方法免疫成年 产蛋鸡，第1次免疫剂量为：口服免疫是将疫苗液加入到饮水中，加入量为5mL;滴鼻免疫 是将疫苗液滴入蛋鸡鼻腔，滴入量为lmL;-周后按前述方法加强免疫，连续加强免疫5次， 共免疫6次，免疫结束后第6周，卵黄抗体效价达2W或以上；收集被免疫鸡所产鸡蛋，分离 出卵黄，经冷冻干燥，制得抗对虾幼体弧菌病卵黄抗体冻干粉。
[0016] 实施例2, 一种抗对虾幼体弧菌病微胶囊饲料，它由以下重量配比的三种原料组成 微胶囊饲料， (1) 抗对虾幼体弧菌病卵黄抗体冻干粉85% ; (2) 黄芪粉10%% ; (3) 0 _环糊精5% ; 所述的抗对虾幼体弧菌病卵黄抗体冻干粉制备方法与实施例1相同。
[0017] 实施例3, 一种抗对虾幼体弧菌病微胶囊饲料，它由以下重量配比的三种原料组成 微胶囊饲料， (1) 抗对虾幼体弧菌病卵黄抗体冻干粉82. 5% ; (2) 黄芪粉11%; (3) 环糊精 6. 5%; 所述的抗对虾幼体弧菌病卵黄抗体冻干粉制备方法与实施例1相同。
[0018] 实施例4,实施例1或2或3所述的抗对虾幼体弧菌病微胶囊饲料中：抗对虾幼体 弧菌病卵黄抗体冻干粉制备方法步骤④中，冷冻干燥时，蛋黄液厚度6_，冻干时间为10h。
[0019] 实施例5,实施例1或2或3或4所述的抗对虾幼体弧菌病微胶囊饲料中：所述的 黄芪粉的粒径在800~1000目，所述的0 -环糊精的纯度不低于80%。
[0020] 实施例6,实施例1 一 5任何一项所述的抗对虾幼体弧菌病微胶囊饲料中：采用喷 雾干燥(喷口温度在140°C)的方式，制得微胶囊干粉饲料。
[0021] 实施例7,本发明抗对虾幼体弧菌病微胶囊饲料的应用实验及其结果。
[0022] 实验时间：2014年度4月~5月。
[0023] 实验地点：江苏省淮海工学院水产动物病害实验室。
[0024] 实验动物：中国对虾蚤状幼体及糠虾幼体。
[0025] (1)使用抗对虾幼体弧菌病微胶囊饲料。使用时以所获得的抗体效价在21(：的抗对 虾幼体弧菌病卵黄抗体冻干粉82. 5%，粒径在900目的黄芪粉11%，含量在80%以上的0 -环 糊精6. 5%，上述原料经喷雾干燥(喷口温度在140°C)制得微胶囊干粉。抗对虾幼体弧菌病 卵黄抗体冻干粉的制法参照实施例1。
[0026] (2)实验组中国对虾蚤状幼体及糠虾幼体(各500尾）投喂本发明抗对虾幼体弧 菌病微胶囊饲料添加剂（30%)及市售虾片（70%)，对照组中国对虾蚤状幼体及糠虾幼体(各 500尾）投喂市售虾片。
[0027] (3)投喂4d后，分别测定实验组与对照组的中国对虾蚤状幼体及糠虾幼体的成活 率。
[0028] (4)投喂4d后，对实验组与对照组中国对虾蚤状幼体及糠虾幼体进行保护力检 验，分别取幼体150尾，用副溶血弧菌及哈氏弧菌混合菌液进行浸浴感染，菌体终浓度均达 到1. 8X106CFU/mL。试验期间继续按上述（2)进行投喂，试验期为72h。
[0029] (5)实验结果：实验组中国对虾蚤状幼体及糠虾幼体投喂实验例2所述的抗对虾 幼体弧菌病微胶囊饲料（30%)及市售虾片（70%)后，可获得较高的抗病能力，成活率比对照 组高34%。实验幼体用副溶血弧菌及哈氏弧菌混合菌液进行浸浴感染，投喂实验例2所述的 抗对虾幼体弧菌病微胶囊饲料添加剂（30%)及市售虾片（70%)的实验组，幼体感染72h后存 活率达76%，投喂市售虾片对照组幼体存活率仅为32%。实验结果表明抗对虾幼体弧菌病 微胶囊饲料可使中国对虾蚤状幼体及糠虾幼体获得较高的免疫保护力。
【主权项】
1. 一种抗对虾幼体弧菌病微胶囊饲料，其特征在于，它由以下重量配比的三种原料组 成微胶囊饲料， (1) 抗对虾幼体弧菌病卵黄抗体冻干粉80~85% ; (2) 黄芪粉 10%~12% ; (3 ) 0 _ 环糊精 5~8% ; 所述的抗对虾幼体弧菌病卵黄抗体冻干粉制备方法步骤如下： ① 将引起对奸幼体弧菌病的病原副溶血弧菌（mio 及哈氏 弧菌（mriokxl菌株分别接种在普通营养肉汤培养基上，28-30°C摇床培养 24h，加入体积终浓度0. 3%的甲醛28°C灭活48h，离心得灭活菌体； ② 取黄芪用蒸馏水浸泡30-60min后煎煮，过滤，浓缩至终浓度为原药lg/mL，得黄芪浸 出液； ③ 将两种灭活菌体与黄芪浸出液混合，制得水剂型疫苗，疫苗液中病原副溶血弧菌VPl 及哈氏弧菌kxl免疫原分别为10ncells/mL，黄芪浸出液为lg/mL; ④ 用制得的两种病原弧菌水剂型灭活疫苗，采用口服及滴鼻联合免疫的方法免疫成年 产蛋鸡，第1次免疫剂量为：口服免疫是将疫苗液加入到饮水中，加入量为5mL;滴鼻免疫 是将疫苗液滴入蛋鸡鼻腔，滴入量为ImL;-周后按前述方法加强免疫，连续加强免疫5次， 共免疫6次，免疫结束后第6周，卵黄抗体效价达2 1°或以上；收集被免疫鸡所产鸡蛋，分离 出卵黄，经冷冻干燥，制得抗对虾幼体弧菌病卵黄抗体冻干粉。2. 根据权利要求1所述的抗对虾幼体弧菌病微胶囊饲料，其特征在于：抗对虾幼体弧 菌病卵黄抗体冻干粉制备方法步骤④中，冷冻干燥时，蛋黄液厚度6_，冻干时间为10h。3. 根据权利要求1所述的抗对虾幼体弧菌病微胶囊饲料，其特征在于：所述的黄芪粉 的粒径在800~1000目，所述的P-环糊精的纯度不低于80%。4. 根据权利要求1所述的抗对虾幼体弧菌病微胶囊饲料，其特征在于：采用喷雾干燥 的方式，制得微胶囊干粉饲料。5. 根据权利要求1所述的抗对虾幼体弧菌病微胶囊饲料，其特征在于，各原料的重量 配比如下： (1) 抗对虾幼体弧菌病卵黄抗体冻干粉82. 5% ; (2) 黄芪粉11%; (3) (6-环糊精 6. 5%。
【专利摘要】本发明公开了一种抗对虾幼体弧菌病微胶囊饲料，该微胶囊饲料由三种原料组成，抗对虾幼体弧菌病卵黄抗体冻干粉、黄芪粉及β-环糊精；其中抗对虾幼体弧菌病卵黄抗体冻干粉，主要是使对虾幼体降低或免受副溶血弧菌及哈氏弧菌的感染，黄芪粉是提高对虾幼体免疫力，β-环糊精主要是使卵黄抗体冻干粉起到包埋缓释作用。该微胶囊饲料将所获得的抗体效价在210的抗对虾幼体弧菌病卵黄抗体冻干粉80~85%、黄芪粉10%~12%，β-环糊精（5~8%）经喷雾干燥制得微胶囊干粉，该微胶囊饲料按一定的比例与市售虾片一起投喂使用，能预防与治疗对虾幼体培育期间由病原副溶血弧菌及哈氏弧菌引起的疾病，增加对虾育苗产量，显著地提高对虾育苗生产的经济效益。解决目前对虾育苗生产过程中易发生弧菌病的问题。
【IPC分类】A23K1/14, A23K1/18, A23K1/10
【公开号】CN105166574
【申请号】
【发明人】张晓君, 孙晶晶, 杜雪地, 毕可然, 付立霞, 苗淑彦, 徐加涛, 朱强
【申请人】扬州大学
【公开日】2015年12月23日
【申请日】2015年10月16日