一种用于治疗肝癌的新的双萜化合物的利记博彩app
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物领域，具体涉及从尾叶香茶菜的干燥全草中分离得到的一种新的 双萜类化合物及其制备方法和医药用途。
【背景技术】
[0002] 尾叶香茶菜Isodon excisa(maxim. )hara属香茶菜属植物，在亚洲东部和非洲西 部广为分布，全世界约有150种，中国约有90种25个变种，广泛分布于全国各地。其中约 有30种在民间可供药用，主要作为清热解毒、抗癌、消炎、健脾、活血、抗菌药来使用。
[0003] 尾叶香茶菜含有二萜、三萜、留醇、脂肪酸以及少量的黄酮、倍半萜、连烃甙等多种 活性成分，其中以二萜类成分为主，已知有1〇〇余种。近年来，人们从这些种植物中提取分 离到多种二萜类化合物，并通过药理实验证明部分二萜化合物具有良好的抗菌、消炎、抗氧 化、调节免疫力和抗肿瘤活性。
[0004] 现在研究表明尾叶香茶菜具有抗肿瘤、抗氧化、免疫调节、抗菌、抗炎等药理作用。 尾叶香茶菜提取的二萜类化合物可以显著的抑制人体鼻咽癌细胞、宫颈癌细胞等的生长。 尾叶香茶菜提取物对小鼠离体脏器组织中的过氧化物生成有非常显著的抑制作用，表明其 中含有的化合物能抑制组织液和细胞中氧化性物质对不饱和脂肪酸的氧化破坏，达到保护 细胞作用。机体的免疫能力低下容易收到病毒和细菌的入侵，或者是受损的细胞、坏死的细 胞、变形的细胞得不到快速的清除，就容易受到攻击，抗病毒能力弱，比较正常人容易患疾 病，在相同条件下或者疾病加重。通过实验研究，发现该植物能加强小鼠的特异性免疫和非 特异性免疫。尾叶香茶菜抗菌活性成分的研究始于1954年，有学者研究发现该植物的乙醇 提取物可以抑制抑制革兰氏阳性细菌（Gram-positivebacteria)的生长。此外，在临床上 对于虫蛇咬伤、跌打损伤、消炎退热有治疗的功效。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供一种从尾叶香茶菜的干燥全草中分离得到的一种新的双 萜类化合物；
[0006] 本发明的另一目的在于提供该新化合物的制备方法；
[0007] 本发明的再一目的在于提供该化合物用于制备治疗肝癌药物的医药用途。
[0008] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
[0009] 具有下述结构式的化合物（I )，
[0010]
[0011] 所述的化合物（I )的制备方法，包含以下操作步骤：(a)将尾叶香茶菜的干燥全 草粉碎，用70~80 %乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙 酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b) 步骤（a)中乙酸乙酯萃取物用大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱10个柱体积，再用75%乙 醇洗脱12个柱体积，收集75 %乙醇洗脱液，减压浓缩得75 %乙醇洗脱物浸膏；（c)步骤（b) 中75%乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1、40:1、20 :1、10:1和1:1的二 氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；（d)步骤（c)中组分3用正相硅胶进一步分离，依次 用体积比为25:1、20:1和10:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤（d)中 组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为70%的甲醇水溶液等度洗 脱，收集9~13个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物（I )。
[0012] 进一步地，所述大孔树脂为AB-8型大孔吸附树脂。
[0013] 进一步地，所述用乙醇热回流提取采用的乙醇浓度为75%。
[0014] -种药物组合物，其中含有治疗有效量的所述的化合物（I )和药学上可接受的 载体。
[0015] 所述的化合物（I )在制备治疗肝癌的药物中的应用。
[0016] 所述的药物组合物在制备治疗肝癌的药物中的应用。
[0017] 本发明化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。
[0018] 该药物组合物含有治疗有效量的本发明化合物（I)，其余为药物学上可接受的、 对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。
[0019] 所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料 以及药物制品辅剂。将本发明的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。本发明药物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等；用于注射时，可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。
【附图说明】
[0020] 图1为化合物（I )结构式；
[0021] 图2为化合物（I )理论E⑶值与实验E⑶值比较；
[0022] 图3为化合物（I )对IfepG2及L02细胞增殖的影响（n = 3)。
【具体实施方式】
[0023] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0024] 实施例1 :化合物（I)分离制备及结构确证
[0025] 药材和试剂来源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷为分析纯，购自上海 凌峰化学试剂有限公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。尾叶香茶菜的干 燥全草购于安徽亳州中药材市场，产地广东。
[0026] 制备方法：（a)将尾叶香茶菜的干燥全草（8kg)粉碎，用75%乙醇热回流提取 (25LX3次），合并提取液，浓缩至无醇味（6L)，依次用石油醚（6LX3次）、乙酸乙酯（6LX3 次）和水饱和的正丁醇（6LX3次）萃取，浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物 (315g)和正丁醇萃取物；(b)步骤（a)中乙酸乙酯萃取物用纯净水溶解至2L，医用脱脂棉 过滤，滤液用AB-8型大孔树脂（1.5kg)分离，依次用10%乙醇（IOL)和75% (12L)乙醇洗 脱，收集75 %乙醇洗脱液，减压浓缩得75 %乙醇洗脱物浸膏（155g);(c)步骤（b)中75 %乙 醇洗脱浸膏用200-300目正相硅胶分离，依次用体积比为80:1 (10个柱体积）、40:1 (8个柱 体积）、20:1 (8个柱体积）、10:1 (8个柱体积）和1:1 (5个柱体积）的二氯甲烷-甲醇梯度 洗脱得到5个组分；（d)步骤（c)中组分3 (36g)用200-300目正相硅胶进一步分离，依次 用体积比为25:1 (8个柱体积）、20:1 (8个柱体积）和10:1 (5个柱体积）的二氯甲烷-甲 醇梯度洗脱得到3个组分；(e)步骤（d)中组分2 (12g)用十八烷基硅烷键合的反相硅胶 0DS-C18分离，用体积百分浓度为70%的甲醇水溶液等度洗脱，收集9~13个柱体积洗脱 液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物（I )(25mg)。
[0027] 结构确证：HR-ES頂S显示[M+Na]+为m/z 539. 2608,结合核磁特征可得分子式为 C29H4A，不饱和度为 10。核磁共振氢谱数据Sh (ppm，DMS0-d6, 500MHz) :H-1 (2.52, t，J = 13. 5)，H-l(l. 46, br，d，J = 13. 5)，H-2(2. 51，m)，H-3(5. 53, t，J = 4. 0)，H-4(2. 08, dd， J = 11. 0,4. 0)，H-5(4. 84, dd，J = 11. 0,4. 5)，H-7(l. 79, t，J = 15. 5)，H-7(l. 25, dd， J = 15. 5,4. 0)，H-8 (I. 97, m)，H-8 (I. 48, t，J = 13. 5)，H-9 (3. 40, dd，J = 10. 0, 5. 5)， H-ll(2.54，d，J = 1.5)，H-12(4. 17，d，J = 1.5)，H-16(1.05，d，J = 7.5)，H-17(0.71，s)， H-18 (I. 06, s)，H-19 (0? 53, s)，H-20 (0? 70, s)，H-2'（7. 57, br，d，J = 7. 0)，H-3'（7. 33, br， t，J = 7. 0)，H-4'（7. 35, br，t，J = 7. 0)，H-5'（7. 34, br，t，J = 7. 0)，H-6'（7. 58, br，d， J = 7. 0)，H-7'（7. 69, d，J = 16. 5)，H-8'（6. 62, d，J = 16. 5)，5-OH(4. 04, d，J = 4. 5)， 9- 0H(3. 60, d，J = 5. 5)，11-OH(5. 37, s)，12-OH(5. 37, s)，15-OH(4. 55, s);核磁共振碳谱 数据 S c (ppm，DMS0-d6,125MHz) :41. 7 (CH2,1-C)，35. 8 (CH，2-C)，78. 0 (CH，3-C)，54. I (CH， 4-C)，63. 9 (CH，5-C)，49. 5 (C，6-C)，31. 8 (CH2, 7-C)，28. 6 (CH2,8-C)，79. 7 (CH，9-C)，38. 4 (C， 10- C)，59. 0 (CH，11-C)，56. 6 (CH，12-C)，56. 6 (C，13-C)，207. 3 (C，14-C)，85. 7 (C，15-C)， 15. 9(CH3, 16-C)，18. 3(CH3, 17-C)，25. 2(CH3,18-C)，11. 7(CH3, 19-C)，10.1 (CH3,20-C)， 134. 8(C，1' -C)，128. 3(CH，2' -C)，127. 2(CH，3' -C)，130. 5(CH，4' -C)，129. 2(CH，5' -C)， 128. 3(CH，6' -C)，145. 1(CH，7' -C)，118. 7(CH，8' -C)，167. 1(C，9' -C);碳原子标记参见 图1。红外光谱表明该化合物含有羟基（3584, 3500和3377cm 4，羰基（1708和1689cm 4 和芳环（1604和1498cm1)基团。1H NMR谱显示该化合物含有一个反式肉桂酸酯基团〔 S H7. 57 (br，d，J = 7. 0Hz，H-2'），7. 33 (br，t，J = 7. 0Hz，H-3'），7. 35 (br，t，J = 7. 0Hz， H-4'），7. 34(br，t，J = 7. 0Hz，H-5'），7. 58(br，d，J = 7. 0Hz，H-6'），7. 69(d，J = 16. 5Hz， H-7'），6. 62 (d，J = 16. 5Hz，H-8'）； S C134.8 (1，-C)，128.3 (2, -C)，127.2 (3, -C)， 130. 5(4' -C)，129. 2(5' -C)，128. 3(6' -C)，145. 1(7' -C)，118. 7(8' -C)，167. 1(9' -C)〕，五 个含氧次甲基〔S H5. 53(t，J = 4. 0Hz，H-3)，4. 84(dd，J = 11. 0 和 4. 5Hz，H-5)，3. 40(dd， J = 10.0 Hz 和 5. 5Hz，H-9)，2. 54(d，J = I. 5Hz，H-ll)和 4. 17(d，J = I. 5Hz，H-12)〕，三 个亚甲基，以及五个甲基〔S HI. 05 (d，J = 7. 5Hz，H3-16)，0? 71 (s，H3-17)，I. 06 (s，H3-18)， 0. 53(s，H3-19)和0. 70(s，H3-20)〕。HMBC谱中，H-3与C-9'的相关性证实了该肉桂酸酯基 位于C-3位上。除了反式肉桂酸酯部分， 13C NMR和DEPT谱显示20个碳信号，除了对应上 述的功能单元外还包括五个季碳（一个羰基碳S C207. 3和一个含氧碳5 C85. 7)。上述核 磁数据表明该化合物是一个双萜醇肉桂酸酯类化合物。HMBC谱中，H2-I与C-2, C-3, C-4， C-15 和 C-16 ;H-3 与 C-l，C-15,和 C-9' ；H3-16 与 C-l，