骤如下：
[0057] 将第二组分和第=组分溶解于第四组分中，得到初溶液，然后将该溶液和第一组 分混合，发生交联反应形成水凝胶。
[0058] 本发明还提供了医用组织密封剂的临床应用，所述应用主要用于眼部手术后小创 口表面的封闭，阻止渗液泄漏，避免引起眼内炎症或屈光等问题，作为缝合方式的替代疗 法。
[0059] 本发明所制备的水凝胶，亲水性组分选择N-径基班巧酷亚胺封端的聚乙二醇，其 结构上含有醋键，与亲核组分反应后，醋键仍存在于最终交联产物中，可在人体内降解，而 且亲水化合物主体聚乙二醇也会在人体内分解成小分子。通过调节组分比例可使降解时间 控制在3-7天。
[0060] 所述的水凝胶可W原位交联成型，使用时，可W临时配制，因此，本发明还提供一 种试剂盒，其中包括本发明所述的四种组分，使用时采用第四组分缓冲液溶解第二组分，然 后立即混合于第一组分中形成水凝胶，通过涂布器将水凝胶涂敷覆盖在创口组织表面，有 利于粘附，该材料应具有足W耐受由患者运动、组织移位、组织内存在的流体静力等产生的 张力机械特性。
[0061] 本发明的试剂盒可W包装成1人一次使用的剂量，也可W包装成10人一次的使用 剂量，可大可小，W适合配制为宜。试剂盒中还可W包括说明书，使用器械，配制容器等，W 方便使用。
[0062] 为了便于观察组织密封剂的使用情况，本发明中第=组分为显色剂，显色剂可W 加在第一组分或第二组分粉末中，显色剂包括但不限于抑&C蓝色#1、抑&C蓝色#2、抑&C蓝 色#3。
[0063] 本发明的医用组织密封剂主要是用于封闭人工晶状体术后的角膜创口，阻止渗液 泄漏而引起感染、疼痛等并发症，还可用于屯、脏、腹腔、胸腔等手术过程中阻止创面渗血和 小静脉出血，促进创伤愈合，防止组织粘连，封闭缺损组织等。本发明所述水凝胶的主要原 料是采用全合成、具有生物相容性的材料，通过化学改性链接活性亲水和亲核基团，使用时 经过物理混合在原位形成水凝胶。通过调整亲水性第一组分和亲核性第二组分的比例，审U 备一系列物理性能不同，降解时间不同的水凝胶。采用可生物降解材料制备的水凝胶，在生 物体内保持一定时间后自然降解成小分子排除体外，可避免二次手术，减少病人痛苦，降低 治疗费用，同时还可避免由于使用天然材料而引起疾病传播的风险。
【附图说明】：
[0064] 图1不同亲水组分与亲核组分的配方水凝胶的溶胀率 阳0化]图2不同亲水组分和亲核组分配方的水凝胶的成胶时间
[0066] 图3水凝胶植入术后3天动物实验观察结果
[0067] 图4水凝胶植入术后7天动物实验观察结果
【具体实施方式】
[0068] W下通过实施例进一步说明本发明。实施例给出详细的实施方式和具体操作，用 于理解本发明。
[0069] 本发明的医用组织密封剂的制备，其中主要是通过第一组分和第二组分经混合工 具混合发生共价交联形成水凝胶。反应机理为：亲水组分（第一组分）的N服与亲核组分 (第二组分）的NHz共价键结合，发生聚合反应，生成水凝胶，少量副产物生物相容性较好， 无毒无刺激性，随凝胶的降解排除体外，反应示意如下：
[0071] 其中RUR3为H、C册、C肥C册、C肥C肥C册中的任意一种，包括RUR3为相同结构 等；R2为OCC肥CO、OCC肥C肥CO、OCC肥C肥C肥CO等；R4为畑或S ;R5为OC (C肥）。0)、聚乙二 醇等。
[0072] 本发明所提供的医用组织密封剂，满足W下特征指标：
[0073] 1)胶化时间小于20s;
[0074] 2)溶胀率优选为0-300%
[0075] 3)破裂强度不小于SOmmHg;
[0076] 4)降解时间为3-7天。
[0077] 医用组织密封剂试剂盒
[0078] 本发明的试剂盒，包括前述的含有亲水官能团的第一组分、亲核官能团的第二组 分、显色剂第=组分和生理缓冲液的第四组分，其中：
[0079] 亲水官能团（第一组分）：优选二臂N-径基班巧酷胺聚乙二醇醋 (2-arm-PEG-NHS，分子量5000)，结构式见下方：
[0081] 亲核官能团（第二组分）赖氨酸（结构式见下方），购自麦克林试剂公司。
[0083] 显色剂（第S组分）：抑&C蓝色#1 (结构式见下方），购自麦克林试剂。
阳0化]生理缓冲液（第四组分），有抑=7. 4的PBS缓冲溶液、0. 2M抑=6. 5的碳酸盐 缓冲液和0. 2MpH= 9. 78的碳酸盐缓冲液。
[0086] 水凝胶的制备方法：亲水官能团与亲电官能团的化学计量摩尔比为1:1。
[0087] 实施例一亲水组分为PEG的衍生物
[0088] 亲核组分为S赖氨酸，亲水组分为阳G的衍生物，溶剂为抑=7. 4的PBS缓冲液， 按照下面的过程进行凝胶的试验。
[0089] 先将含有亲核官能团的S赖氨酸溶于5yL的抑=7. 4的PBS缓冲溶液中，得到 A溶液；将含有亲水官能团的PEG衍生物和显色剂溶解在A溶液中，充分混合揽拌，约15s， 分别观察形成凝胶的情况。
[0090] 0.IM的抑=7. 4的PBS缓冲液的配方：称量4. 005g的氯化钢为试剂A;称量0.Ig 的氯化钟为试剂B;称量十二水合憐酸氨二钢1. 7907g为试剂C;称0. 135g的憐酸二氨钟为 试剂D;将试剂A、B、C和D四种物质，依次放在SOOmL的容量瓶中，然后进行溶解，得到的是 抑=7. 4的PBS缓冲液。
[0091] 通过W上实验现象的观察，不同亲水组分的PEG衍生物与相同亲核组分组成水凝 胶的成胶时间、溶胀率和降解周期均有不同，检测方法如下：
[0092] 1)成胶时间：水凝胶的成胶时间直接影响临床凝胶使用前后的手术过程，具体检 测方法是将第二组分和第=组分先溶解于生理稀释剂，然后与第一种组分混溶，揽拌约5s 开始计时，至形成凝胶为止，判定标准是采用牙签或类似物挑起凝胶溶液，呈拉丝状态即 可，记录成凝胶时间。
[0093] 2)溶胀率：检测方法为一定质量的水凝胶称重，记录原始质量，然后将水 凝胶置于已预热至37+rC的抑为7. 4憐酸缓冲液中，每隔几小时取出样品用滤 纸吸去表面水分，称量，至重量不再增加为止，结束称量。按下式计算凝胶溶胀率。
[0094] 3)体外降解周期：将一定质量的凝胶置于37±rC与血液等渗的抑为7.4憐酸盐 缓冲液中，每日观察直至肉眼看不见为止，记为凝胶体外降解时间。
[0095] 不同亲水组分的PEG衍生物与亲核组分组成水凝胶的结果如下表所示：
[0096]
[0098] 可W看出，WS赖氨酸为亲核组分，不同分子量的PEG衍生物为亲水组分，随着 PEG衍生物的分子量增加，其水凝胶的成胶时间越快，溶胀率变大，降解周期会部分延长，故 可根据实际应用情况灵活选择。
[0099] 实施例二亲核组分为=赖氨酸衍生物
[0100] 亲核组分为S赖氨酸衍生物，亲水组分为2-arm-PEG-NHS，溶剂为抑=7. 4的PBS 缓冲液，按照下面的过程进行凝胶的制备试验。 阳1〇U 先将含有亲核官能团的S赖氨酸衍生物溶于70yL的抑=7. 4的PBS缓冲溶液 中，得到溶液；立即将含有亲水官能团的2-arm-PEG-NHS溶解在溶液中，充分混合揽拌，约 5s，观察形成凝胶的情况。
[0102] 不同S赖氨酸衍生物与亲水组分PEG衍生物2-arm-PEG-N服组成水凝胶的情况如 下表所示： 阳103]
阳104] 实施例=采用不同的生理稀释剂缓冲液作为溶剂 阳1化]亲核组分为S赖氨酸，亲水组分为2-arm-PEG-NHS，溶剂为不同的生理稀释剂缓 冲液，按照下面的过程进行凝胶的试验。 阳106] 先将含有亲核官能团的=赖氨酸衍生物溶于70yL的不同生理稀释剂溶剂中，得 到溶液；将含有亲水官能团的2-arm-PEG-NHS溶解在溶液中，充分混合揽拌，约5s，观察形 成凝胶的情况。 阳107] 0. 2M抑=6. 5的憐酸缓冲液的配方：称4. 9g憐酸二氨钢，定溶到68. 5mU得溶 液A;称2. 4g十二水合憐酸氨二钢，定容到31. 5mL，得溶液B;将A、B两种溶液混合，得到 100血，0. 2M的抑=6. 5的憐酸盐缓冲溶液。
[0108] 0. 2M抑=9. 78的碳酸盐缓冲液的配方：称碳酸钢1. 1448g，定溶于40m