交换器，进行离子交换。进胶速度控制在4m 3/h以下控制 温度55°C的。处理后的料液打入双效浓缩器中进行浓缩，料液浓度浓缩至35%。浓缩完成的 料液，进行高压灭菌，温度控制在100°C，保持1小时。用高压栗，将料液打入干燥塔中，控制 热风进风温度在170°C以上，出风温度在80°C之间，使用18目不锈钢丝网进行过筛。水解后 得到牛皮胶原蛋白5.37kg，胶原蛋白中蛋白质含量为86.1 %，其平均分子量为3850Da，测定 水解蛋白的苦味值约为2，降低2个苦味值。
【主权项】
1. 一种复合酶法水解制备牛皮胶原蛋白的方法，其特征在于包含如下步骤： 1) 将牛皮材料碱化处理后，控制温度60-65 °C，进行复合蛋白酶水解； 2) 将步骤1)获得的水解产物除去油漂，升温灭酶； 3) 将步骤2)获得的水解产物通过离子交换器进行离子交换，去除重金属及过氧化物； 4) 对步骤3)得到的混合物进行浓缩，控制料液浓度在35 %以上，高压灭菌； 5) 对步骤4)获得的浓缩液进行喷雾干燥处理，获得牛皮胶原蛋白。2. 权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤1)中碱化处理PH值为8-9。3. 权利要求1或2所述的方法，其特征在于所述步骤1)复合蛋白酶组成为木瓜蛋白酶、 胰蛋白酶、枯草芽孢杆菌两种或多种混合液。4. 权利要求3所述的方法，其特征在于所述步骤3)复合蛋白酶组成为木瓜蛋白酶:胰蛋 白酶:枯草芽孢杆菌碱性蛋白酶比例为3:2:1。5. 权利要求1或2所述的方法，其特征在于步骤2)后还包括一个脱色脱苦步骤，工艺参 数为:90°C活性炭进行脱色保温30分钟。6. 权利要求5所述的方法，其特征在于具体步骤为： (1) 蒸煮酶解:将清洗后的牛皮5-10kg，加入蒸煮锅中，加适量水，将PH值调至8-9，升温 至60-65°C保温，按照8-10xl0 6U/kg的比例加入复合酶，进行水解，酶解时间2-10h; (2) 去脂肪:酶解中和完成后，在料液的表面，去除可看见的油漂； (3) 灭酶:升温灭酶； (4) 脱色脱苦:灭酶后放出初道胶液，打入脱色罐中，加入0.05-0. lkg活性炭进行高温 脱色脱苦； (5) 过滤:脱色脱苦后的料液，通过过滤机进行过滤后进入贮料罐； (6) 离子交换:将贮料罐中的料液降温至37-60°C后，料液才可进入离子交换器，进行离 子交换;进胶速度控制在2-5m3/h以下； (7) 浓缩:将料液打入双效浓缩器中进行浓缩，料液浓度浓缩至35 %以上； (8) 灭菌:浓缩完成的料液，进行高压灭菌； (9) 喷雾干燥:喷雾干燥处理，获得产品。7. 权利要求1或6所述的方法，其特征在于所述喷雾干燥工艺为：用高压栗，将料液打入 干燥塔中，控制热风进风温度在170 °C以上，出风温度在70-90 °C之间。8. 权利要求1或6所述的方法，其特征在于脱色脱苦工艺为90-100°C，30min以上。
【专利摘要】本发明公开了一种复合酶法水解制备牛皮胶原蛋白的方法，利用复合酶水解制备牛皮胶原蛋白的工艺，以获取所需的蛋白质产品。经过牛皮浸泡清洗，蒸煮酶解，脱色脱苦，过滤，离子交换，浓缩，灭菌，喷雾干燥，过筛工序。本发明省去传统制作工艺复杂程序，降低能耗和成本，能直接使用牛皮制备胶原蛋白，获得的胶原蛋白质量好，分子量位于3050-3300Da之间，苦味显著降低。
【IPC分类】C12P21/06
【公开号】CN105648011
【申请号】
【发明人】曹祥来
【申请人】上海中新裕祥化工有限公司
【公开日】2016年6月8日
【申请日】2016年3月4日