条件同实施例1。
[0033]实施例3:采用H-103型大孔吸附树脂吸附结合超临界COf冼脱去除人参皂苷中的腐霉利，步骤如下:
[0034]步骤一、称取一定量的H-103型大孔吸附树脂，按实施例1步骤一处理，最终将处理好的树脂湿法装柱。
[0035]步骤二、配制人参皂苷样品溶液，同实施例2。
[0036]步骤三、树脂吸附:同实施例2。
[0037]步骤四、树脂干燥:将吸附了人参皂苷样品溶液的H-103型大孔吸附树脂在50°C的烘箱里干燥4h ;
[0038]步骤五、超临界洗脱:将干燥好的H-103型大孔吸附树脂装入超临界萃取柱中，然后，依次进行，第一步腐霉利的脱除:超临界CO2压力20MPa，温度45°C，夹带剂流速ImL/min，夹带剂由正己烷与丙酮组成，正己烷与丙酮的体积比为7:3，萃取时间为2h ;第二步人参皂苷的洗脱:超临界CO2压力20MPa，温度50°C，夹带剂流速1.5mL/min，夹带剂由乙醇与水组成，乙醇与水的体积比为8:2，萃取时间为2h ；
[0039]步骤六、样品干燥:同实施例1，最终得低腐霉利残留的人参皂苷成品。经测定腐霉利的脱除率为98.52%，腐霉利含量为0.7ppm，人参皂苷的回收率为90.43% ;所用检测设备与工艺条件同实施例1。
[0040]实施例4:采用D-101-1型大孔吸附树脂吸附结合超临界C(V冼脱去除人参皂苷中的腐霉利，步骤如下:
[0041]步骤一、按照实施例1的方法进行D-101-1型大孔吸附树脂的预处理，将处理好的树脂湿法装柱。
[0042]步骤二、按照实施例1的方法配制固液比为0.075g/mL的人参皂苷样品溶液。
[0043]步骤三、树脂吸附:量取I倍于D-101-1型大孔吸附树脂体积的人参皂苷样品溶液用蠕动栗按3BV/h的流速过吸附柱，
[0044]步骤四、树脂干燥:将吸附了人参皂苷样品溶液的D-101-1型大孔吸附树脂在60°C的烘箱里干燥4h ;
[0045]步骤五、超临界洗脱:将干燥好的D-101-1型大孔吸附树脂装入超临界萃取柱中，然后，依次进行，第一步腐霉利的脱除:超临界CO2压力30MPa，温度55°C，夹带剂流速
1.5mL/min，夹带剂由正己烷与丙酮组成，正己烷与丙酮的体积比为7:3，萃取时间为3h ;第二步人参皂苷的洗脱:超临界CO2压力30MPa，温度60°C，夹带剂流速2mL/min，夹带剂由乙醇与水组成，乙醇与水的体积比为7:3，萃取时间为3h ；
[0046]步骤六、样品干燥:同实施例1，最终得低腐霉利残留的人参皂苷产品。经测定腐霉利的脱除率为99.81%，腐霉利含量低于1ppb,人参皂苷的回收率为91.93%，所用检测设备与工艺条件同实施例1。
[0047]实施例5:采用D-101-1型大大孔吸附树脂吸附结合超临界COf冼脱去除人参皂苷中的腐霉利，步骤如下:
[0048]步骤一、按照实施例1的方法进行D-101-1型大孔吸附树脂的预处理，将处理好的树脂湿法装柱。
[0049]步骤二、按照实施例1的方法配制固液比为0.lg/mL的人参皂苷样品溶液。
[0050]步骤三、树脂吸附:量取I倍于D-101-1型大孔吸附树脂体积的人参皂苷样品溶液用蠕动栗按lBV/h的流速过吸附柱，
[0051 ] 步骤四、按照实施例4的方法进行树脂干燥；
[0052]步骤五、超临界洗脱:将干燥好的D-101-1型大孔吸附树脂装入超临界萃取柱中，然后，依次进行，第一步腐霉利的脱除:超临界CO2压力20MPa，温度65°C，夹带剂流速2mL/min，夹带剂由正己烷与丙酮组成，正己烷与丙酮的体积比为6:4，萃取时间为4h ;第二步人参皂苷的洗脱:超临界CO2压力20MPa，温度50°C，夹带剂流速lmL/min，夹带剂由乙醇与水组成，乙醇与水的体积比为9:1，萃取时间为3h ；
[0053]步骤六、样品干燥:同实施例1，最终得低腐霉利残留的人参皂苷产品。经测定腐霉利的脱除率为99.94%，腐霉利含量远低于1ppb,人参皂苷的回收率为91.13%。所用检测设备与工艺条件同实施例1。
[0054]实施例6:采用D-101-1型大孔吸附树脂吸附结合超临界COf冼脱去除人参皂苷中的腐霉利，步骤如下:
[0055]步骤一、按照实施例1的方法进行D-101-1型大孔吸附树脂的预处理，将处理好的树脂湿法装柱。
[0056]步骤二、按照实施例1的方法配制固液比为0.025g/mL的人参皂苷样品溶液；
[0057]步骤三、按照实施例5的方法进行树脂吸附；
[0058]步骤四、按照实施例4的方法进行树脂干燥；
[0059]步骤五、超临界洗脱:将干燥好的D-101-1型大孔吸附树脂装入超临界萃取柱中，然后，依次进行，第一步腐霉利的脱除:超临界CO2压力20MPa，温度55°C，夹带剂流速
1.5mL/min，夹带剂由正己烷与丙酮组成，正己烷与丙酮的体积比为6:4，萃取时间为3h ;第二步按照实施例5的方法进行人参皂苷的洗脱；
[0060]步骤六、样品干燥:同实施例1，最终得低腐霉利残留的人参皂苷产品。经测定腐霉利的脱除率为99.98%，腐霉利含量远低于1ppb,人参皂苷的回收率为91.43%。所用检测设备与工艺条件同实施例1。
[0061]综上所述，上样流速、温度、压力、夹带剂流速、正己烷与丙酮的体积比、乙醇与水的体积比均对腐霉利脱除率和人参皂苷回收率有影响，其中，正己烷与丙酮的体积比、乙醇与水的体积比的影响最大，且呈线性变化。正己烷与丙酮的体积比越大，腐霉利脱除效果越好；乙醇与水的体积比越大，人参皂苷的回收率越高。
[0062]尽管上面对本发明进行了描述，但是本发明并不局限于上述的【具体实施方式】，上述的【具体实施方式】仅仅是示意性的，而不是限制性的，本领域的普通技术人员在本发明的启示下，在不脱离本发明宗旨的情况下，还可以做出很多变形，这些均属于本发明的保护之内。
【主权项】
1.一种大孔吸附树脂吸附结合超临界CO2洗脱去除人参皂苷中腐霉利的方法，其中，大孔吸附树脂采用D-101-1型大孔吸附树脂、H-103型大孔吸附树脂和AB-8型大孔吸附树脂中的一种；具体步骤如下: 步骤一、大孔吸附树脂的预处理:将大孔吸附树脂填装至吸附柱2/3高处，向吸附柱内加入乙醇，使其液面高于大孔吸附树脂层面，浸泡24h ;接着用乙醇以2BV/h的流速通过，洗至流出的乙醇中无脂溶性杂质，然后用蒸馏水洗至无异味；再用质量百分比为4%的NaOH浸泡12h，用蒸馏水洗至中性；最后用质量百分比为5%的HCl浸泡12h，用蒸馏水洗至中性； 步骤二、配制人参皂苷样品溶液:称取一定质量的人参皂苷溶于蒸馏水，配置成固液比为0.025-0.lg/mL的人参皂苷样品溶液； 步骤三、树脂吸附:用蠕动栗将I倍于大孔吸附树脂体积的人参皂苷样品溶液按l-3BV/h的速度通过吸附柱； 步骤四、树脂干燥:将吸附了人参皂苷样品溶液的大孔吸附树脂在40-60°C的烘箱里干燥4h ; 步骤五、超临界洗脱:将干燥好的大孔吸附树脂装入超临界萃取柱中，然后，依次进行: 腐霉利的脱除:超临界CO2压力10-30MPa，温度35_65°C，夹带剂流速0.5_2mL/min，夹带剂由正己烷与丙酮组成，正己烷与丙酮的体积比为6:4-9:1萃取时间为l-4h ; 人参皂苷的洗脱:超临界CO2压力15-30MPa，温度40-60°C，夹带剂流速l_3mL/min，夹带剂由乙醇与水组成，乙醇与水的体积比为1:1-9:1，萃取时间为l_3h ; 步骤六、样品干燥:将步骤五处理后得到的溶液在60°C下经旋转蒸发去除溶剂，得到人参阜苷成品。
【专利摘要】本发明公开了一种大孔吸附树脂吸附结合超临界CO2洗脱去除人参皂苷中腐霉利的方法，步骤如下：大孔吸附树脂的预处理；配制人参皂苷样品溶液；树脂吸附和干燥；超临界洗脱：将干燥好的大孔吸附树脂装入超临界萃取柱中，然后，依次进行腐霉利的脱除和人参皂苷的洗脱，最后将样品干燥得到腐霉利含量低于10ppb的人参皂苷产品。本发明方法腐霉利脱除率高达96.7％以上，人参皂苷回收率高达89％以上；并且本方法在腐霉利脱除、人参皂苷洗脱的同时实现了树脂的再生，降低了生产成本，缩短了生产周期。
【IPC分类】A61K36/258
【公开号】CN105168281
【申请号】
【发明人】唐韶坤, 李广涛
【申请人】天津大学
【公开日】2015年12月23日
【申请日】2015年8月31日