上的液体撞击采样器，分别采用薄膜过滤法对样品挑战支路收集液进行薄膜过滤，36°C ±1°C下培养18?24h后观察是否有菌生长。
[0069]步骤⑶:结果判定:阳性对照支路挑战菌总数大于14CFU时，试验有效，否则试验无效；样品挑战支路收集液均无菌生长时，判为符合要求，否则不符合要求。
[0070]步骤(9):出具试验报告:试验报告应至少包含以下方面:
[0071]a)样品识别；
[0072]b)阳性对照支路挑战菌总数；
[0073]c)样品挑战支路细菌生长情况；
[0074]d)任何偏离本试验方法的描述。
[0075]该试验重要的一是保证抽吸时间30分钟，二是最终挑战微生物数量。气溶胶发生时间也很重要，它也是决定最终挑战微生物数量的关键因素。
[0076]所述的细菌挑战悬液采用以下方法制备:
[0077]将金黄色葡萄球菌ATCC 6538从工作菌株斜面上接种到TSB培养基或营养肉汤中，36°C ±1°C下培养18?24h，用无菌生理盐水或蛋白胨水稀释至适宜浓度。关于细菌挑战悬液的浓度，需要针对不同的试验装置经过验证，不同的试验装置需要不同浓度。本实施例的试验装置需要的浓度大约3X 107CFU/mL。
[0078]本发明的试验方法中，用到的试剂和材料如下:
[0079]采用金黄色葡萄球菌ATCC 6538制备细菌挑战悬液；采用无菌生理盐水或蛋白胨水(lg/L)，作为稀释液和收集液；采用大豆酪蛋白琼脂培养基(TSA)或营养琼脂培养基，作为金黄色葡萄球菌的保存及计数培养基；采用大豆酪蛋白液体培养基(TSB)或营养肉汤培养基，作为金黄色葡萄球菌的增菌培养基；分析滤膜的标称孔径为0.45 μ m，直径约为47mm0
[0080]在本发明的试验装置首次使用前，需对该试验装置进行确认试验，保证每个样品口在50mL/min的流量下，30min内通过的金黄色葡萄球菌数量至少为104CFU。进行确认试验时，参照上述步骤(I)?步骤(9)，所有支路均不连接样品挑战组件进行试验，相当于全为阳性对照试验。
[0081]确认试验是对试验系统各支路均匀性以及细菌挑战悬液浓度是否符合试验要求的综合考量。确认宜至少进行三次。
[0082]本发明的试验装置和试验方法适用于对输液、输血器具用空气过滤器成品的细菌截留能力进彳丁评价。
[0083]输液、输血器具用空气过滤膜材细菌截留能力的评价可参考本发明的试验方法。
[0084]本发明的试验方法宜由经培训的试验人员在生物安全实验室中进行操作。
[0085]以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不是本发明的全部实施例，不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
[0086]除说明书所述技术特征外，其余技术特征均为本领域技术人员已知技术，为了突出本发明的创新特点，上述技术特征在此不再赘述。
【主权项】
1.气溶胶细菌截留试验装置，其特征是，包括用于提供微生物气溶胶的气溶胶室、用于装载供试空气过滤器的样品挑战组件、对透过供试空气过滤器的细菌进行收集的采样器和驱动微生物气溶胶流动的抽吸系统；所述气溶胶室内设有微生物气溶胶发生器，所述的抽吸系统包括负压栗和管路； 所述管路包括一路阳性对照支路和多路样品测试支路，阳性对照支路和多路样品测试支路在一端汇集到一个总管路上并通过总管路连接负压栗，阳性对照支路和多路样品测试支路在另一端分别与气溶胶室相连通； 阳性对照支路和每一路样品测试支路上均设有一个样品挑战组件和一个采样器，采样器与气溶胶室之间的管路为进气管路，采样器与负压栗之间的管路为抽吸管路；所述阳性对照支路上的样品挑战组件设置在抽吸管路上，所述样品测试支路上的样品挑战组件设置在进气管路上。2.根据权利要求1所述的气溶胶细菌截留试验装置，其特征是，所述的气溶胶室为正方体状的箱子，气溶胶室采用透明材料制作。3.根据权利要求1或2所述的气溶胶细菌截留试验装置，其特征是，所述气溶胶室的侧壁上设置有通气口，通气口处装有空气过滤器，气溶胶室的内部设有风扇。4.根据权利要求1所述的气溶胶细菌截留试验装置，其特征是，在所述总管路上设有一气体平衡管道，气体平衡管道在一端与总管路连通。5.根据权利要求4所述的气溶胶细菌截留试验装置，其特征是，所述的气体平衡管道、阳性对照支路和每一路样品测试支路上分别设有一个带有调节阀的浮子流量计。6.根据权利要求5所述的气溶胶细菌截留试验装置，其特征是，所述的阳性对照支路和每一路样品测试支路上分别设有一个终端过滤器，所述终端过滤器设置在采样器和带有调节阀的浮子流量计之间。7.根据权利要求3所述的气溶胶细菌截留试验装置，其特征是，所述的样品挑战组件包括一个套筒，套筒在一端与所处的管路相连通，套筒在另一端开口 ；套筒的开口端设有将所述开口封闭的封底，所述的封底呈凹槽状，套筒另一端的管路穿过封底伸入套筒内部用于装载供试空气过滤器；封底与套筒的配合处设置有密封垫。8.根据权利要求7所述的气溶胶细菌截留试验装置，其特征是，所述的采样器为液体撞击采样器，液体撞击采样器包括采样瓶，采样瓶的内部设有收集液，采样瓶的顶端开口处设有密封盖；一根采集管穿过密封盖的顶端延伸至收集液内，采集管位于采样瓶外部的一端设有采集口，采集口与所述进气管路相连通；密封盖的侧面设有抽气口，抽气口与所述抽吸管路相连通。9.基于权利要求8所述的气溶胶细菌截留试验装置的试验方法，其特征是，包括以下步骤: 步骤(I):试验前，试验装置经过消毒灭菌处理，并以无菌操作的方式连接试验管路、将供试空气过滤器装入所述样品挑战组件的套筒内、在所述微生物气溶胶发生器内加入细菌挑战悬液； 步骤(2):启动微生物气溶胶发生器，向气溶胶室内喷射微生物气溶胶，同时打开风扇以使气溶胶室内的气溶胶均匀分散； 步骤(3):在启动微生物气溶胶发生器和风扇三分钟后，启动负压栗，调节阳性对照支路和各路样品测试支路的流量至50ml/min，同时观察各采样瓶中的气泡逸出情况； 步骤(4):启动负压栗三分钟后，关闭微生物气溶胶发生器； 步骤(5):关闭微生物气溶胶发生器二十七分钟后，关闭负压栗； 步骤￠):取下阳性对照支路上的液体撞击采样器，用无菌生理盐水或蛋白胨水对阳性对照支路收集液进行十倍梯度稀释，选择适宜的稀释级采用平板倾注法或薄膜过滤法进行分析，36°C 土 1°C下培养18?24h后进行计数并计算挑战菌总数； 步骤(7):取下样品挑战支路上的液体撞击采样器，分别采用薄膜过滤法对样品挑战支路收集液进行薄膜过滤，36°C 土 1°C下培养18?24h后观察是否有菌生长； 步骤⑶:结果判定:阳性对照支路挑战菌总数大于14CFU时，试验有效，否则试验无效；样品挑战支路收集液均无菌生长时，判为符合要求，否则不符合要求。10.根据权利要求9所述的试验方法，其特征是，所述的细菌挑战悬液采用以下方法制备: 将金黄色葡萄球菌ATCC 6538从工作菌株斜面上接种到TSB培养基或营养肉汤中，360C ±1°C下培养18?24h，用无菌生理盐水或蛋白胨水稀释。
【专利摘要】气溶胶细菌截留试验装置及试验方法，属于细菌截留试验技术领域，试验装置的结构包括用于提供微生物气溶胶的气溶胶室、用于装载供试空气过滤器的样品挑战组件、对透过供试空气过滤器的细菌进行收集的采样器和驱动微生物气溶胶流动的抽吸系统，所述气溶胶室内设有微生物气溶胶发生器，所述的抽吸系统包括负压泵和管路，样品挑战组件和采样器均设置在所述管路上，所述管路包括一路阳性对照支路和多路样品测试支路；所述的试验方法包括细菌挑战试验和结果判定。本发明通过气溶胶细菌截留试验来评价气体过滤器的细菌截留能力，且适用于评价输液、输血器具用空气过滤器是否满足临床需要的通用要求，试验结果的准确度高。
【IPC分类】C12Q1/02, C12M1/00
【公开号】CN105176793
【申请号】
【发明人】王文庆, 吴平, 袁晓晶, 郝树彬, 张静
【申请人】山东省医疗器械产品质量检验中心
【公开日】2015年12月23日
【申请日】2015年9月6日