后静置10h，将静置后的分层离心分离，得上清液，再将上清液静置至分层，回收有机相，收集水相即为玉米芯多糖液，所述的Sevag试剂中氯仿与正丁醇的体积比为4:1;将得到的玉米芯多糖液用透析袋透析处理10h，将透析后的液体再用多孔树脂层析柱纯化，并用氯化钠水溶液洗脱，得多糖层析液，并收集含有多糖的洗脱液，多糖的洗脱液浓缩至原体积的5%，将浓缩液和多糖层析液混合;将混合液中按体积比I: 4加入无水乙醇，充分搅拌，在室温下静置5h，去除上层混合液，取沉淀物，将沉淀物冷冻结冰，放入真空冷冻干燥机中冷冻干燥，干燥后粉碎过85目筛，得玉米芯多糖纯品。
[0010]本发明制得的玉米芯多糖为浅褐色粉末，易吸湿，易溶于水，难溶于醇、酮、醚、氯仿等有机溶剂，纯度达到88.9%，玉米芯多糖的组成主要为木糖、树胶醛糖和葡萄糖，具有提高人体的免疫功能等多种生物活性。
[0011]实例2
首先取150g干燥的玉米芯，将其粉碎，过65目筛得玉米芯粉末，按固液比1:3将玉米芯粉末和50 V热水混合，将混合物用超声波进行提取，提取温度为65 V，提取40min，并重复提取2次，提取后将混合物加入离心分离机中在6000r/min转速下分离13min，取上清液;将上清液放入真空浓缩罐中在0.089MPa下进行减压浓缩，直至浓缩至原体积的9%，将浓缩液按体积比1:4加入到无水乙醇中，直至无沉淀物析出，过滤，用质量浓度95%乙醇溶液洗涤滤饼，将冲洗后的滤饼放入烘箱中，在550C下干燥，干燥后粉碎、过筛，得玉米芯粗多糖;将制得的玉米粗多糖按固液比1: 6加入蒸馏水，搅拌使其溶解，溶解后用高速离心机中，在8500r/min转速下分离，收集上清液，将上清液中按体积比1:1.4加入Sevag试剂，搅拌混合后静置llh，将静置后的分层离心分离，得上清液，再将上清液静置至分层，回收有机相，收集水相即为玉米芯多糖液，所述的Sevag试剂中氯仿与正丁醇的体积比为4:1;将得到的玉米芯多糖液用透析袋透析处理llh，将透析后的液体再用多孔树脂层析柱纯化，并用氯化钠水溶液洗脱，得多糖层析液，并收集含有多糖的洗脱液，多糖的洗脱液浓缩至原体积的8%，将浓缩液和多糖层析液混合;将混合液中按体积比I: 4加入无水乙醇，充分搅拌，在室温下静置5.5h，去除上层混合液，取沉淀物，将沉淀物冷冻结冰，放入真空冷冻干燥机中冷冻干燥，干燥后粉碎过90目筛，得玉米芯多糖纯品。
[0012]本发明制得的玉米芯多糖为浅褐色粉末，易吸湿，易溶于水，难溶于醇、酮、醚、氯仿等有机溶剂，纯度达到90.8%，玉米芯多糖的组成主要为木糖、树胶醛糖和葡萄糖，具有提高人体的免疫功能等多种生物活性。
[0013]实例3
首先取200g干燥的玉米芯，将其粉碎，过70目筛得玉米芯粉末，按固液比1:3将玉米芯粉末和60 V热水混合，将混合物用超声波进行提取，提取温度为70 V，提取50min，并重复提取3次，提取后将混合物加入离心分离机中在7000r/min转速下分离15min，取上清液;将上清液放入真空浓缩罐中在0.091MPa下进行减压浓缩，直至浓缩至原体积的10%，将浓缩液按体积比1:4加入到无水乙醇中，直至无沉淀物析出，过滤，用质量浓度95%乙醇溶液洗涤滤饼，将冲洗后的滤饼放入烘箱中，在600C下干燥，干燥后粉碎、过筛，得玉米芯粗多糖;将制得的玉米粗多糖按固液比1: 6加入蒸馏水，搅拌使其溶解，溶解后用高速离心机中，在9000r/min转速下分离，收集上清液，将上清液中按体积比1:1.5加入Sevag试剂，搅拌混合后静置12h，将静置后的分层离心分离，得上清液，再将上清液静置至分层，回收有机相，收集水相即为玉米芯多糖液，所述的Sevag试剂中氯仿与正丁醇的体积比为4:1;将得到的玉米芯多糖液用透析袋透析处理12h，将透析后的液体再用多孔树脂层析柱纯化，并用氯化钠水溶液洗脱，得多糖层析液，并收集含有多糖的洗脱液，多糖的洗脱液浓缩至原体积的10%，将浓缩液和多糖层析液混合;将混合液中按体积比I: 4加入无水乙醇，充分搅拌，在室温下静置6h，去除上层混合液，取沉淀物，将沉淀物冷冻结冰，放入真空冷冻干燥机中冷冻干燥，干燥后粉碎过95目筛，得玉米芯多糖纯品。
[0014]本发明制得的玉米芯多糖为浅褐色粉末，易吸湿，易溶于水，难溶于醇、酮、醚、氯仿等有机溶剂，纯度达到92.2%，玉米芯多糖的组成主要为木糖、树胶醛糖和葡萄糖，具有提高人体的免疫功能等多种生物活性。
【主权项】
1.一种高活性玉米芯多糖的提取方法，其特征在于具体提取步骤为: (1)取100?200g干燥的玉米芯，将其粉碎，过60?70目筛得玉米芯粉末，按固液比1:3将玉米芯粉末和40?60°(:热水混合，将混合物用超声波进行提取，提取温度为60?700C，提取30?50min，并重复提取2?3次，提取后将混合物加入离心分离机中在5000?7000r/min转速下分离10?15min，取上清液； (2)将上述上清液放入真空浓缩罐中在0.085?0.091MPa下进行减压浓缩，直至浓缩至原体积的8?10%，将浓缩液按体积比1:4加入到无水乙醇中，直至无沉淀物析出，过滤，用质量浓度95%乙醇溶液洗涤滤饼，将冲洗后的滤饼放入烘箱中，在50?600C下干燥，干燥后粉碎、过筛，得玉米芯粗多糖； (3)将上述制得的玉米粗多糖按固液比1:6加入蒸馏水，搅拌使其溶解，溶解后用高速离心机中，在8000?9000r/min转速下分离，收集上清液，将上清液中按体积比1: 1.3?1:1.5加入Sevag试剂，搅拌混合后静置10?12h，将静置后的分层离心分离，得上清液，再将上清液静置至分层，回收有机相，收集水相即为玉米芯多糖液，所述的Sevag试剂中氯仿与正丁醇的体积比为4:1; (4)将上述得到的玉米芯多糖液用透析袋透析处理10?12h，将透析后的液体再用多孔树脂层析柱纯化，并用氯化钠水溶液洗脱，得多糖层析液，并收集含有多糖的洗脱液，多糖的洗脱液浓缩至原体积的5?10%，将浓缩液和多糖层析液混合； (5)将上述混合液中按体积比1:4加入无水乙醇，充分搅拌，在室温下静置5?6h，去除上层混合液，取沉淀物，将沉淀物冷冻结冰，放入真空冷冻干燥机中冷冻干燥，干燥后粉碎过85?95目筛，得玉米芯多糖纯品。
【专利摘要】本发明公开了一种高活性玉米芯多糖的提取方法，属于玉米芯多糖领域。本发明通过干燥的玉米芯粉碎、加热水超声浸提取上清液进行浓缩、醇沉，再离心得粗多糖，然后用Sevag法除蛋白质，再经层析法纯化，乙醇沉析分离，低温干燥，粉碎，得多糖纯品，本发明制备过程绿色环保，不会产生大量酸、碱废水，不污染环境，而且得到玉米芯多糖的活性成分能被保存完整，提取的玉米芯多糖纯度高，收率高，而且降低了副产物的产生，具有广泛的应用前景。
【IPC分类】C08B37/00
【公开号】CN105646727
【申请号】
【发明人】高玉梅, 王志慧
【申请人】常州可赛成功塑胶材料有限公司
【公开日】2016年6月8日
【申请日】2016年2月4日