一种从四方藤中提取纯化岩白菜素的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种从四方藤中提取、纯化岩白菜素的方法，属于天然药物开发利用
技术领域。
【背景技术】
[0002] 四方藤（属于葡萄科（KZteceaeO白粉藤属（ ZiiM.)植物，因其茎、枝、叶柄呈锐四方形而得名，又名方藤、宽筋藤、蚂蝗藤等。四方藤主要 分布于我国的广西、广东、云南等南方地带，资源丰富，其性酸、涩、甘、平，具有活血散瘀、祛 风湿、舒筋络、消炎等功效，在我国民间广泛用于风湿痹痛、腰肌劳损、外伤、出血等病痛的 治疗，具有良好疗效。例如百色地区农民直接用四方藤鲜叶捣烂外敷止血；百色医院将四方 藤制成粉剂和注射剂，用于治疗内外伤出血，十二指肠出血，胃炎等疾病。四方藤收载于《广 西中草药》、《广西药用植物名录》、《中国药典》（1977年版一部)、《中药大辞典》等典籍中， 因其来源丰富、价格低廉、疗效广泛而显著，是一种极具有开发利用价值的特色民族药用植 物。尽管四方藤在我国少数民族民间具有悠久的药用历史与经验，但由于四方藤化学成分 与药理研究的缺乏，在四方藤有效成分的开发利用上，尚未有深度产品的出现，其在市场上 仍以原药材的形式出售，价格低廉。岩白菜素的结构：
岩白菜素又名虎儿草素、岩白菜内酯，分子式为C14H16O9，是一种具有异香豆素结构的天 然化合物。岩白菜素及其衍生物具有抗炎、止咳、镇痛、抑菌、抗氧化等多种药理活性。岩白 菜素已作为镇咳祛痰药收载于《中华人民共和国药典》各版本中，在临床上用于支气管炎、 肺气肿、胃炎等疾病的治疗，具有良好疗效，是一种药理活性广泛、疗效显著、毒副作用低的 天然药物。
[0003] 由于化学合成的困难，岩白菜素主要用从天然药用植物中提取、纯化法制备。目 前，岩白菜素提取方法的报道较多，而对于其纯化方法的报道较少。岩白菜素的提取方法主 要有索式提取法、超声波提取法、超临界提取法、有机溶剂回流提取法、碱提取法等。然而， 目前用于纯化岩白菜素提取物的方法难于规模化制备。如硅胶柱层析法是实验室常用的分 离手段，但硅胶不能回收，洗脱剂为石油醚、乙酸乙酯、氯仿等有毒有机溶剂，成本高，操作 难度大，不能用于产业化制备；重结晶法，必须是待结晶溶液中岩白菜素的含量高达一定程 度时才能使用，普通的岩白菜素提取物，在没有经过其它方法富集之前，比较难于结晶而无 法直接用重结晶法纯化。鉴于此，目前有机溶剂提取法尚停留在获得含有岩白菜素粗提物 的阶段，而要利用该提取法大批量制备岩白菜素纯品，必须开发出可产业化放大、成本低的 纯化方法。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供一种适合产业化放大，成本低的从四方藤中制备原料药岩 白菜素的方法。
[0005] 本发明通过如下技术方案实现的。
[0006] -种从四方藤中提取纯化岩白菜素的方法，包括如下步骤： (1) 将四方藤粉碎，过筛，按照质量体积比为1 :8~20加入40~60%的乙醇溶液回流提 取； (2) 固液分离得到滤液，将滤液浓缩至其原体积的1/2~1/3,同时回收溶剂； (3) 向浓缩液中加入大孔树脂静态吸附6~8小时，大孔树脂选自AB-8、D3520、D101 ; (4) 将吸附后的大孔树脂上柱，依次先用蒸馏水、10%的乙醇溶液除去杂质； (5) 用20%的乙醇溶液洗脱，收集20%乙醇洗脱液； (6) 将20%乙醇洗脱液浓缩，得到岩白菜素粗品； (7) 将岩白菜素粗品用乙醇重结晶得到岩白菜素纯品。
[0007] 上述步骤（2)中，固液分离的方法为过滤或离心分离，滤液浓缩至岩白菜素浓度2 mg/mL〇
[0008] 上述步骤（4)中，用2倍柱体积的蒸馏水和2倍柱体积的10%乙醇除去杂质。
[0009] 上述步骤（5)中，用7倍柱体积的20%乙醇洗脱。
[0010] 上述步骤（6)中，所述的浓缩方法为真空浓缩或膜浓缩。
[0011] 上述步骤（7)中，用95%的乙醇进行重结晶。
[0012] 本发明的优点在于：采用40~60%的酒精提取，具有绿色无毒、提取率高、成本低、 易回收利用等优点；采用大孔树脂纯化和富集，具有吸附量大、可重复利用、易于产业化放 大、成本低等优点，经过大孔树脂纯化后，可获得岩白菜纯度在80%以上的粗品；将大孔树 脂纯化后是岩白菜素粗品，经过乙醇溶液重结晶便可获得满足作为原料药使用的岩白菜素 纯品；本发明原料来源广泛，价格便宜，生产成本低，生产条件温和，对环境污染小。
【附图说明】
[0013] 图1为本发明提取纯化工艺流程图； 图2不同大孔树脂的静态饱和吸附率； 图3不同大孔树脂的静态解吸率。
【具体实施方式】
[0014] 以下通过实施例对本发明作进一步说明。
[0015]实施例1 将500 g的四方藤粉末，加入50%乙醇溶液，使四方藤粉末的质量与乙醇的体积比为 1:20,回流提取1次，每次2 h，离心、过滤、弃去废渣收集得到滤液，将滤液浓缩，同时回收 溶剂。将浓度为2. 0 mg/mL的浓缩液，按体积与大孔树脂质量为1:1的比例，加入AB-8大 孔树脂中进行静态吸附，吸附时间为8 h，然后上柱。先用2倍柱体积的蒸馏水和2倍柱体 积的10%乙醇除去杂质，然后再用7倍柱体积20%乙醇溶液进行洗脱，收集20%乙醇洗脱部 分。将洗脱液浓缩，得到岩白菜素粗品10.3 g，95%乙醇重结晶后得到岩白菜素纯品8. 9 g°
[0016] 实施例2 将IKg的四方藤粉末，加入50%乙醇溶液，使四方藤粉末与乙醇的质量体积比为1:15， 回流提取2次，每次2 h，离心、过滤、弃去废渣收集得到滤液，将滤液浓缩，同时回收有机溶 剂。将浓度为2. 0 mg/mL的浓缩液，按体积与大孔树脂质量为1:1的比例，加入D3520大孔 树脂中进行静态吸附，吸附时间为8 h，然后上柱。先用2倍柱体积的蒸馏水和2倍柱体积 的10%乙醇除去杂质。然后再用7倍柱体积20%乙醇溶液进行洗脱，收集20%乙醇洗脱部 分。将洗脱液浓缩，得到岩白菜素粗品20.5 g，95%乙醇重结晶后得到岩白菜素纯品17. 6 g°
[0017] 实施例3 将10 Kg的四方藤粉末，加入60%乙醇溶液，使四方藤粉末与乙醇的质量体积比为 1:10,回流提取3次，每次2 h，离心、过滤、弃去废渣收集得到滤液，将滤液浓缩，同时回收 有机溶剂。将浓度为2. 0 mg/mL的浓缩液，按