例，称取各原料，依次将酵素粉、植物乳杆菌粉、蓝莓粉、麦芽糊精、蜂 蜜粉、低聚糖加入V型混合罐均匀混合28min，搅拌转速25r/min，然后加入改性膳食纤维均 勾混14min，搅拌转速45r/min，无菌灌装、密封、包装即得可降低胆固醇的蓝莓复合粉；
[0137] 上述无菌灌装采用自动粉状灌装机灌装，同时采用6t3Co辐照灭菌，辐照剂量4kGy;
[0138] 上述可降低胆固醇的蓝莓复合粉采用铝塑复合袋灌装;所述铝塑复合袋灌装前采 用臭氧消毒20min。
[0139] 经上述方法制备的可降低胆固醇的蓝莓复合粉植物乳杆菌活菌含量为6.84 X IO11CfuZg0
[0140] 实施例六：
[0141] -种可降低胆固醇的蓝莓复合粉，主要由以下重量份数的原料制备：
[0142] 蓝莓粉50份，蜂蜜粉20份，改性膳食纤维15份，低聚糖12份，植物乳杆菌粉12份，酵 素粉10份，麦芽糊精10份；
[0143] 其中低聚糖为低聚半乳糖；
[0144] 其中蓝莓粉的制备方法，包括以下步骤：
[0145] 将蓝莓放入盛有0.3%碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中，于室温下200W、45KHz清 洗5min，沥干，每个蓝莓果任意切分成四份，单层平铺在微波干燥机中于功率5kW、温度120 °C、干燥5s，然后浸泡在质量百分比浓度为8 %的丝胶肽溶液中IOmin，取出，于-18°C冷冻 50min后立即进行粉碎，粉碎物粒径0.3mm,接着加入粉碎物质量3倍的水，用乳酸调节pH值 为3.5，于室温下在电场强度35kV/cm，脉冲时间300ys，脉冲频率300Hz条件下进行高压脉冲 电场处理20min;然后于室温在功率300W条件下进行微波辐照提取15min，同时在功率300W， 频率30KHz条件下进行超声波辅助提取；加入提取液质量2.5%的混合酶，于40°C酶解 50min，酶解液过滤，滤液减压浓缩、冷冻干燥至水分含量为5 %即得蓝莓粉；
[0146] 上述混合酶为纤维素酶、蛋白酶、果胶酶、单宁酶按质量比4:1:3:1均匀混合。
[0147] 可降低胆固醇的蓝莓复合粉的制备方法，包括如下步骤：
[0148] 按照配方比例，称取各原料，依次将酵素粉、植物乳杆菌粉、蓝莓粉、麦芽糊精、蜂 蜜粉、低聚糖加入V型混合罐均匀混合33min，搅拌转速35r/min，然后加入改性膳食纤维均 勾混17min,搅拌转速55r/min,无菌灌装、密封、包装即得可降低胆固醇的蓝莓复合粉；
[0149] 上述无菌灌装采用自动粉状灌装机灌装，同时采用6t3Co辐照灭菌，辐照剂量4kGy;
[0150] 上述可降低胆固醇的蓝莓复合粉采用铝塑复合袋灌装;所述铝塑复合袋灌装前采 用臭氧消毒40min。
[0151] 经上述方法制备的可降低胆固醇的蓝莓复合粉植物乳杆菌活菌含量为6.96 X IO11CfuZg0
[0152] 实验例七食用蓝莓复合粉后总胆固醇的变化
[0153] 选总胆固醇180mg/dl-250mg/dl的成年人48名，男女各半，随机分成三组；第一组 每天晚餐饮用150毫升矿泉水;第二组每天晚餐冲饮普通市售蓝莓复合粉150g，第三组每天 晚餐冲饮本发明实施例2的蓝莓复合粉150g，期间每天食用同样的食物，食物包括肉、蛋、蔬 菜和水果。分别在实验开始的前一天和第20、40、60天采集试验者的血液，测定血液中的总 胆固醇含量，结果如表1:
[0154]表1:血液中总胆固醇含量检测结果
[0156] 由上表可知冲饮本发明实施例2的蓝莓复合粉后，成年人血液中的总胆固醇的含 量发生明显变化。与普通市售蓝莓复合粉相比，本发明蓝莓复合粉对成年人血液中的总胆 固醇的含量明显的降低，而矿泉水组成年人血液中的总胆固醇的含量明显的增加，市售蓝 莓复合粉虽然有所降低，但与本发明产品相比，效果不显著，由此可知，本发明采用具有降 低胆固醇特性的特定菌株制备的蓝莓复合粉具有很好的降低胆固醇的保健效果。
[0157] 需要说明的是:本发明实施例3-6所制备的蓝莓复合粉同样具有上述技术效果，各 实施例之间差异性不显著。
[0158] 实施例八本发明蓝莓复合粉保质期内植物乳杆菌活菌含量稳定性试验
[0159] 取本发明实施例2制备的蓝莓复合粉于室温22-25Γ、通风条件下分别储藏3个月、 6个月、12个月、24个月、36个月并测定植物乳杆菌活菌含量，结果如表2:
[0160] 表2:保质期内植物乳杆菌活菌含量检测结果
[0162] 以上结果表明：本发明蓝莓复合粉的储存稳定性较好，抗环境(温度、适度、氧气、 光照、水分等)影响因素能力大，保质期植物乳杆菌活菌含量损失率最大(36个月）为15%， 比现有的同类产品活菌含量高、损失率低、保质期长，同时反映出蓝莓复合粉的其它生物活 性成分具有同样的储存稳定性。
[0163] 需要说明的是:本发明实施例3-6制备的蓝莓复合粉同样具有上述实验效果，各实 施例之间及与上述实验效果差异性不大。
[0164] 实施例九本发明蓝莓复合粉的感官品评试验
[0165] 邀请24名人员对本发明实施例2制备的蓝莓复合粉与市售两种同类相同生产日期 的蓝莓复合粉进行品评，感官打分，其中专业和非专业人员各12名，专业人员青年、中年、老 年各4名，男女各半，非专业人员少年、青年、中年、老年各3名，男女各半;打分包括外观(20 分）、质地(25分）、风味(30分）、口感(25分）四个方面，打分人员独立进行，互不影响，以保证 品评结果准确。对品评结果进行了统计，均分值取近似值，保留整数，具体见表3:
[0166] 表3:感官品评统计结果
[0168] 注：同一行内标不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，标不同大写字母表示差异 极显著(P<〇.01)，标有相同字母表示差异不显著(P>〇.05)。
[0169]以上结果表明，本发明制备的蓝莓复合粉从外观、质地、风味和口感任何一方面都 要明显优于市售蓝莓复合粉，特别是外观、风味和口感极好，同时也适合不同年龄段、不同 消费层次的消费者食用。
[0170]需要说明的是:本发明实施例3-6制备的蓝莓复合粉同样具有上述实验效果，各实 施例之间及与上述实验效果差异性不大。
[0171] 实施例十本发明蓝莓复合粉益生性试验
[0172] 将本发明实施例2制备的蓝莓复合粉，用无菌水制备成活菌数为2X101()CFU/mL的 植物乳杆菌溶液，于4°C保存备用；
[0173] 1、取保存好的IOmL植物乳杆菌溶液注入到试管1中，采用十倍逐级稀释至10Λ取 ImL稀释液在平板上，将灭菌后冷却至45°C的MRS琼脂培养基倾注在平板(灭菌)上，迅速摇 匀。再将装有IOmL植物乳杆菌溶液的试管2置于80-90°C水浴锅中加热15-25min，取加热后 的植物乳杆菌溶液进行十倍逐级稀释至10- 8,取ImL稀释液在平板上，将灭菌后冷却至45°C 的MRS琼脂培养基倾注在平板(灭菌）上并迅速摇匀。最后将加热前和加热后的平板均在35 °C条件下培养24h，计算加热前后的数量。
[0174] 结果表明，活菌存活率达到了88%以上。
[0175] 2、模拟胃液及肠液的耐受试验：取100g/L的盐酸16.4mL加蒸馏水稀释，使pH值分 别为1.5、2.5和3.5,取IOOmL稀盐酸溶液，分别加入Ig胃蛋白酶，使其充分溶解，得模拟胃 液，微孔滤膜除菌(0 · 22μπι)备用。取磷酸二氢钾6 · 8g，加水500mL使溶解，用0 · ImoL/L氢氧化 钠溶液调节pH值至6.8;另取胰蛋白酶IOg，加水IOOmL使溶解，将两液混合后，加水稀释至 1000ml，得模拟肠液，微孔滤膜除菌(0.22μπι)备用。取ImL保存好的植物乳杆菌溶液加入到 9mL的模拟胃液中（即十倍逐级稀释），并迅速在振荡器上充分混匀，然后置于30-45Γ静置 培养2-4h。分别在11 1、211、311、411的时候取出培养液并立即计数残存活菌数，与原活菌数进行 比较，结果表明，活菌存活率为98 %。然后取在人工胃液中消化不同时间的培养液各ImL，分 别接种于9mL pH值为6.8的人工肠液中，置于30-45°(：静置培养2-411，并分别在0、3、6、2411取 样，测定其活菌数，与原活菌数进行比较，结果表明活菌存活率为99%。
[0176] 3、模拟胆盐的耐受试验:用胰液素制成lg/L的溶液，并在溶液中加入0.8%的猪胆 盐，用10 %的NaOH调整pH为8.0，然后用0.45μπι微滤膜过滤并除菌。将0.5mL保存好的植物乳 杆菌溶液接种到4.5mL模拟胆盐中，培养24h后得到培养液，计数残存的活菌数。将培养液在 灭菌生理盐水中十倍逐级稀释至10-8,并用MRS倾注，然后置于35°C静置培养24h。结果表明 活菌存活率为99 %。
[0177]以上试验结果表明，本发明蓝莓复合粉中的植物乳杆菌益生性(耐热性、耐pH性、 耐胆盐)较强，非常适合人体胃肠环境，在模拟胃肠环境中存活率大，可有效改善胃肠功能。 [0178]需要说明的是:本发明实施例3-6制备的蓝莓复合粉同样具有上述实验效果，各实 施例之间及与上述实验效果差异性不大。
[0179] 实施例十一本发明蓝莓复合粉小鼠肠道性能试验
[0180] 将本发明实施例2制备的蓝莓复合粉，用无菌水制备成活菌数为2X101()CFU/mL的 植物乳杆菌溶液，于4°C保存备用；
[0181] 选取普通昆明小白鼠60只，雌雄各半，18-20g，常规词养。从中随机挑选40只，每天 早晨9:00灌胃盐酸林可霉素0.2mL(20mg)/只，其它作为对照组，每天同一时间灌胃等量灭 菌生理盐水，连续一周，制备肠道菌群失调的小鼠模型。模型组小鼠饮食下降，未出现死亡 和明显的腹泻现象，排软粪，外形正常含水分较多，垫料潮湿。将40只肠道菌群失调小鼠，随 机分为2组，一组20只作为治疗组，每天灌胃保存好的植物乳杆菌溶液0.5ml (2 X IO1t3Cfu/ ml)/只，另20只作为自然恢复组，每天同一时间灌胃等量灭菌生理盐水，连续两周。整个试 验期21天，每天观察小白鼠的生长和排便情况，于第8、21天对蓝莓复合粉治疗组和自然恢 复组的小鼠进行称重，计算各组体重平均增长率，结果如表4;每5天测各组小鼠粪便大肠杆 菌数量，计算平均数，结果如表5。取小鼠粪便约O.lg，于无菌操作台内加入3粒玻璃珠（以 〇. Ig粪样加〇. 5mL稀释液），稀释并接种麦康凯琼脂培养基，计算每克湿便中的大肠杆菌数。
[0182] 表4:小鼠增重情况
[0186] 蓝莓复合粉治疗组小鼠体重平均增长率（67.96 % )显著高于自然恢复组 (32.14%);饲喂溶液后肠道大肠杆菌数量显著下降，降低97.07%，显著低于自然恢复组 (24.78% )，表明本发明蓝莓复合粉中的植物乳杆菌在小白鼠肠道内迅速定植，形成优势菌 群，并有效抑制大肠杆菌等病原菌的生长繁殖，并且定植时间长，持续、有效改善了肠道性 能。
[0187] 需要说明的是:本发明实施例3-6制备的蓝莓复合粉同样具有上述实验效果，各实 施例之间及与上述实验效果差异性不大。
[0188]实施例十二本发明蓝莓复合粉对机体免疫力的影响
[0189] 1实验目的
[0190] 通过运动耐力测试(小鼠游泳试验），验证本发明蓝莓复合粉的提高免疫力、抗疲 劳作用。
[0191] 2实验材料与试剂
[0192] 2.1供试药物：
[0193] 市售蓝莓复合粉(Gl);市售蓝莓复合粉(G2);本发明实施例2-6制备的蓝莓复合粉 (G3-G7)。
[0194] 2.2 试剂：
[0195] 肝/肌糖原测试盒，购自南京建成生物制品研究所;浓硫酸(AR)，南京化学试剂有 限公司；生理盐水，山东长富洁晶药业有限公司。
[0196] 3.实验动物
[0197] ICR小鼠，清洁级，体重18_22g，由宁夏医科大学比较医学中心提供，实验期间小 鼠自由饮食。
[0198] 4.主要仪器
[0199] 错制游泳箱（50cm X 50cm X 40cm)，铅丝，低温高速离心机：5804R型，Eppendrof公 司；水浴锅:DK-S26型，上海精宏实验设备有限公司；电子称:BS224S型，Sartorius公司；秒 表，温度计
[0200] 5.实验分组
[0201] 5.1剂量分组及受试样品给予时间随机将小鼠分为8组，每组10只，第1组至第7组 分别给Gl~G7的药物，第8组为空白对照组，给予等体积的双蒸水，每组每日均灌胃1次，灌 胃体积为0.2ml/10g，连续给予受试样品30天。
[0202] 5.2样品配制第1组至第7组:称取2.25g药物样品，用蒸馏水配至150ml;空白对照 组:双蒸水150ml