] S3 :氯化锋和氯化巧混合溶于适量蒸馈水中，制得溶质质量浓度为2%交联剂C，其 中氯化锋与氯化巧的质量比为1:1。
[0024] S4 :将步骤Sl制得的混合溶液A加入步骤S2制得的油相溶液B中，揽拌5~IOmin 或至均匀后，加入80ml步骤S3制得的交联剂C充分揽拌30~45min，交联形成水凝胶微球 D，静置沉淀，过滤。
[002引 S5 :将步骤S4制得的水凝胶微球D用150ml石油酸洗涂3次，之后用100mL1%稀 碱浸泡，再用30%、50%、70%及无水乙醇脱水4次，最后用蒸馈水冲洗3次，冷冻干燥后得海 藻酸锋巧盐/壳聚糖复合止血粉，即多聚糖止血粉。
[0026] 实施例= Sl:将3g的G/M=27:3的高古罗糖醒酸海藻酸钢加入100mL的蒸馈水中配制成0. 03g/ml的海藻酸钢溶液，将3g的N-脱乙酷度为96%，粘度为2.OPa?S的高粘度高脱乙酷度壳 聚糖加入100mL2%稀醋酸溶液中配制成O.Olg/ml的壳聚糖溶液。将上述壳聚糖溶液加入 海藻酸钢溶液中，均匀揽拌形成稳定的胶状溶液，即混合溶液A。
[0027] S2 :300ml液体石蜡与20ml聚山梨醋-80混合得油相溶液B。
[0028] S3 :氯化锋和氯化巧混合溶于适量蒸馈水中，制得溶质质量浓度为2%交联剂C，其 中氯化锋与氯化巧的质量比为1:1。
[002引 S4 :将步骤Sl制得的混合溶液A加入步骤S2制得的油相溶液B中，揽拌5~IOmin 或至均匀后，加入80ml步骤S3制得的交联剂C充分揽拌30~45min，交联形成水凝胶微球D，静置沉淀，过滤。
[0030] S5 :将步骤S4制得的水凝胶微球D用150ml石油酸洗涂3次，之后用100mL1%稀 碱浸泡，再用30%、50%、70%及无水乙醇脱水4次，最后用蒸馈水冲洗3次，冷冻干燥后得海 藻酸锋巧盐/壳聚糖复合止血粉，即多聚糖止血粉。
[0031] 实施例四 Sl:将2. 4g的G/M=17:3的高古罗糖醒酸海藻酸钢加入100mL的蒸馈水中配制成 0. 03g/ml的海藻酸钢溶液，将1. 2g的N-脱乙酷度为98%，粘度为2.OPa?S的高粘度高脱 乙酷度壳聚糖加入100mL2%稀醋酸溶液中配制成O.Olg/ml的壳聚糖溶液。将上述壳聚糖 溶液加入海藻酸钢溶液中，均匀揽拌形成稳定的胶状溶液，即混合溶液A。
[0032] S2 :300ml液体石蜡与20ml聚山梨醋-80混合得油相溶液B。
[0033] S3 :氯化锋和氯化巧混合溶于适量蒸馈水中，制得溶质质量浓度为2%交联剂C，其 中氯化锋与氯化巧的质量比为0. 75:1。
[0034] S4 :将步骤Sl制得的混合溶液A加入步骤S2制得的油相溶液B中，揽拌5~IOmin 或至均匀后，加入80ml步骤S3制得的交联剂C充分揽拌30~45min，交联形成水凝胶微球 D，静置沉淀，过滤。
[003引S5 :将步骤S4制得的水凝胶微球D用150ml石油酸洗涂3次，之后用100mL1%稀 碱浸泡，再用30%、50%、70%及无水乙醇脱水4次，最后用蒸馈水冲洗3次，冷冻干燥后得海 藻酸锋巧盐/壳聚糖复合止血粉，即多聚糖止血粉。
[0036] 为进一步说明本发明所制备的多聚糖止血粉具有更优异的止血活性，进行W下两 个对比实验，具体操作如下： 1、自制多聚糖止血粉样品C与Cleox止血粉做小鼠断尾止血效果对比实验，具体操作 如下： ① 分别称取0.Ig实施例制得的多聚糖止血粉样品和0.IgCleox止血粉，分别置于展 示瓶中，灭菌备用； ② 取五只同批次的巧7BL/6小鼠，称重，量尾长； ③ 用手术剪去小鼠尾长的=分之一后，立即将断尾伤口插入展示瓶中，同时计时。计算 血流停止时的小鼠出血量。
[0037] 2、将自制多聚糖止血粉与Cleox止血粉做体外凝血效果对比实验： ①SD大鼠称取重量，根据重量计算所需麻醉剂的量，腹腔注射10%水合氯醒； ②SD大鼠麻醉之后，打开胸腔，用注射器采集屯、脏血液，注入抗凝管中，备用； ③ 将称好的自制多聚糖止血粉和Cleox止血粉各4mg加入试管中，再向其中加入 1. 8ml抗凝全血溶液，最后向其中加入0. 18ml的化Clz溶液，开始计时； ④ 观察血液变化，直至血液出现明显凝固状态，停止计时，记录下凝血时间，每个样品 测=个平行样。
[0039] 上述实施例仅为本发明的较佳实施例，并非W此限制本发明的保护范围，故：凡对 本发明做出的等效变换，均应涵盖于本发明的保护范围之内。
【主权项】
1. 一种多聚糖止血粉，其特征在于，由 ① 高粘度高脱乙酰度壳聚糖，所述的高粘度高脱乙酰度壳聚糖，其N-脱乙酰度为90~ 98%，粘度为L0 ~2.OPa?s; ② 高古罗糖醛酸海藻酸钠，所述的高古罗糖醛酸海藻酸钠中古罗糖醛酸（G)与甘露糖 醛酸（M)之比为7~27:3; ③ 混合交联剂，所述的混合交联剂包含氯化锌和氯化钙；以及 ④ 液体石蜡和聚山梨酯-80制备而成；所述的止血粉组分如下： 高粘度高脱乙酰度壳聚糖1~3g; 高古罗糖醛酸海藻酸钠1~3g; 混合交联剂80ml; 液体石錯100~300ml; 聚山梨酯-80 10~30ml。2. 制备如权利要求1所述多聚糖止血粉的方法，其特征在于，制备方法如下： 将高粘度高脱乙酰度壳聚糖溶于稀醋酸中制得壳聚糖溶液，将高古罗糖醛酸海藻酸钠 溶于蒸馏水中制得海藻酸钠溶液，将上述两种溶液混合制得混合溶液A; 将液体石蜡与聚山梨酯-80混合获得油相溶液B; 将氯化锌和氯化钙混合溶于蒸馏水中，制得交联剂C; 将混合溶液A加入油相溶液B中，搅拌5~IOmin或至均匀后，加入交联剂C充分搅拌 30~45min，交联形成水凝胶微球D，静置沉淀，过滤； 将制得的水凝胶微球D用石油醚洗涤、稀碱浸泡、乙醇梯度脱水、洗净、冷冻干燥制得 多聚糖止血粉。3. 根据权利要求2所述多聚糖止血粉的制备方法，其特征在于，所述制备方法步骤Sl 中，所述的高粘度高脱乙酰度壳聚糖，其N-脱乙酰度为90~98%，粘度为I. 0~2.OPa?s; 所述的高古罗糖醛酸海藻酸钠中古罗糖醛酸（G)与甘露糖醛酸（M)之比为7~27:3。4. 根据权利要求2所述多聚糖止血粉的制备方法，其特征在于，所述步骤Sl中，高粘度 高脱乙酰度壳聚糖和海藻酸钠的质量比为1:1~3,所述的稀醋酸溶液浓度为2%。5. 根据权利要求2所述多聚糖止血粉的制备方法，其特征在于，所述的步骤S2中，液体 石蜡和聚山梨酯-80的体积比为10~15:1。6. 根据权利要求2所述多聚糖止血粉的制备方法，其特征在于，所述步骤S3中，氯化锌 和氯化钙的质量比为0. 75~1. 5:1，所述的交联剂C溶液浓度为2%。
【专利摘要】本发明涉及生物医药技术领域，尤其涉及一种多聚糖止血粉及其制备方法，其包括如下步骤：将高粘度高脱乙酰度壳聚糖与高古罗醛酸（G）海藻酸钠混合，之后加入氯化锌和氯化钙混合凝固浴进行搅拌交联，从而获得一种多聚糖止血粉。本发明还提供这种止血粉的组分及其含量。本发明使用高黏度高脱乙酰度壳聚糖、高G含量海藻酸盐作为止血粉的主要成分，获得的高黏度高脱乙酰度壳聚糖/海藻酸锌钙盐复合微球止血效果好。
【IPC分类】A61L15/28, A61L15/26, A61L15/40, A61L26/00
【公开号】CN105169459
【申请号】
【发明人】韦加娜, 陈锦涛, 吴帅, 何立彬
【申请人】广东泰宝医疗科技股份有限公司
【公开日】2015年12月23日
【申请日】2015年10月26日