e中的K2D方法进行蛋白质二级结构分析，计算其中α -螺旋(a -helix)、β -折叠(β -sheet)和无规则卷曲(Random coils)的含量。高静压对原肌球蛋白二级结构的影响显著:在未经处理的原肌球蛋白的二级结构中，含有81%的α-螺旋结构和19%的无规则卷曲。本高静压处理后的原肌球蛋白二级结构为含有66%的α-螺旋结构，5%的折叠结构和29%的无规则卷曲。这说明本高静压处理改变了其蛋白二级结构从而降低其致敏性。
[0037]实施例4
[0038]本实施例涉及一种采用高静压降低鱿鱼中原肌球蛋白致敏性的方法；具体步骤如下:
[0039]从新鲜太平洋鱿鱼肉中提取、纯化并鉴定鱿鱼原肌球蛋白。鱿鱼原肌球蛋白溶液真空包装于“聚酰胺-聚丙烯”复合膜(PA/CPP)塑料袋中。将高静压设备的高压容器中装满水，且循环水系统控制温度在25°C。将装有鱿鱼原肌球蛋白的真空包装袋置于高静压设备的物料腔中，在处理压力600MPa，处理温度26°C，高静压处理时间lOmin，高静压升压速率8.0MPa/s，高静压降压时间3s的条件下处理，得到降低鱿鱼原肌球蛋白的致敏性的产品。采用鱿鱼过敏患者血清来评估高静压前后原肌球蛋白造成人体内过敏的情况。未处理原肌球蛋白和患者血清的IgE结合活性试验之后，在450nm下测定吸光度值为0.79±0.01 ;而同样的实验条件下高静压处理后的450nm下测定吸光度值为0.61±0.01。这说明高静压降低了鱿鱼原肌球蛋白引起的过敏反应。
[0040]利用蛋白二级结构变化解释其致敏性变化，采用圆二色谱检测原肌球蛋白质二级结构的变化。用Dichroweb procedure中的K2D方法进行蛋白质二级结构分析，计算其中α -螺旋(a -helix)、β -折叠(β -sheet)和无规则卷曲(Random coils)的含量。高静压对原肌球蛋白二级结构的影响显著:在未经处理的原肌球蛋白的二级结构中，含有81%的α -螺旋结构和19%的无规则卷曲。本高静压处理后的原肌球蛋白二级结构为含有38%的α-螺旋结构，14%的β_折叠结构和48%的无规则卷曲。这说明本高静压处理改变了其蛋白二级结构从而降低其致敏性。
[0041]实施例5
[0042]本实施例涉及一种采用高静压降低鱿鱼中原肌球蛋白致敏性的方法；具体步骤如下:
[0043]从新鲜太平洋鱿鱼肉中提取、纯化并鉴定鱿鱼原肌球蛋白。鱿鱼原肌球蛋白溶液真空包装于“聚酰胺-聚丙烯”复合膜(PA/CPP)塑料袋中。将高静压设备的高压容器中装满水，且循环水系统控制温度在25°C。将装有鱿鱼原肌球蛋白的真空包装袋置于高静压设备的物料腔中，在处理压力400MPa，处理温度24°C，高静压处理时间20min，高静压升压速率8.0MPa/s，高静压降压时间2s的条件下处理，得到降低鱿鱼原肌球蛋白的致敏性的产品。采用原肌球蛋白与兔抗鱿鱼原肌球蛋白多克隆抗体进行ELISA试验，检测超高压前后原肌球蛋白的致敏性。未处理原肌球蛋白和兔抗鱿鱼原肌球蛋白多克隆抗体进行ELISA试验之后，在450nm下测定吸光度值为1.64±0.03 ;而同样的实验条件下高静压处理后的450nm下测定吸光度值为1.18±0.01。这说明高静压降低了鱿鱼原肌球蛋白引起的过敏反应。
[0044]利用蛋白二级结构变化解释其致敏性变化，采用圆二色谱检测原肌球蛋白质二级结构的变化。用Dichroweb procedure中的K2D方法进行蛋白质二级结构分析，计算其中α -螺旋(a -helix)、β -折叠(β -sheet)和无规则卷曲(Random coils)的含量。高静压对原肌球蛋白二级结构的影响显著:在未经处理的原肌球蛋白的二级结构中，含有81%的α-螺旋结构和19%的无规则卷曲。本高静压处理后的原肌球蛋白二级结构为含有60%的α-螺旋结构，7%的折叠结构和33%的无规则卷曲。这说明本高静压处理改变了其蛋白二级结构从而降低其致敏性。
[0045]实施例6
[0046]本实施例涉及一种采用高静压降低鱿鱼中原肌球蛋白致敏性的方法；具体步骤如下:
[0047]从新鲜太平洋鱿鱼肉中提取、纯化并鉴定鱿鱼原肌球蛋白。鱿鱼原肌球蛋白溶液真空包装于“聚酰胺-聚丙烯”复合膜(PA/CPP)塑料袋中。将高静压设备的高压容器中装满水，且循环水系统控制温度在25°C。将装有鱿鱼原肌球蛋白的真空包装袋置于高静压设备的物料腔中，在处理压力600MPa，处理温度23°C，高静压处理时间lOmin、间歇5min、然后再处理lOmin，高静压升压速率8.5MPa/s，高静压降压时间4s的条件下处理，得到降低鱿鱼原肌球蛋白的致敏性的产品。采用原肌球蛋白与兔抗鱿鱼原肌球蛋白多克隆抗体进行ELISA试验，检测超高压前后原肌球蛋白的致敏性。未处理原肌球蛋白和兔抗鱿鱼原肌球蛋白多克隆抗体进行ELISA试验之后，在450nm下测定吸光度值为1.64±0.03 ;而同样的实验条件下高静压处理后的450nm下测定吸光度值为1.09±0.01。这说明高静压降低了鱿鱼原肌球蛋白引起的过敏反应。
[0048]利用蛋白二级结构变化解释其致敏性变化，采用圆二色谱检测原肌球蛋白质二级结构的变化。用Dichroweb procedure中的K2D方法进行蛋白质二级结构分析，计算其中α -螺旋(a -helix)、β -折叠(β -sheet)和无规则卷曲(Random coils)的含量。高静压对原肌球蛋白二级结构的影响显著:在未经处理的原肌球蛋白的二级结构中，含有81%的α -螺旋结构和19%的无规则卷曲。本高静压处理后的原肌球蛋白二级结构为含有37%的α-螺旋结构，13%的β_折叠结构和50%的无规则卷曲。这说明本高静压处理改变了其蛋白二级结构从而降低其致敏性。
[0049]对比例I
[0050]从新鲜太平洋鱿鱼肉中提取、纯化并鉴定鱿鱼原肌球蛋白。鱿鱼原肌球蛋白溶液真空包装于“聚酰胺-聚丙烯”复合膜(PA/CPP)塑料袋中。将高静压设备的高压容器中装满水，且循环水系统控制温度在25°C。将装有鱿鱼原肌球蛋白的真空包装袋置于高静压设备的物料腔中，在处理压力50MPa，处理温度25°C，高静压处理时间20min，高静压升压速率8.0MPa/s，高静压降压时间3s的条件下处理，得到鱿鱼原肌球蛋白的致敏性未变化的产品。采用原肌球蛋白与兔抗鱿鱼原肌球蛋白多克隆抗体进行ELISA试验，检测超高压前后原肌球蛋白的致敏性。未处理原肌球蛋白和兔抗鱿鱼原肌球蛋白多克隆抗体进行ELISA试验之后，在450nm下测定吸光度值为1.64±0.03 ;而同样的实验条件下高静压处理后的450nm下测定吸光度值为1.63±0.02。这说明此高静压处理条件对鱿鱼原肌球蛋白的过敏反应未有影响。
[0051]对比例2
[0052]从新鲜太平洋鱿鱼肉中提取、纯化并鉴定鱿鱼原肌球蛋白。鱿鱼原肌球蛋白溶液真空包装于“聚酰胺-聚丙烯”复合膜(PA/CPP)塑料袋中。将高静压设备的高压容器中装满水，且循环水系统控制温度在25°C。将装有鱿鱼原肌球蛋白的真空包装袋置于高静压设备的物料腔中，在处理压力700MPa，处理温度23°C，高静压处理时间lOmin，高静压升压速率8.0MPa/s，高静压降压时间3s的条件下处理，得到鱿鱼原肌球蛋白的致敏性未变化的产品。采用原肌球蛋白与兔抗鱿鱼原肌球蛋白多克隆抗体进行ELISA试验，检测超高压前后原肌球蛋白的致敏性。
[0053]对比例3
[0054]从新鲜太平洋鱿鱼肉中提取、纯化并鉴定鱿鱼原肌球蛋白。鱿鱼原肌球蛋白溶液真空包装于“聚酰胺-聚丙烯”复合膜(PA/CPP)塑料袋中。将高静压设备的高压容器中装满水，且循环水系统控制温度在25°C。将装有鱿鱼原肌球蛋白的真空包装袋置于高静压设备的物料腔中，在处理压力200MPa，处理温度25°C，高静压处理时间lmin，高静压升压速率8.0MPa/s，高静压降压时间3s的条件下处理，得到鱿鱼原肌球蛋白的致敏性未变化的产品。采用原肌球蛋白与兔抗鱿鱼原肌球蛋白多克隆抗体进行ELISA试验，检测超高压前后原肌球蛋白的致敏性。未处理原肌球蛋白和兔抗鱿鱼原肌球蛋白多克隆抗体进行ELISA试验之后，在450nm下测定吸光度值为1.64±0.03 ;而同样的实验条件下高静压处理后的450nm下测定吸光度值为1.65±0.02。这说明此高静压处理条件对鱿鱼原肌球蛋白的过敏反应未有影响。
[0055]以上对本发明的具体实施例进行了描述。需要理解的是，本发明并不局限于上述特定实施方式，本领域技术人员可以在权利要求的范围内做出各种变形或修改，这并不影响本发明的实质内容。
【主权项】
1.一种采用高静压降低鱿鱼中原肌球蛋白致敏性的方法，其特征在于，包括如下步骤: A、将鱿鱼原肌球蛋白真空包装于塑料袋中； B、将装有鱿鱼原肌球蛋的塑料袋进行高静压处理。2.根据权利要求1所述的采用高静压降低鱿鱼中原肌球蛋白致敏性的方法，其特征在于，所述鱿鱼原肌球蛋白是通过从新鲜鱿鱼肉中提取、纯化并鉴定获得。3.根据权利要求1所述的采用高静压降低鱿鱼中原肌球蛋白致敏性的方法，其特征在于，步骤B中，所述高静压处理的压力为200?600MPa。4.根据权利要求1所述的采用高静压降低鱿鱼中原肌球蛋白致敏性的方法，其特征在于，步骤B中，所述高静压处理的时间为10?20min。5.根据权利要求1所述的采用高静压降低鱿鱼中原肌球蛋白致敏性的方法，其特征在于，步骤B中，所述高静压处理的温度为23?27 °C。6.根据权利要求5所述的采用高静压降低鱿鱼中原肌球蛋白致敏性的方法，其特征在于，所述温度是通过控制高静压设备中高压容器中的循环水温度来实现的。7.根据权利要求1所述的采用高静压降低鱿鱼中原肌球蛋白致敏性的方法，其特征在于，步骤B中，所述高静压处理的升压速率为8.0?8.5MPa/So8.根据权利要求1所述的采用高静压降低鱿鱼中原肌球蛋白致敏性的方法，其特征在于，步骤B中，所述高静压处理的降压时间不超过4s。9.根据权利要求1所述的采用高静压降低鱿鱼中原肌球蛋白致敏性的方法，其特征在于，步骤A中，所述塑料袋为聚酰胺/聚丙烯复合膜材料。10.根据权利要求1所述的采用高静压降低鱿鱼中原肌球蛋白致敏性的方法，其特征在于，步骤A中，所述真空包装的真空度为0.1MPao
【专利摘要】本发明提供了一种采用高静压降低鱿鱼中原肌球蛋白致敏性的方法，包括将鱿鱼原肌球蛋白真空包装于塑料袋中，然后置于高静压设备中进行高静压处理。该方法能有效降低鱿鱼原肌球蛋白的致敏性。本发明所涉及的高静压处理具有极显著的工艺简单、操作安全、高效节能、适合大规模处理生产等优点，为潜在的鱿鱼致敏性降低生产应用提供了平台。
【IPC分类】A23L1/025, A23L1/333
【公开号】CN105167009
【申请号】
【发明人】邓云, 张意锋, 金雅芳
【申请人】上海交通大学
【公开日】2015年12月23日
【申请日】2015年9月14日