BW的剂量灌胃两种性别的小鼠，观察14天。实验期间未见明 显的中毒表现，观察期内无死亡。受试物对两种性别的小鼠的急性经口毒性(MTD)均大于 20.Og/kg · BW，根据《食品安全性毒理学评价程序和方法》（2003年版)急性毒性分级，属无 毒级。
[0094]表1小鼠的急性毒性试验结果
[0096] 30天喂养试验
[0097] 1.样品：按实施例1-4所述配方及工艺制备的样品。人拟用剂量为3.6g/60kg · BW·日。
[0098] 2.实验动物:选用体重55~80g，SPF级Wistar大鼠80只，雌雄各半。
[0099] 3.试验方法:剂量设计为：3.00、6.00、12.0(^/1^.81(分别相当于人拟用剂量的 50倍、100倍、200倍）。将大鼠随机分为三个受试物组及对照组，每组20只，雌雄各半。对照组 喂饲正常基础块料，受试物组则喂饲掺入不同剂量样品。动物单笼喂养，自由饮食，连续观 察30天。
[0100] 4.观察指标及结果：
[0101] 4.1-般情况观察：
[0102] 每天观察动物的表现、行为、毒性表现和死亡情况。每周称体重1次和两次食物摄 入量，计算每周及总的食物利用率。结果各组动物生长发育、活动均正常，无中毒表现和死 亡，各组动物每周体重、体重增加量、进食量和食物利用率及总体重增加量、进食量和食物
[0103] 利用率均无统计学差异(ρ>〇·〇5)。
[0104] 4.2血液学检查：
[0105]测定血红蛋白含量(Hgb)、红细胞(RBC)及白细胞(WBC)计数，白细胞分类(淋巴、单 核、中性粒、嗜酸、嗜碱）。实验末期血液学的各项指标均在正常值范围内，各组动物血红蛋 白、红细胞及白细胞计数、白细胞分类与对照组相比均无统计学差异(Ρ>〇.05)。
[0106] 4.3生化指标测定：
[0107] 测定血清内氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、尿素氮(BUN)、 胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、血糖(GLU)、总蛋白（TP)、白蛋白（ALB)、肌酐(CRE)。实验末期 试验动物各项生化指标均在正常值范围内，各组动物学医生化指标与对照组相比均无统计 学差异(Ρ>〇·〇5)。
[0108] 4.4大体观察及病理组织检查：
[0109] 试验末期颈椎脱白处死动物，观察各主要脏器及胸、腹腔大体病理改变。取出全部 动物的肝脏、肾脏、脾脏、睾丸，称重并计算脏器系数。取出对照组和高剂量组动物的肝脏、 肾脏、脾脏、睾丸（或卵巢）、胃及十二指肠，用12%福尔马林固定，石蜡包埋、切片、HE染色， 在光镜下进行组织学检查。各主要脏器(心、肝、脾、肺、肾、胃、肠等)均未见有意义的病理改 变。
[0110] 毒理试验结果表明本品对属于无毒级，可以长期服用。
[0111] 增加骨密度功能实验
[0112] 1.样品：按实施例1-4所述配方及工艺制备的样品。人拟用剂量为3.6g/60kg · BW ·日。碳酸钙。
[0113] 2.试验动物:4周断乳SD雄性大鼠，体重65-85g，每组10只。用含有胆固醇的饲料喂 养动物形成脂代谢紊乱动物模型。
[0114] 3 .剂量选择：实施例组1 -4、低钙对照组（15 0mg/100 g饲料）和碳酸钙对照组 (3600mg/kg.BW)。给予三个月，观察如下指标。
[0115] 4.结果：
[0116] 实验项目及结果如下表2-3所示。
[0117] 表2对大鼠体重、骨钙的影响
[0119] ~由表2可以看出，各实施例组与低钙对照组比较有显著性差异(PS 0.05)。
[0120] 表3对大鼠骨密度和骨钙含量的影响
[0122] 由表3可以看出，各实施例组与低钙对照组比较中点骨密度、远端骨密度和骨质最 疏松点骨密度具有显著性差异(P < 〇. 01)。
[0123] 由上述功能实验结果判断，骨钙含量及骨密度均显著于低钙对照组，可判定本品 具有增加骨密度的功能。
[0124] 以上所述实施例仅是为充分说明本发明而所举的较佳的实施例，本发明的保护范 围不限于此。本技术领域的技术人员在本发明基础上所作的等同替代或变换，均在本发明 的保护范围之内。本发明的保护范围以权利要求书为准。
【主权项】
1. 一种具有增加骨密度功能的保健食品组合物，其特征在于所述的保健食品组合物包 含:补骨脂提取物25-50重量份，葛根提取物25-50重量份，三七总皂苷20-40重量份，D-氨基 葡萄糖盐酸盐100-130重量份，碳酸钙120-150重量份、水解胶原蛋白80-120重量份； 所述组合物由如下方法制备而成：取补骨脂，加8-12倍量60-80%乙醇回流提取，提取 1-2小时，提取1-3次，提取液浓缩，滤过，回收乙醇并浓缩至55°C热测相对密度为1.15~ 1.25的稠液，干燥，粉碎，得干霄粉，即得补骨脂醇提取物;取葛根，加8-12倍量60-80 %乙醇 回流提取，提取1-2小时，提取1-3次，提取液浓缩，滤过，回收乙醇并浓缩至55°C热测相对密 度为1.15~1.25的稠液，干燥，粉碎，得干膏粉，即得葛根醇提取物;将上述补骨脂提取物、 葛根提取物与三七总皂苷、D-氨基葡萄糖盐酸盐、碳酸钙、水解胶原蛋白混合，加入临床上 可接受的适量常规辅料混合，按照常规工艺，制成硬胶囊剂、片剂、颗粒剂、粉剂、袋装茶剂、 软胶囊剂等口服固体制剂。2. 如权利要求1所述的保健食品组合物，其特征在于所述中药提取物和营养物质的重 量份为：补骨脂提取物40重量份，葛根提取物40重量份，二七总阜苷30重量份，D-氨基葡萄 糖盐酸盐112重量份，碳酸钙135重量份、水解胶原蛋白90重量份。3. 如权利要求1所述的保健食品组合物，其特征在于所述中药提取物和营养物质的重 量份为：补骨脂提取物42重量份，葛根提取物32重量份，二七总阜苷36重量份，D-氨基葡萄 糖盐酸盐100重量份，碳酸钙142重量份、水解胶原蛋白95重量份。4. 如权利要求1所述的保健食品组合物，其特征在于所述中药提取物和营养物质的重 量份为:补骨脂提取物32重量份，葛根提取物46重量份，二七总阜苷32重量份，D-氨基葡萄 糖盐酸盐105重量份，碳酸钙132重量份、水解胶原蛋白100重量份。5. 如权利要求1-4所述的任意一种保健食品组合物的制备方法，其特征在于该方法为 取补骨脂，加8-12倍量60-80%乙醇回流提取，提取1-2小时，提取1-3次，提取液浓缩，滤过， 回收乙醇并浓缩至55°C热测相对密度为1.15~1.25的稠液，干燥，粉碎，得干膏粉，即得补 骨脂提取物;取葛根，加8-12倍量60-80%乙醇回流提取，提取1-2小时，提取1-3次，提取液 浓缩，滤过，回收乙醇并浓缩至55°C热测相对密度为1.15~1.25的稠液，干燥，粉碎，得干膏 粉，即得葛根提取物;将上述补骨脂提取物、葛根提取物与三七总皂苷、D-氨基葡萄糖盐酸 盐、碳酸钙、水解胶原蛋白混合，加入临床上可接受的适量常规辅料混合，按照常规工艺，制 成硬胶囊剂、片剂、颗粒剂、粉剂、袋装茶剂、软胶囊剂等口服固体制剂。6. 如权利要求5所述的制备方法，其特征在于将原料补骨脂提取物、葛根提取物、三七 总皂苷、D-氨基葡萄糖盐酸盐、碳酸钙、水解胶原蛋白，搅拌均匀，制粒，干燥，整粒;干颗粒 加入硬脂酸镁，硬脂酸镁加入量为原料总量的0.5-0.6%，混合，装胶囊，即得硬胶囊剂。7. 如权利要求5所述的制备方法，其特征在于所述补骨脂的提取工艺参数为:提取3次， 每次加8倍量60%乙醇，提取时间为每次2小时;所述浓缩条件为:温度70°C、压力0.08Mpa进 行减压浓缩;所述干燥采用真空干燥法进行，干燥参数:温度为60°C，真空度为0.08Mpa，时 间为45-55小时。8. 如权利要求5所述的制备方法，其特征在于所述葛根的提取工艺参数为:提取3次，每 次加8倍量80 %乙醇，提取时间为每次2小时;所述浓缩条件为:温度70 °C、压力0.08Mpa进行 减压浓缩;所述干燥采用真空干燥法进行，干燥参数:温度为60 °C，真空度为0.08Mpa，时间 为40-50小时。9.如权利要求1-4所述的任意一种保健食品组合物在制备具有增加骨密度功能的食品 中的应用。
【专利摘要】本发明涉及一种增加骨密度的保健食品组合物及其制备方法，所述的保健食品组合物包含：补骨脂提取物25-50重量份，葛根提取物25-50重量份，三七总皂苷20-40重量份，D-氨基葡萄糖盐酸盐100-130重量份，碳酸钙120-150重量份、水解胶原蛋白80-120重量份。将补骨脂、葛根分别用不同浓度乙醇进行提取，分别将补骨脂提取物、葛根提取物、三七总皂苷、D-氨基葡萄糖盐酸盐、碳酸钙、水解胶原蛋白与其它加入临床上可接受的适量辅料混合，按照常规工艺，制成硬胶囊剂、片剂、颗粒剂、粉剂、袋装茶剂、软胶囊剂等口服固体制剂。所述的保健食品组合物具有增加骨密度的功能，且安全无毒副作用，可以长期服用，可用于预防和辅助治疗骨质疏松症。
【IPC分类】A61K31/7008, A61K33/10, A23L33/00, A61P19/10, A61K38/01, A61K36/488
【公开号】CN105639620
【申请号】
【发明人】崔俊昌
【申请人】崔俊昌
【公开日】2016年6月8日
【申请日】2015年12月29日