加物是：提高酶活性或抑制酶活性 的添加物。
[0093] 在另一优选例中，所述的用于调节酶活性的添加物选自下组：Ca' Co' Mn' Ba' Al3+、Ni2+、Zn2+、SFe2+。
[0094] 在另一优选例中，所述的用于调节酶活性的添加物是：可以生成Ca2+、Co' Mn' Ba' Al' Ni' Zn' 或 Fe2+的物质。
[0095] 在另一优选例中，所述的糖基供体是核苷二磷酸糖，选自下组：UDP-葡萄糖， ADP-葡萄糖，TDP-葡萄糖，CDP-葡萄糖，⑶P-葡萄糖，UDP-乙酰基葡萄糖，ADP-乙酰基葡 萄糖，TDP-乙酰基葡萄糖，⑶P-乙酰基葡萄糖，⑶P-乙酰基葡萄糖，UDP-木糖，ADP-木糖， TDP-木糖，CDP-木糖，⑶P-木糖，UDP-木糖，UDP-半乳糖醛酸，ADP-半乳糖醛酸，TDP-半 乳糖醛酸，⑶P-半乳糖醛酸，⑶P-半乳糖醛酸，UDP-半乳糖，ADP-半乳糖，TDP-半乳糖， CDP-半乳糖，⑶P-半乳糖，UDP-阿拉伯糖，ADP-阿拉伯糖，TDP-阿拉伯糖，CDP-阿拉伯糖， ⑶P-阿拉伯糖，UDP-鼠李糖，ADP-鼠李糖，TDP-鼠李糖，CDP-鼠李糖，⑶P-鼠李糖，或其他 核苷二磷酸己糖或核苷二磷酸戊糖，或其组合。
[0096] 在另一优选例中，所述的糖基供体是尿苷二磷酸糖，选自下组：UDP-葡萄糖， UDP-木糖，UDP-半乳糖醛酸，UDP-半乳糖，UDP-阿拉伯糖，UDP-鼠李糖，或其他尿苷二磷酸 己糖或尿苷二磷酸戊糖，或其组合。
[0097] 在另一优选例中，反应体系的pH为：ρΗ4· 0-10. 0,优选pH为5. 5-9. 0。
[0098] 在另一优选例中，反应体系的温度为：10°C -105°C，优选20°C -50°C。
[0099] 在另一优选例中，所述的达玛稀二醇合成代谢途径中的关键基因包括（但不限 于）：达玛烯二醇合成酶基因。
[0100] 在另一优选例中，所述的原人参二醇合成代谢途径中的关键基因包括（但不限 于）：达玛烯二醇合成酶基因、细胞色素 P450 CYP716A47基因和其的还原酶基因，或其组 入 口 〇 〇
[0101] 在另一优选例中，所述的原人参三醇合成代谢途径中的关键基因包括（但不限 于）：达玛烯二醇合成酶基因、细胞色素 P450 CYP716A47基因及其还原酶基因、及细胞色素 P450 CYP716A53V2基因及其还原酶基因，或其组合。
[0102] 在另一优选例中，所述的人参皂苷Rh2合成代谢途径中的关键基因包括（但不限 于）：达玛烯二醇合成酶基因、细胞色素 P450 CYP716A47基因及其还原酶基因、四环三萜 C-3位糖基转移酶基因 UGTPg45,或其组合。
[0103] 在另一优选例中，所述的人参皂苷Rhl合成代谢途径中的关键基因包括（但不限 于）：达玛烯二醇合成酶基因、细胞色素 P450 CYP716A47基因及其还原酶基因、及细胞色素 P450 CYP716A53V2基因及其还原酶基因、四环三萜C-6位的糖基转移酶基因 UGTPglOO,或 其组合。
[0104] 在另一优选例中，所述糖基催化反应的底物分别为式（I)、或（III)化合物，且所 述的产物分别为（II)、或（IV)化合物；
[0105] 在另一优选例中，所述的式（I)化合物为人参皂苷Rh2,并且式（II)化合物为人参 皂苷Rg3 ;
[0106] 或，所述的式（I)化合物为人参皂苷Rh2,并且式（II)化合物为3-〇-f3-(D-xylop yranosyl)-β -(D-glucopyranosyl)-PPD ；
[0107] 或，所述的式（I)化合物为人参皂苷F2,并且式（II)化合物为人参皂苷Rd ;
[0108] 或，所述的式（I)化合物为人参皂苷F2,并且式（II)化合物为3-0-β -(D-xylopy ranosyl)-β -(D-glucopyranosyl)-CK ；
[0109] 或，所述的式（III)化合物为人参皂苷Rhl，并且式（IV)化合物为人参皂苷Rf ;
[0110] 或，所述的式（III)化合物为人参皂苷Rhl，并且式（IV)化合物为人参皂苷Rg2 ;
[0111] 或，所述的式（V)化合物为人参皂苷Rg3,并且式（VI)化合物为3-〇-f3-(D-xylop yranosyl)-β -(D-glucopyranosyl)-PPD ；
[0112] 或，所述的式（V)化合物为人参皂苷Rd，并且式（IV)化合物为3-0-β -(D-xylopy ranosyl) - β - (D-glucopyranosyl) -CK。在本发明的第七方面，提供了 一种遗传工程化的宿 主细胞，所述的宿主细胞含有本发明第四方面所述的载体，或其基因组中整合本发明第三 方面所述的多核苷酸。
[0113] 在另一优选例中，所述的糖基转移酶为如本发明第二方面中所述的多肽或其衍生 多肽。
[0114] 在另一优选例中，编码所述糖基转移酶的核苷酸序列如本发明第三方面所述。
[0115] 在另一优选例中，所述的细胞为原核细胞或真核细胞。
[0116] 在另一优选例中，所述的宿主细胞为真核细胞，如酵母细胞或植物细胞。
[0117] 在另一优选例中，所述的宿主细胞为酿酒酵母细胞。
[0118] 在另一优选例中，所述的宿主细胞原核细胞，如大肠杆菌。
[0119] 在另一优选例中，所述的宿主细胞为人参细胞。
[0120] 在另一优选例中，所述的宿主细胞不是天然产生式（II)，（IV)，（VI)，（VIII)， (II)，（IIII)化合物的细胞。
[0121] 在另一优选例中，所述的宿主细胞不是天然产生稀有人参皂苷Rg3和/或稀有人 参皂苷Rf和/或稀有人参皂苷Rg2,和/或新的人参皂苷3-0-β -(D-xylopyranosyl)-f3 -(D-glucopyranosyl)-PPD 和 3-〇-β -(D-xylopyranosyl)-β -(D-glucopyranosyl)-CK 等 的细胞。
[0122] 在另一优选例中，所述的达玛稀二醇合成代谢途径中的关键基因包括（但不限 于）：达玛烯二醇合成酶基因。
[0123] 在另一优选例中，所述的宿主细胞含有原人参二醇合成代谢途径中的关键基因包 括（但不限于）：达玛烯二醇合成酶基因、细胞色素 P450 CYP716A47基因及其还原酶基因， 或其组合。
[0124] 在另一优选例中，所述的宿主细胞含有原人参三醇合成代谢途径中的关键基因包 括（但不限于）：达玛烯二醇合成酶基因、细胞色素 P450 CYP716A47基因及其还原酶、P450 CYP716A47的还原酶基因及其基因，或其组合。。
[0125] 在另一优选例中，所述的人参皂苷Rh2合成代谢途径中的关键基因包括（但不限 于）：达玛烯二醇合成酶基因、细胞色素 P450 CYP716A47基因及其还原酶基因、四环三萜 C-3位糖基转移酶基因 UGTPg45,或其组合。
[0126] 在另一优选例中，所述的人参皂苷Rhl合成代谢途径中的关键基因包括（但不限 于）：达玛烯二醇合成酶基因、细胞色素 P450 CYP716A47基因及其还原酶基因、及细胞色素 P450 CYP716A53V2基因及其还原酶基因、四环三萜C-6位的糖基转移酶基因 UGTPglOO,或 其组合。
[0127] 在本发明的第八方面，提供了第八方面所述的宿主细胞的用途，用于制备酶催化 试剂，或生产糖基转移酶、或作为催化细胞、或产生式（II)、（IV)或（VI)。
[0128] 在另一优选例中，所述的宿主细胞用于通过对人参皂苷Rh2、F2、Rg3、Rd和/或人 参阜苷 Rhl、Rgl 的糖基化反应，生产新阜苷 3-〇-β - (D-xylopyranosyl)-P - (D-glucopyr anosyI) -PF1D 和 3-〇- β -(D_xylopyranosyI) - β -(D-glucopyranosyI) -CKII 和 / 或稀有人 参皂苷Rg3和/或稀有人参皂苷Rf和/或稀有人参皂苷Rg2。
[0129] 在本发明的第九方面，提供了一种产生转基因植物的方法，包括步骤：将第八方 面所述的遗传工程化的宿主细胞再生为植物，并且所述的遗传工程化的宿主细胞为植物细 胞。
[0130] 在另一优选例中，所述的遗传工程化的宿主细胞为人参细胞。
[0131] 应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文（如实施例）中具 体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在 此不再一一累述。
【附图说明】
[0132] 下列附图用于说明本发明的具体实施方案，而不用于限定由权利要求书所界定的 本发明范围。
[0133] 图 1 显示（a) gGT29/gGT29-3 基因和（b) gGT29-4/gGT29-5/gGT29-6 和 gGT29-7 基 因 PCR产物的琼脂糖凝胶电泳图。（b)泳道1，核酸Marker ;泳道2, gGT29/gGT29-3基因 PCR 产物；(b)泳道 1，gGT29-4/gGT29-5/gGT29-6 基因 PCR 产物；泳道 2, gGT29-7 基因 PCR 产物；泳道3,核酸Marker。
[0134] 图2显示SDS-PAGE检测gGT29和gGT29-3在酿酒酵母中的表达；泳道1，空载 体PYES2重组子的裂解液上清；泳道2, gGT29-pYES2酵母重组子的裂解液上清；泳道3， gGT29-3-pYES2酵母重组子的裂解液上清。
[0135] 图3显示Western Blot检测gGT29和gGT29-3在酿酒酵母中的表达；泳道1，空 载体PYES2重组子的裂解液上清；泳道2, gGT29-pYES2酵母重组子的裂解液上清；泳道3， gGT29-3-pYES2酵母重组子的裂解液上清。
[0136] 图4显示糖基转移酶gGT29和gGT29-3催化人参皂苷Rh2和F2的产物的TLC检测 图谱；泳道1，pro及pro类型皂苷混合标样，泳道2, gGT29粗酶液（gGT29-pYES2酵母重组 子的裂解液上清）催化Rh2生成Rg3,泳道3, gGT29粗酶液催化Rh2对照，加入pYES2空质 粒酵母重组子裂解液替代酶液；泳道4, gGT29催化F2生成Rd，泳道5, gGT29催化F2对照， 加入PYES2空质粒酵母重组子裂解液替代酶液；泳道6, gGT29-3粗酶液（gGT29-3-pYES2酵 母重组子的裂解液上清）催化Rh2生成Rg3 ;泳道7, gGT29-3粗酶液催化F2生成RcL
[0137] 图5显示糖基转移酶gGT29和BvUGT73C10或gGT29和UGTPg45联合催化PH)产物 的TLC检测；（a) gGT29和BvUGT73C10联合催化PPD，泳道I，PH)及PH)类型皂苷混合标样； 泳道 2, BvUGT73C10 催化 PPD 生成 Rh2 ;泳道 3, gGT29 催化 Rh2 生成 Rg3 ;泳道 4, BvUGT73C10 和gGT29联合催化PH)生成Rg3 ; (b) gGT29和UGTPg45联合催化PPD，泳道I，PH)及PH)类 型皂苷混合标样；泳道2, UGTPg45催化PH)生成Rh2 ;泳道3, PPD ;泳道4, UGTPg45和gGT29 联合催化PH)生成Rg3。
[0138] 图6显示糖基转移酶BvUGT73C10和gGT29分别催化20 (R) -PPD和20 (R) -PPD以 及联合催化20 (R)-pro的产物TLC检测图谱；泳道1，BVUGT73C10催化20 (R)-pro生成 20 (R) -Rh2 ;泳道 2, gGT29 催化 20 (R) -Rh2 生成 20 (R) -Rg3 ;泳道 3, BvUGT73C10 和 gGT29 联 合催化 20 (R) -PH)生成 20 (R) -Rg3。
[0139] 图7显示糖基转移酶gGT29和BvUGT73C10或gGT29和UGTPg45联合催化PH)产物 的的HPLC检测结果。第一行，Rg3, Rh2和PH)混合标准样品；第二行，gGT29和BvUGT73C10 联合催化PPD，第三行，gGT29和UGTPg45联合催化PPD。
[0140] 图8显示糖基转移酶gGT29和BvUGT73C10或gGT29和UGTPg45联合催化PPD的 产物LC/MS检测结果。显示了标准样品Rg3的质谱图和图7中Pl峰（gGT29和BvUGT73C10 联合催化PH)的产物）和P2峰（gGT29和UGTPg45联合催化PH)的产物产物峰）的质谱图。
[0141] 图9显示产Rg3酵母工程菌A2细胞裂解液抽提物的HPLC检测结果，第一行样品： 原人参二醇（pro)、达玛烯二醇（DM)，人参皂苷Rh2和Rg3的混合标准样品；第二行样品：产 Rg3酵母工程菌A2细胞裂解液抽提物。
[0142] 图 10 显示 SDS-PAGE 检测 gGT29-4, gGT29-5, gGT29-6, gGT29-7 在重组大肠杆菌 中的表达。泳道1，gGT29-4-pET28a重组大肠杆菌体裂解总蛋白；泳道2, gGT29-4-pET28a 重组大肠杆菌体裂解上清；泳道3, gGT29-5-pET28a重组大肠杆菌体裂解总蛋白；泳道4， gGT29-5-pET28a重组大肠杆菌体裂解上清；泳道5, gGT29-6-pET28a重组大肠杆菌体裂解 总蛋白；泳道6, gGT29-6-pET28a重组大肠杆菌体裂解上清；泳道7, gGT29-7-pET28a重组 大肠杆菌体裂解总蛋白；泳道8，gGT29-7-pET28a重组大肠杆菌体裂解上清；泳道9,蛋白分 子量 Marker。
[0143] 图 11 显示 Western Blot 检测 gGT29-4, gGT29-5, gGT29-6, gGT29-7 在重组大肠杆 菌中的表达。泳道I，gGT29-4-pET28a重组大肠杆菌体裂解总蛋白；泳道2，gGT29-4-pET28a 重组大肠杆菌体裂解上清；泳道3, gGT29-5-pET28a重组大肠杆菌体裂解总蛋白；泳道4， gGT29-5-pET28a重组大肠杆菌体裂解上清；泳道5, gGT29-6-pET28a重组大肠杆菌体裂解 总蛋白；泳道6, gGT29-6-pET28a重组大肠杆菌体裂解上清；泳道7, gGT29-7-pET28a重组 大肠杆菌体裂解总蛋白；泳道8, gGT29-7-pET28a重组大肠杆菌体裂解上清。
[0144] 图 12 显示糖基转移酶 gGT29-4, gGT29-5, gGT29-6, gGT29-7 分别催化 Rh2 和 F2 的产物TLC检测图谱。泳道Rh2表示用皂苷Rh2为底物；泳道F2表示用皂苷F2为底物。 gGT29-4, gGT29-5, gGT29-6, gGT29-7表示用不同的酶液进行催化反应。
[0145] 图13显示糖基转移酶gGT29-4, gGT29-5, gGT29-6, gGT29-7分别催化Rhl的产物 TLC检测图谱。（a)泳道1，2和3分别代表糖基转移酶gGT29-4, gGT29-5和gGT29-6分别催 化Rhl的产物，泳道4代表原人参三醇型皂苷混合标样；(b)泳道1代表糖基转移酶gGT29-7 催化Rhl的产物，泳道2代表原人参三醇型皂苷混合标样。
[0146] 图14显示了显示糖基转移酶gGT29_7与其突变蛋白 gGT29-7-N343G, gGT29-7-A359P 和 gGT29-7-N343G/A359P 催化 Rhl 的检测结果（同时使用 UDP-葡萄糖和UDP-鼠李糖作为糖基供体）。第一行，Rgl，Rf, Rg2和Rhl混合标准样品； 第二行，gGT29-7 催化 Rhl ;第三行，gGT29-7-N343G 催化 Rhl ;第四行，gGT29-7-A359P 催化 Rhl ;第五行，gGT29-7-N343G/A359P 催化 Rhl。
[0147] 图15显示糖基转移酶gGT29_3和gGT29_14以UDP-xylose为糖基供体，催化人参 皂苷Rh2, Rg3和Rd产物的TLC检测图谱；(A)以表达空载体pET28a的肠杆菌裂解液上清 作为酶液进行催化；(B)以表达pET28a-gGT29-3的肠杆菌裂解液上清作为酶液进行催化； (C)以表达pET28a-gGT29-14的肠杆菌裂解液上清作为酶液进行催化。泳道Rh2，Rg3和Rd 分别表示用皂苷Rh2, Rg3和Rd作为底物，泳道M代表原人参二醇型皂苷混合标准。
【具体实施方式】
[0148] 本发明人经过广泛而深入的研究，首次提供糖基转移酶gGT29_7(SEQ ID NO. :61) 及其衍生多肽，如 gGT29(SEQ ID N0.:26)，gGT29-3(SEQ ID N0.:28)，gGT29-4(SEQ ID NO. :55)，gGT29-5(SEQ ID NO. :57)，gGT29-6(SEQ ID NO. :59)，gGT29-8(SEQ ID NO. :72)， gGT29-9(SEQ ID N0.:74)，gGT29-10(SEQ ID N0.:76)，gGT29-ll(SEQ ID Ν0·:78)， gGT29-12(SEQ ID N0.:80)，gGT29-13(SEQ ID N0.:82)gGT29-14(SEQ ID Ν0·:84)、 gGT29-15(SEQ ID N0.:86)、gGT29-16(SEQ ID N0.:88)、gGT29-17(SEQ ID Ν0·:90)、 gGT29-18(SEQ ID N0.:92)、gGT29-7-N343G(SEQ ID N0.:93)、gGT29-7-A359P(SEQ ID NO. :94)、gGT29-7-N343G/A359P(SEQ ID NO. :95)在萜类化合物糖基化催化及新皂苷合成 中的应用。具体地，本发明的糖基转移酶能特异和高效地催化四环三萜化合物底物的和/ 或将来自糖基供体的糖基转移到四环三萜